倪勤
- 作品数：3 被引量：6H指数：2
- 供职机构：新疆医科大学第一附属医院更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 抗HEVORF2单链可变区抗体的筛选和鉴定
- 2000年
- 目的 :筛选和鉴定抗戊型肝炎病毒 (HEV)开放读码框架 2 (ORF2 )的人源化噬菌体单链可变区抗体。方法 :以大肠杆菌表达的重组 HEV ORF2多肽做为固相包被抗原 ,从半合成的人源化噬菌体抗体库中经过 4轮“吸附 -洗脱 -扩增”的筛选过程及酶联免疫吸附试验 (EL ISA )、DNA序列分析鉴定 ,获得抗原结合活性较强的抗 -HEV ORF2单链可变区抗体 ,并以间接酶标法用该抗体对戊型肝炎患者石蜡包埋肝组织中的 HEV ORF2抗原进行免疫组织化学鉴定。结果 :筛选到的抗 - HEV ORF2的单链可变区抗体基因。酶切和序列分析表明 ,该抗体基因由 795 bp组成 :EL ISA和免疫组织化学结果显示 ,抗 - HEV ORF2人源化噬菌体单链可变区抗体能与重组 HEVORF2抗原特异性结合 ,并能够特异性识别戊型肝炎患者肝组织中的 HEV抗原。结论 :此法筛选的噬菌体单链可变区抗体亲和性较好 ,特异性强 ,较单克隆抗体制备方法简便 ,周期短 ,为进一步研究应用奠定了基础。
- 倪勤成军钟彦伟王松山施双双董菁夏小兵张耀新翟琦
- 关键词：戊型肝炎病毒单链可变区抗体噬菌体
- 戊型肝炎患者肝组织中HEV抗原的检测研究被引量：2
- 2000年
- 目的 :用抗 - HEV ORF2单克隆抗体和抗 - HEV ORF2单链可变区抗体研究急性戊型肝炎的免疫病理学 ,探讨二者在临床病理诊断中的应用价值。 方法 :(1)以杂交瘤技术制备的抗 - HEV单克隆抗体 (Mc Ab,m ono-clonal antibody)作为第一抗体 ,用免疫组化 L SAB法检测急性戊型肝炎患者肝组织中的 HEV抗原。 (2 )用抗 - HEVORF2单链可变区抗体以间接酶标法检测肝组织内的 HEV抗原。 结果 :用抗 - HEV单克隆抗体从 14例急性戊型肝炎肝标本中检出 9例 HEV抗原阳性者 (6 4.2 8% ) ,其中 8例阳性标本用抗 - HEV ORF2单链可变区抗体检测HEVAg均为阳性。HEV抗原在肝细胞浆表达以胞浆弥漫型为主 ,尚可见膜型表达。HEV抗原阳性细胞集中分布在病变明显区 ,伴淋巴细胞浸润 ,病变较轻区也可见随机散在分布 ,部分阳性肝细胞无变性。胆管上皮细胞中见有HEV抗原阳性颗粒。 结论 :本研究结果支持急性戊型肝炎的免疫致病机理。 HEV抗原在胆管上皮细胞的检出可能为 HEV从胆管上皮细胞向胆小管排泌提供了一个直观的证据。同时表明两种抗体可作为一种特异而有效的HEV抗原检测试剂。
- 倪勤翟琦王莉王松山张耀新卢晓梅张巍
- 关键词：戊型肝炎抗原单链可变区抗体
- 小柴胡片抗乙型肝炎病毒的初步实验研究被引量：4
- 2001年
- 倪勤翟琦余敏席红丽张国庆刘丹张耀新张清民
- 关键词：乙型肝炎中医药治疗小柴胡片HBV
