高雅君
- 作品数：4 被引量：4H指数：1
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- 原位杂交检测lin-4 mRNA在Caenorhabditis elegans中的表达被引量：1
- 2007年
- lin-4是控制Caenorhabditis elegans(C.elegans)幼虫发育的异时性基因,也是一种小RNA分子(microRNA)。通过整体原位杂交检测小RNA lin-4在野生型和lin-14、lin-28突变体中的区域性表达,探讨lin-4在C.elegans发育时空控制中的作用。结果表明:lin-4 mRNA在胚胎发育的早期和中期表达,胚胎后期至L1期末没有表达,之后又持续表达,成虫中也可以检测到lin-4 mRNA的存在。在lin-14和lin-28突变体中,lin-4的表达基本与野生型一致,不受lin-14、lin-28基因突变的影响,说明lin-14和lin-28是lin-4的下游基因。
- 高雅君杨玉荣
- 关键词：CAENORHABDITISELEGANS原位杂交
- 细菌介导的发夹结构双链RNA对秀丽小杆线虫中par-1基因的RNA干扰被引量：2
- 2007年
- 秀丽小杆线虫(Caenorhabditis elegans)是一种重要的模式生物,目前在C.elegans中发现的许多基因在序列和功能上与哺乳动物的基因有很高的同源性,对其基因功能的研究有助于阐明哺乳动物的基因功能。为检测细菌介导的通过发夹结构表达双链RNA(dsRNA)的RNA干扰(RNAi)在C.elegans中的作用效果,我们设计并构建了可以转录表达母源极性基因par-1的发夹dsRNA的RNAi载体,并转入E.coli HT115中,经过IPTG诱导后浓缩。浓缩菌液在25℃下喂食C.elegans48h后,观察C.elegans胚胎发育情况,同时以含有空载体的菌液作为对照,并与par-1突变体及野生型比较。结果显示:发夹结构表达的dsRNA对par-1基因进行RNAi后,虫体内par-1 mRNA几乎消失,C.elegans早期胚胎分裂不对称性丧失,par-1(RNAi)干扰率在95%以上。
- 高雅君杨玉荣
- 关键词：秀丽小杆线虫PAR-1发夹结构RNAI
- 极性基因在C．elegans早期发育中的相互作用
- 细胞极性(cell polarity)是多种不同类型细胞的共同特征,对细胞的分化和功能是必需的。在 C．elegans 中 par 基因家族包括 par-1到 par-6六种基因,除 par-2以外,其余几种在 C．el...
- 杨玉荣高雅君
- 文献传递
- 细菌介导的RNA干扰对C.elegans中par-3基因的作用被引量：1
- 2006年
- 设计并构建了针对par-3基因的发夹RNA载体,将构建好的质粒转入大肠杆菌HT115,25℃喂食Caenorhabditiselegans(C.elegans)野生型虫体,24h后观察par-3(RNA干扰)C.elegans的胚胎发育情况。结果显示通过喂食形成发夹结构dsRNA的细菌可以对C.elegans中par-3基因进行RNA干扰,干扰率可以达到60%以上。干扰后的早期胚胎发育丧失第一次卵裂的不对称性,第二次卵裂的纺锤体方向发生改变,与par-3突变体的观察结果一致,为进一步在mex-3转基因虫体中通过RNA干扰研究基因表达打下了基础。
- 杨玉荣高雅君
- 关键词：RNA干扰克隆
