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食品中肉类成分种属鉴别技术研究进展被引量：55: 2012年; 肉与肉制品的掺杂、掺假是食品质量控制面临的重要挑战。食品中肉类成分的鉴别与分析技术已逐步形成了分别以蛋白质检测和以核酸检测为基础的方法体系,其鉴别精度可达属与亚属水平,检测灵敏度也达到了纳克级。近年来,食品中肉类成分的定量检测与溯源又成为了本领域中的新研究热点。本文综述食品中肉类成分种属鉴别技术的研究进展,并重点分析应用荧光定量PCR对食品中肉类成分进行定量分析的现状与前景。; 何玮玲黄明张驰; 关键词：肉制品掺假

实时荧光PCR法检测食品中鸭肉成分被引量：8: 2013年; 以鸭肉细胞核中基因序列(IL-2)为目标序列,设计特异性引物和TaqMan探针,设计并构建扩增内标,针对内标设计TaqMan探针,通过对聚合酶链式反应(PCR)反应体系和反应条件的优化,建立用于检测食品中鸭肉成分的添加有扩增内标的的荧光PCR方法。通过扩增曲线和Ct值分析该方法的特异性、检测限和灵敏度。结果表明:TaqMan探针实时荧光PCR法具有很高的特异性,所建立的方法能够检测出0.5ng的鸭组分DNA,灵敏度可达0.1%。应用该方法对市售38份样本进行抽样检测,结果令人满意。; 程欣何玮玲黄明; 关键词：扩增内标鸭肉

含有扩增内标的食品中猪肉和鸡肉成分Taqman探针实时荧光PCR检测方法的建立被引量：5: 2013年; 【目的】建立含有扩增内标(IAC,Internal amplification control)的用于食品中猪肉和鸡肉成分鉴别的Taqman探针实时荧光PCR检测方法。【方法】分别基于猪的beta actin基因和鸡的transforming growth factor基因设计引物和探针;考察引物和探针的特异性与灵敏度;设计并构建扩增内标,优化体系中扩增内标浓度,建立内标实时荧光PCR体系;使用该检测体系对鲜肉和熟肉来源的DNA模板进行检测评价;应用该体系对市售38份样本进行盲样检测。【结果】含有扩增内标的Taqman探针实时荧光PCR体系能有效地进行食品中猪肉和鸡肉成分的快速检测,非目标物种在40个循环内均无出现扩增,检出限均为0.5 ng DNA;该体系对鲜肉和熟肉来源的DNA模板检测无显著差异;对市售食品样本的鉴别验证了方法的实用价值。【结论】该方法准确稳定,可用于食品中猪肉和鸡肉成分的快速检测。; 何玮玲胡序建程欣黄明周光宏; 关键词：扩增内标实时荧光PCR

一种添加扩增内标的食品中猪肉或鸡肉成分Taqman探针荧光定量PCR快速检测方法: 本发明公开了一种添加扩增内标的食品中猪肉或鸡肉成分Taqman探针荧光定量PCR快速检测方法。具体方法为：分别基于动物细胞核基因设计引物和探针；人工合成一段竞争型扩增内标及相应的探针，建立内标荧光定量PCR体系，应用AB...; 黄明何玮玲杨静徐幸莲周光宏; 文献传递

一种添加扩增内标的食品中猪肉或鸡肉成分Taqman探针荧光定量PCR快速检测方法: 本发明公开了一种添加扩增内标的食品中猪肉或鸡肉成分Taqman探针荧光定量PCR快速检测方法。具体方法为：分别基于动物细胞核基因设计引物和探针；人工合成一段竞争型扩增内标及相应的探针，建立内标荧光定量PCR体系，应用AB...; 黄明何玮玲杨静徐幸莲周光宏

食源性金黄色葡萄球菌肠毒素基因的分布与时序性表达被引量：11: 2012年; 【目的】研究食源性金黄色葡萄球菌各血清型肠毒素基因的分布,并进一步分析其时序性表达规律。【方法】针对51株各类食品中分离的金黄色葡萄球菌菌株,应用PCR技术对11种葡萄球菌肠毒素进行基因分型;提取细菌总RNA,以ftsZ和ropB作为内标基因,使用反转录荧光定量PCR研究各肠毒素基因在细菌生长周期中的表达水平变化。【结果】除see、ses和set外,其余8种肠毒素基因在51株食源性金黄色葡萄球菌菌株中均有检出,且sei和seg的检出率最高(27.45%)。各肠毒素基因在mRNA水平的时序性表达规律基本一致,均在对数后期达到峰值,随后快速下降。以内标基因为参照,同一菌株中不同肠毒素基因的相对表达量以及不同菌株中同一肠毒素基因的相对表达量均差异较大。【结论】本文系统研究了肠毒素基因在食源性金黄色葡萄球菌中的分布,并探究了肠毒素基因的时序性表达规律,对金黄色葡萄球菌毒力机制研究与食品质量安全控制具有参考意义。; 杨静杨军黄继超何玮玲张驰黄明; 关键词：肠毒素基因分型时序性表达

食品中4种肉类成分多重PCR的快速鉴别方法被引量：60: 2012年; 【目的】建立快速可靠的用于食品中4种肉类(猪肉、牛肉、羊肉和鸡肉)成分快速鉴别的通用引物多重PCR(universal primers-multiplex PCR,UP-M-PCR)方法。【方法】使用DNeasy试剂盒提取法、SDS-蛋白酶K法和CTAB-蛋白酶K法分别提取肉类中总DNA,通过比较提取效率和纯度,确定提取肉类中总DNA的方法;基于动物线粒体细胞色素b基因的差异性位点,设计两组各5条长度不同的多重PCR引物,建立并优化多重PCR反应体系,通过电泳检测扩增产物分子量差异实现4种肉类的快速鉴别;应用优化的多重PCR方法对80份市售食品样本进行盲样检测,验证鉴别方法的准确性。【结果】SDS-蛋白酶K法与DNeasy试剂盒提取法的DNA效率显著优于CTAB-蛋白酶K法;在优化的反应条件下,选择特异性高、序列较长的多重PCR引物可有效地进行食品中猪、牛、羊和鸡源性成分的快速鉴定,检测灵敏度达到皮克级DNA;对市售食品样本的鉴别验证了方法的实用价值。【结论】多重PCR方法精确稳定,可用于食品中多种动物源性成分的快速鉴别。; 何玮玲张驰杨静黄明杨军; 关键词：多重PCR 猪肉牛肉羊肉鸡肉

反对论文抄袭打击学术腐败: 2009年; 近日，公众最为关注的事件之一，29岁清华硕士当选中国最年轻的市长。孰不知，竟有网友报料，这位周森锋市长在攻读硕士研究生期间，居然也出现了论文抄袭现象，引得网民一片哗然。; 何玮玲; 关键词：论文抄袭学术腐败硕士研究生抄袭现象市长

应用多重PCR及实时荧光PCR方法鉴别食品中肉类成分: 肉与肉制品掺假是食品质量控制面临的重要挑战。食品中肉类成分的鉴别与分析技术已逐步形成了以核酸检测为基础的方法体系，其鉴别精度可达属与亚属水平。本研究主要利用多重PCR技术鉴别市场上常见的猪肉、牛肉、鸡肉、羊肉，另外，本研...; 何玮玲; 关键词：食品安全多重PCR方法

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何玮玲