刘坤
- 作品数：15 被引量：76H指数：6
- 供职机构：复旦大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金教育部科学技术研究重点项目教育部“优秀青年教师资助计划”更多>>
- 相关领域：医药卫生电子电信文化科学自动化与计算机技术更多>>
- 阻断神经生长因子信号部分抑制雌二醇对恒河猴视网膜血管内皮细胞的作用被引量：6
- 2004年
- 目的 研究神经生长因子 (NGF)信号系统在雌激素调控视网膜血管内皮细胞中的作用。 方法 选用恒河猴视网膜 脉络膜血管内皮细胞系RF 6A ,RT PCR检测雌激素受体 (estrogenreceptor,ER)、NGF及其受体在视网膜血管内皮细胞中的表达。分别观察雌二醇 (estradiol,E2 )、NGF及VEGF、EGF、BDNF等对血管内皮细胞活力(MTT法 )的作用。用流式细胞术 细胞周期法检测E2 、NCF及E2 与K2 5 2a共同处理组的凋亡率。NGF抗体和选择性TrkA拮抗剂K2 5 2a研究对上述作用的阻断效应。同样的分组进行细胞划痕修复实验。 96孔板AngioMatrix胶上观察E2 及NGF对RF 6A内皮细胞管腔形成能力的影响。 结果 RF 6A在细胞外基质胶上可形成管腔样结构。RT PCR检测到ER α、NGF及NGF受体TrkA的mRNA。 1nmol L～ 1 0 0nmol LE2 可以剂量依赖性的增强细胞活力及单层细胞的划痕修复能力 ,其增强作用可部分被NGF抗体及 1 0 0nmol L的K2 5 2a选择性阻断。凋亡率检测显示各组凋亡率相近。E2 可促进RF 6A形成管腔 ,但不能被NGF抗体、TrkA阻断。 结论 除VEGF外 ,E2 还可通过NGF信号系统对视网膜血管内皮细胞活力、划痕修复起促进作用。但结果提示 ,阻断NGF信号系统不影响E2 促RF 6A形成管腔的作用。
- 胡宝洋刘坤万瑾龚宏华佘振珏肖虹蕾周国民
- 关键词：神经生长因子视网膜血管内皮细胞管腔形成恒河猴
- 大鼠视网膜内髓鞘形成模型的建立与研究被引量：2
- 2006年
- 目的研究体外培养的大鼠纹状体神经干细胞在植入同种视网膜后,向少突胶质细胞分化并产生髓鞘的过程,观察髓鞘形成对视网膜结构的可能影响,建立一种中枢神经髓鞘体内发育的新模型。方法将体外传代培养的胚胎纹状体神经干细胞植入新生大鼠的玻璃体腔内,在移植后不同时期观察视网膜内髓鞘的出现部位以及扩展趋势,利用不同染色方法对标本进行检验分析,利用透射电镜进行超微结构观察。结果移植细胞4周后部分视网膜内开始出现成束髓鞘,只分布于神经纤维层。髓鞘束出现的比例、分布面积和形态变化与移植后动物的存活时间相关。电镜观察可见节细胞轴突外包绕有结构正常的中枢神经样髓鞘。较厚的髓鞘束对视网膜节细胞的分布产生一定影响。结论大鼠纹状体神经干细胞可在同种视网膜内向成熟少突胶质细胞分化,视网膜神经纤维层具有促使髓鞘形成的作用;本实验可能为研究少突胶质细胞分化及髓鞘生成机制提供新的在体模型。
- 郑华万瑾刘坤佘振珏肖虹蕾俞彰周国民
- 关键词：细胞培养视网膜髓鞘电镜
- 糖基化终产物对纯化培养大鼠视网膜神经节细胞凋亡的影响被引量：19
- 2005年
- 凌志红徐格致龚红华刘坤周国民
- 关键词：糖尿病性视网膜病变糖基化终产物微血管病变视网膜神经节细胞凋亡
- 视网膜细胞培养上清液对骨髓基质细胞的诱导分化作用被引量：2
- 2006年
- 目的探讨视网膜细胞培养上清液对骨髓基质细胞(BMSCs)的诱导分化作用。方法原代培养胚龄17d(E17)及生后3d(P3)SD大鼠的视网膜细胞,分别收集培养上清液,过滤后与DMEM按2:3混合,用此混合液诱导BMSCs,倒置相差显微镜下观察细胞形态变化,对诱导后的细胞进行神经丝蛋白(NF)、胶质源性纤维酸性蛋白(GFAP)及视网膜特异性标记物进行免疫化学染色,统计分析阳性细胞数;再用RT-PCR进一步检测诱导结果。结果E17和P3细胞上清液均能诱导BMSCs表达NF[(10.35±2.66)%,(10.64±3.94)%]和GFAP[(27.86±7.97)%,(24.38±5.80)%],但只有P3细胞上清液诱导的BMSCs表达视蛋白(opsin),同时RT-PCR也检测到视细胞发育调节转录因子Crx mRNA的表达。结论视网膜细胞培养上清液可以诱导BMSCs向神经元、胶质细胞与视细胞分化。
- 万瑾胡宝洋刘坤郑华肖虹蕾佘振珏周国民
- 关键词：骨髓基质细胞视网膜诱导分化
- 小鼠视网膜Müller细胞的发育及其在血管发育中的作用
- 本课题通过建立高氧后相对缺氧的视网膜病变动物模型及Müller细胞缺氧模型，从形态学和分子生物学水平研究Müller细胞的发育及其在血管发育的作用，以进一步认识视网膜血管发育机制。
结论：
(1)星形...
- 刘坤
- 关键词：MÜLLER细胞血管发育星形胶质细胞视网膜病变
- 文献传递
- 提前光刺激与形觉剥夺诱导近视模型的形态及超微结构比较被引量：9
- 2005年
- 目的探讨提前光刺激作为诱导动物近视模型方法的可行性及不同实验性近视超微结构的异同。方法12日龄C57BL/6J纯系小鼠右眼眼睑缝合,饲养7d后拆除缝线,4日龄小鼠提前人工开启右眼眼睑饲养10d至自然开睑,分别设立同龄无处理小鼠为对照组,验光确定实验组近视形成后,摘出眼球,进行测量及光、电镜检查。结果与对照眼比较,缝合眼睑组诱导出-7.63D的相对近视,眼轴较左眼延长(0.06±0.03)mm,眼球重量差异无统计学意义。提前光刺激组诱导出-9.83D的相对近视,眼轴较左眼缩短(0.04±0.04)mm,眼重较左眼平均减轻-0.0004g。电镜下见缝合眼杆视细胞外节膜盘紊乱,视网膜色素上皮细胞质内吞噬体减少,提前光刺激眼视杆细胞外节膜盘排列整齐,与对照眼相比未见明显差异。结论提前光刺激可作为一种建立动物近视模型的方便、有效的方法,与对照眼相比提前开睑眼眼轴偏短,眼重偏轻,其诱导近视形成的机制不同于形觉剥夺所诱导的轴性近视。
- 忽俊周晓东龚红华刘坤万谨佘振珏周国民
- 关键词：近视光刺激视觉障碍近交C57BL
- 糖尿病视网膜Mǖller细胞病理改变的体内外研究被引量：16
- 2005年
- 目的研究糖尿病视网膜M櫣ller细胞的病理改变。方法用链脲菌素(STZ)腹腔注射建立大鼠糖尿病模型,3个月后观察视网膜M櫣ller细胞超微结构的变化。行免疫组织化学染色,在激光共聚焦显微镜下观察视网膜M櫣ller细胞GFAP、VEGF表达的改变;纯化培养出生5～7d(SD)乳鼠的M櫣ller细胞,在其中加入糖基化终末产物(AGEs)2500μg/mL,培养24h后,用MTT方法检测细胞活性。结果3个月后电镜观察发现糖尿病鼠视网膜M櫣ller细胞突起有损伤表现,微血管内皮细胞、周细胞未见病理改变;正常鼠视网膜VEGF染色阴性,视网膜内界膜下、神经节细胞层有GFAP染色;糖尿病鼠除视网膜内界膜下、神经节细胞层有GFAP染色外,其余各层也可见丝条状贯穿于内外界膜之间的GFAP染色,在上述部位有VEGF及GFAP的共表达。培养24h后,2500μg/mL质量浓度的AGEs对M櫣ller细胞活性有显著促进作用。结论反应性胶质化增生可能是糖尿病早期M櫣ller细胞的主要病理改变,它所引起的M櫣ller细胞结构和功能改变应在糖尿病视网膜病变(DR)的发生发展中起重要作用。AGEs可能是DR中视网膜M櫣ller细胞反应性胶质化增生的重要致病因素。
- 凌志红徐格致龚红华刘坤周国民
- 关键词：糖尿病MÜLLER细胞胶质纤维酸性蛋白糖基化终末产物
- 透视舆论监督
- 该论文首先以新时代舆论监督的历史发展为线索,简单回顾了二十年来舆论监督的发展历程,并对二十年来舆论监督发展过程中彰显出的特征和存在的问题作了概括和分析.结合舆论监督二十余年的发展轨迹,该文还着重探讨了中国大众传播媒介及从...
- 刘坤
- 关键词：新闻批评舆论监督媒介权力舆论监督环境
- 一种基于服务器日志挖掘的自适应实时推荐网站框架
- 自适应实时推荐网站是数据挖掘在WEB日志数据中的一个应用,其目的方便浏览者对网站的访问.随着网站在规模和复杂度上不断增长,WEB日志的挖掘结果在很多领域中都变得至关重要,如站点设计、商业市场策略和网站个性化等等.而以往的...
- 刘坤
- 关键词：WEB日志挖掘关联规则频繁项集
- 文献传递
- 无线局域网的安全性研究
- 随着无线局域网的迅速发展,无线局域网的应用越来越广泛,各个领域都相继引进了无线局域网技术。无线网络的迅速发展的同时,对网络的安全性也提出了更高的要求.
由于802.11i没有足够重视可用性问题,因而存在DOS缺陷。...
- 刘坤
- 关键词：无线局域网安全性DOS攻击密钥管理
- 文献传递
