刘凤龙
- 作品数：8 被引量：38H指数：4
- 供职机构：中国科学院植物研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 人肿瘤坏死因子穿梭表达载体的构建被引量：9
- 1998年
- 应用ＤＮＡ重组技术，将人肿瘤坏死因子（ｒｈＴＮＦ）ｃＤＮＡ插到质粒ＰＲＬ４３９的ＰｐｓｂＡ启动子下游，得到中间载体ＰＲＬ＿ＴＮＦ；再把ＰＲＬ＿ＴＮＦ上含ＰｐｓｂＡ和（ｒｈＴＮＦ）ｃＤＮＡ的片段连到穿梭载体ＰＤＣ＿８上，构建成穿梭表达载体ＰＤＣ＿ＴＮＦ．转化大肠杆菌ＴＧ１后，进行发酵培养．ＳＤＳ＿ＰＡＧＥ分析和免疫印迹检测结果显示ｒｈＴＮＦ获稳定表达，分子量为１７ｋｕ．本研究结果为ｒｈＴＮＦ在蓝藻中的表达提供了技术基础．
- 王捷江悦华郭勇施定基张宏斌施定基
- 关键词：人肿瘤坏死因子穿梭载体抗肿瘤药
- 人肿瘤坏死因子α口服剂
- 本发明提供了一种人肿瘤坏死因子α口服剂,含有表达人肿瘤坏死因子α(hTNFα)的念珠藻。本发明的口服剂毒性低,并可直接作用于消化道的肿瘤。
- 施定基刘凤龙邵宁彭国宏林晨冉亮
- 文献传递
- 人肿瘤坏死因子α口服剂
- 本发明提供了一种人肿瘤坏死因子α口服剂，含有表达人肿瘤坏死因子α(hTNFα)的念珠藻。本发明的口服剂毒性低，并可直接作用于消化道的肿瘤。
- 施定基刘凤龙邵宁彭国宏林晨冉亮
- 文献传递
- 丝状体蓝藻高效表达盒和含有该表达盒的载体
- 本发明提供了一种用于在丝状体蓝藻中高效表达外源基因的表达盒,包括启动子,SD序列和目的基因,其中所述的SD序列为5’－GGAGAG－3’。本发明还提供了含有所述的表达盒的丝状体蓝藻表达载体。
- 施定基冉亮李艳钟晖刘凤龙彭国宏
- 文献传递
- 转基因蓝藻制备α型重组人肿瘤坏死因子衍生物被引量：10
- 1998年
- 应用ＤＮＡ重组技术将ａ型重组人肿瘤坏死因子衍生物（ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔｈｕｍａｎｔｕｍｏｒｎｅｃｒｏｓｉｓｆａｃｔｏｒａ，ｒｈＴＮＦａ）ｃＤＮＡ插到穿梭质粒ＰＤＣ－８上，构建成穿梭表达载体ＰＤＣ－ＴＮＦ，转入鱼腥藻ＰＣＣ－７１２２０中进行表达。
- 王捷刘凤龙吴锦银施定基江悦华郭勇
- 关键词：转基因植物蓝藻RHTNFΑ肿瘤坏死因子
- 丝状体蓝藻高效表达盒和含有该表达盒的载体
- 本发明提供了一种用于在丝状体蓝藻中高效表达外源基因的表达盒，包括启动子，SD序列和目的基因，其中所述的SD序列为5’-GGAGAG-3’。本发明还提供了含有所述的表达盒的丝状体蓝藻表达载体。
- 施定基冉亮李艳钟晖刘凤龙彭国宏
- 文献传递
- 人肿瘤坏死因子α基因穿梭表达载体的构建和在鱼腥藻7120中的表达被引量：18
- 1999年
- 报道了人肿瘤坏死因子α(hTNFα)基因穿梭表达载体的构建及其在丝状体蓝藻鱼腥藻 712 0中的表达和鉴定结果 .将质粒pRL rhTNF上hTNFα的cDNA连于pRL 43 9质粒上的PpsbA启动子下游 ,得到中间载体pRL TC .进一步与穿梭质粒pDC 8重组 ,得到可在大肠杆菌和蓝藻中均可表达的穿梭表达载体pDC TNF .pRL rhTNF ,pRL TC和pDC TNF三者在大肠杆菌中的表达量分别为 11.8% ,16 9%和 15 .0 % .通过三亲接合转移将pDC TNF引入鱼腥藻 712 0中并获稳定遗传的转基因株 .从转基因的鱼腥藻 712 0中检测到pDC TNF质粒的存在 ,且在和TNFα的cDNA探针进行的Southern杂交中呈阳性反应 .抽提转基因藻的蛋白样品进行检测 ,在Western印迹中和TNFα单克隆抗体呈阳性反应 .采用TNF对L92 9细胞的细胞毒性方法 ,证明转基因藻粗提液中 ,TNF确有细胞毒活性 .
- 刘凤龙张宏斌施定基商之狄林晨邵宁彭国宏张雪艳张海霞吴锦银王捷徐旭东江悦华钟泽璞赵树进吴旻曾呈奎
- 关键词：肿瘤坏死因子鱼腥藻穿梭表达载体基因表达
