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俞宏杰
作品数:
2
被引量:2
H指数:1
供职机构:
上海生物制品研究所
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相关领域:
医药卫生
生物学
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合作作者
陈哲文
上海生物制品研究所
黄海武
上海生物制品研究所
瞿爱东
上海生物制品研究所
金于兰
上海生物制品研究所
王灿珍
上海生物制品研究所
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黄海武
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陈哲文
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1篇
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水痘-带状疱疹病毒糖蛋白E在CHO细胞中的稳定表达
被引量:2
2008年
目的在CHO细胞中稳定表达水痘-带状疱疹病毒(VZV)糖蛋白E(gE)。方法PCR扩增VZVgE完整胞外结构域编码基因,克隆至哺乳动物细胞表达质粒PSGHVO中,与DHFR选择性基因和脂质体共转染CHO/dhfr-细胞,筛选稳定分泌人生长激素(hGH)和gE融合蛋白的细胞株。采用ELISA和Western blot方法检测细胞培养上清中hGH和gE融合蛋白的表达,并用Ni2+-NTA柱进行纯化。结果gE基因PCR扩增产物和重组表达质粒PSGHVO-gE的双酶切产物经琼脂糖凝胶电泳,均可见1500bp的目的基因条带。转染PSGHVO-gE质粒和DHFR基因的细胞培养上清液经ELISA和Western blot,确认有重组蛋白表达,gE表达量约为20mg/L;纯化后蛋白纯度约为90%。结论已在CHO细胞中稳定表达了VZVgE蛋白,为制备VZV表面抗原奠定了基础。
陈哲文
金于兰
黄海武
俞宏杰
王灿珍
瞿爱东
关键词:
水痘-带状疱疹病毒
糖蛋白E
CHO细胞
水痘-带状疱疹病毒糖蛋白E在CHO细胞中表达的初步结果
目的:在CHO细胞中表达水痘-带状疱疹病毒(VZV)糖蛋白E(gE)。 方法:将VZV的gE编码基因克隆到哺乳动物细胞表达质粒PSGHV0中,使之在CHO细胞中进行人生长激素(hGH)和gE融合蛋白的表达。 ...
陈哲文
金于兰
黄海武
俞宏杰
瞿爱东
关键词:
水痘-带状疱疹病毒
糖蛋白E
细胞表达
表面抗原
生物制品
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