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冯哲玲: 作品数：12 被引量：30H指数：3; 供职机构：中山大学中山医学院更多>>; 发文基金：教育部留学回国人员科研启动基金国家自然科学基金广东省重点攻关基金更多>>; 相关领域：医药卫生生物学更多>>

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DAPK蛋白C-末端多肽对TNF-α抑制人胚肺成纤维细胞生长的影响被引量：1: 2006年; 目的研究死亡相关蛋白激酶(DAPK)C-末端多肽对TNF-α抑制人胚肺成纤维细胞生长的影响,为在应用α肿瘤坏死因子(TNF-α)治疗疾病时,将DAPK蛋白C-末端多肽(DCTP)用于保护正常组织细胞提供实验证据。方法构建真核表达载体pcDNA3.1(+)-DCTP,并采用脂质体法将其转入体外培养的人胚肺成纤维细胞,RT-PCR、W estern b lotting检测DAPK蛋白C-末端多肽表达,MTT法检测人胚肺成纤维细胞生长。结果真核表达载体pcDNA3.1(+)-DCTP在人胚肺成纤维细胞中获有效表达。pcDNA3.1(+)-DCTP对细胞增殖无影响,但DAPK蛋白C-末端多肽可抑制TNF-α的细胞毒性。结论DAPK蛋白C-末端多肽抑制TNF-α对人胚肺成纤维细胞生长的抑制,为在应用TNF-α治疗疾病时,将DAPK蛋白C-末端多肽用于保护正常组织细胞的临床研究提供了前提基础。; 张海涛冯哲玲朱振宇马涧泉梁念慈; 关键词：死亡相关蛋白激酶肿瘤坏死因子细胞凋亡

应用蛋白质L检测和纯化培养上清液中的单链抗体被引量：2: 2004年; 目的　探索一种检测和纯化单链抗体的新方法。方法　使用不同的酶标记物 ,观察ELISA法检测培养上清液中单链抗体的相对灵敏度。含单链抗体的培养上清液经超滤、313g L饱和硫酸铵沉淀及蛋白质L 琼脂糖亲和层析纯化单链抗体。结果　HRP标记蛋白质L可检测到 1∶16孔的阳性结果 ,而HRP标记蛋白质A仅检测到 1∶2孔的阳性结果。用 9E10单抗检测培养上清液中的单链抗体时 ,除加入未经稀释培养上清液孔略有显色外 ,其他加入稀释后的培养上清液孔均不显色。蛋白质L亲和层析纯化的单链抗体经SDS PAGE及ELISA鉴定 ,所得到的单链抗体纯度高、活性保持良好。结论　蛋白质L是一种能灵敏检测和有效纯化单链抗体的结合物 ,本实验建立的方法是一种有效。; 李民友虞东方张海涛冯哲玲李秀英刘祖国朱振宇; 关键词：单链抗体培养上清液纯化

人穿孔素基因真核表达载体的构建与表达分析: 2005年; 李秀英赖延东夏良平冯哲玲朱振宇; 关键词：基因真核表达载体穿孔素肿瘤特异性 MHC抗原 CTL细胞杀伤细胞

丁酸钠诱导Raji细胞表达DAPK的研究被引量：8: 2005年; 目的探讨丁酸钠(SB)对人淋巴瘤Raji细胞生长和DAPK表达变化的影响。方法用丁酸钠作用于Raji细胞株,观察形态、增殖情况、细胞周期分布变化、死亡相关蛋白激酶(DAPK)基因启动子甲基化的变化及该酶表达的变化。结果成团悬浮生长的Raji细胞呈现贴壁生长,细胞增殖速度明显被抑制,细胞阻滞在G0/G1期;DAPK启动子去甲基化,DAPK表达量增加,细胞凋亡增加。结论丁酸钠具有诱导Raji细胞DAPK基因启动子去甲基化,使DAPK重新表达,诱导细胞凋亡的作用。; 张海涛冯哲玲梁念慈朱振宇马涧泉; 关键词：RAJI细胞死亡相关蛋白激酶凋亡丁酸钠

淋巴母细胞端粒酶活性和成瘤性的关系被引量：2: 2010年; 目的 EB病毒相关的淋巴母细胞(lymphoblastoid cell lines,LCLs)有较高的端粒酶活性。本实验旨在分析淋巴母细胞成瘤性与端粒酶活性的关系。方法采用端粒重复扩增法(telomericrepeat amplification protocol,TRAP)分别测定淋巴细胞源性肿瘤细胞以及EB病毒相关淋巴母细胞的端粒酶活性,并对淋巴母细胞的成瘤性进行体内体外试验。结果 5株EB病毒相关的LCLs端粒酶活性与细胞传代次数有关,它们都能在免疫缺陷小鼠体内致瘤。结论容易形成集落的细胞系更容易在小鼠体内致瘤,也具有更高的端粒酶活性。; 张彦冯哲玲熊建军王嘉励朱振宇; 关键词：EB病毒端粒酶

EB病毒相关淋巴瘤动物模型的建立以及肿瘤治疗的初步探讨被引量：4: 2008年; 目的 EB病毒(Epstein-Barr virus)与人类多系统多种肿瘤相关,尤其是移植后肿瘤以及艾滋病病人肿瘤密切相关.本实验旨在研究EB病毒相关淋巴母细胞的体内的致瘤性及病毒特异的细胞毒T细胞(CTL)对肿瘤的抑制作用. 方法利用EB病毒液体外感染人外周血淋巴细胞建立的淋巴系母细胞(lymphoblastoid cell lines,LCLs)接种到NOD-SCID(none obesity disease Severe Combined Immune-Deftciency)小鼠腹腔及右侧大腿皮下,观察淋巴母细胞在小鼠体内的成瘤性.并用病毒特异性CTL与LCLs同时对小鼠进行注射. 结果建立了EB病毒相关人源性淋巴瘤NOD-SCID小鼠模型.得到了病毒特异性CTL对病毒相关淋巴瘤的抑制作用相关资料. 结论 EB病毒相关淋巴母细胞对NOD-SCID具有致瘤性.病毒特异性CTL对病毒相关淋巴瘤具有明显抑制作用.; 张彦冯哲玲熊建军王嘉励杨光乔雯雯朱振宇; 关键词：EB病毒联合免疫缺陷

DAPK1基因转染对高转移性肺癌细胞PGCl_3的影响被引量：7: 2004年; 背景与目的:死亡相关蛋白激酶DAPK1失活是影响非小细胞肺癌患者生存的独立因子,过表达的DAPK1可以诱导肿瘤细胞凋亡,抑制肿瘤转移,但抑制转移的机制尚未完全清楚。本文探讨DAPK1基因抑制高转移性肺癌PGCl3细胞生长及转移的可能机制。方法:利用基因重组技术构建含DAPK1基因开放读码框(ORF)的真核表达载体pcDNA3.1-DAPK1,用脂质体LipofectAMINE2000介导转染PGCl3细胞系,检测转染后PGCl3细胞的生长曲线、体外软琼脂克隆形成率、体外侵袭、运动和粘附能力的变化,同时检测了胶原酶活性,p53,bcl-2基因表达的变化。结果:转染DAPK1基因的细胞生长比空白组及pcDNA3.1转染组减缓;体外软琼脂克隆形成率下降P<0.05;pcDNA3.1-DAPK1转染组体外侵袭能力是空白组的68.5%,而pcDNA3.1转染组是空白组的88.0%;pcDNA3.1-DAPK1转染组运动能力是空白组的87.3%,pcDNA3.1转染组是空白组的95.7%;pcDNA3.1-DAPK1转染组粘附能力是空白组的62.7%,pcDNA3.1转染组是空白组的91.2%;各组的胶原酶变化不明显;pcDNA3.1-DAPK1转染组p53基因表达升高,bcl-2基因下调。结论:DAPK1基因的过表达可以在一定程度上逆转PGCl3细胞的恶性表型,使PGCl3细胞生长受抑制,体外侵袭、运动和粘附能力下降,p53基因表达的上调及bcl-2基因表达下调。; 张海涛朱振宇冯哲玲李秀英李民友马涧泉梁念慈; 关键词：PGCL3 影响因素

EB病毒相关淋巴母细胞样细胞系的成瘤性与端粒酶活性的研究: 目的:该研究用EBV感染正常人外周血B细胞,建立LCLs,并将LCLs移植到严重联合免疫缺陷小鼠(NOD-SCID小鼠)体内.观察LCLs在NOD-SCID小鼠体内的成瘤性,试图建立EBV相关的AIDS患者引发的淋巴瘤和...; 冯哲玲; 关键词：EB病毒淋巴母细胞端粒酶活性 DNA病毒; 文献传递

TNF-α诱导小鼠B16黑色素瘤细胞凋亡及其对小鼠B16细胞移植瘤生长的抑制作用被引量：2: 2004年; 目的:探讨TNF-α对小鼠B16黑色素瘤(MM)细胞凋亡的诱导及其对小鼠B16移植瘤生长的抑制作用。方法:用不同浓度的TNF-α直接作用于培养的小鼠B16黑色素瘤细胞,36h后,采用流式细胞仪(FCM)及原位末端标记法(TUNEL法)检测B16细胞的凋亡率。动物实验观察TNF-α小量瘤体内注射对小鼠B16移植瘤生长的抑制作用。结果:在1000、3000、5000及10000U/mLTNF-α作用下,B16细胞的凋亡指数均明显高于空白对照组(P<0.01),随着TNF-α浓度增加,B16凋亡细胞数呈增加趋势。动物实验结果显示,TNF-α治疗3周后,治疗组荷瘤小鼠MM移植瘤的体积和重量明显低于对照组(P<0.01)。结论:TNF-α能够诱导小鼠B16黑色素瘤细胞发生凋亡,且小剂量TNF-α瘤体内注射能显著抑制小鼠移植性MM的生长。; 吉琼梅朱振宇王晓华李秀英李民友冯哲玲马涧泉; 关键词：TNF-Α 黑色素瘤细胞细胞凋亡恶性黑色素瘤

EB病毒相关淋巴母细胞样细胞系的建立及鉴定被引量：3: 2010年; 目的由于EB病毒与肿瘤的关系极为复杂且存在争议,淋巴母细胞样细胞系LCLs(lymphoblastoid celllines)没有肿瘤形成过程中的复杂因素,从而成为了研究EBV介导的细胞永生化的最佳模型。本实验旨在建立EBV原型株相关的永生化淋巴母细胞系,为后期LCLs的端粒酶活性及其体内外成瘤性的相关研究提供基础。方法利用体外培养B95.8细胞产生EB病毒原型株感染正常人外周血淋巴细胞培养传代得到5株EB病毒相关淋巴母细胞,并用RT-PCR对其进行了基因表达、流式细胞仪进行细胞表面标记以及核型的鉴定。结果淋巴母细胞样细胞系能不断传代,能表达EBV基因,具有成熟B细胞表面标记;细胞传代过程早期未发生核型改变。结论建立了5株永生化细胞株,分别为LCL1-5、LCL2-5、LCL3-5、LCL4-30、LCL5-30。; 张彦冯哲玲熊建军王嘉励杨光朱振宇; 关键词：EB病毒永生化淋巴细胞

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