刘春华
- 作品数：11 被引量：21H指数：3
- 供职机构：浙江大学医学院附属第二医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金浙江省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 雄激素非依赖性前列腺癌细胞雄激素受体靶基因的筛选与初步鉴定被引量：2
- 2014年
- 采用染色质免疫共沉淀技术在全基因组水平筛选雄激素非依赖性前列腺癌细胞LNCaP-AI的雄激素受体结合位点,行高通量测序及生物信息学分析共得到2 876个peak(pvalue<1×10–5),peak平均长度为673 bp;将peak序列定位到Hg19基因组,共有1 865个靶基因,其中fold enrichment≥10的基因有425个。对peak相关基因进行GO分析发现,与细胞、细胞组分、细胞过程、结合、细胞器相关的基因位列前五位;对peak相关基因进行通路分析发现,与黏着斑、代谢通路、癌症中的转录错误调控、嘌呤代谢等信号通路相关的基因占大多数。筛选出7个候选AR靶基因,采用Real-time qPCR技术分析它们在LNCaP-AI细胞和雄激素依赖性前列腺癌细胞LNCaP中对DTH刺激的反应性,发现DHT刺激可改变7个候选AR靶基因在LNCaP-AI细胞中的表达,为进一步研究雄激素依赖性前列腺癌向非依赖性前列腺癌发展的过程中雄激素受体及其调控的下游靶基因功能起着至关重要的作用。
- 徐思琪廖昭平刘春华程玥季丽丽段秀枝陈玉华陶志华
- 关键词：前列腺癌雄激素非依赖雄激素受体靶基因
- 一例弱D血型表型及基因型鉴定分析被引量：5
- 2018年
- 目的:分析中国汉族人群中发现的一例弱D血型表型及基因型。方法:分别采用盐水法及微柱凝集(玻璃珠/凝胶)卡对该弱D血型进行血清学分析,鉴定该标本12种D抗原表位以确定其表型,对Rh D基因10个外显子及其侧翼序列进行测序并分析其杂合性。结果:该个体盐水法与微柱凝胶卡法检测均为d Ccee,但微柱玻璃珠卡法抗-D检测结果为1+,D抗原表位分析显示缺失部分D表位。测序检测发现,该标本存在等位基因c. 1022T>A,结合其血清学反应格局更符合部分D表型,RHD合子型鉴定为D/d。结论:中国汉族人群中发现的一例弱D血型归为弱部分D型更为恰当。
- 徐慧英王蕊林春燕俞石芳刘春华陶志华廖昭平
- 关键词：RH血型弱D型
- 中国汉族人群中发现一例Rh血型弱D59型被引量：3
- 2018年
- 【摘要】目的鉴定中国汉族人群中发现的1例Rh血型弱D59型。方法采用常规血清学试剂对筛查出的D变异型血型做血清学鉴定，结合12种单克隆抗体对该标本RHD抗原表位进行确认；使用PCR-SSP法对弱D型进行基因分型。对RHD基因的10个外显子及侧翼序列进行测序并分析其杂合性。结果在该标本中发现等位基因C．1148T〉C，其血清学反应格局符合弱D表型。RHD合子型鉴定其为RHD＋／RHD-杂合型。结论该先证者为中国人群中首次发现的弱D59型。
- 廖昭平徐慧英刘春华王蕊项凯华冯洁乐芳嘉吴婷陶志华
- 关键词：RH血型
- 雄激素非依赖性前列腺癌细胞AR结合蛋白的筛选和初步功能研究
- 背景： 雄激素受体(AR)的共调节因子既有共激活因子能增强AR对靶基因的转录调控能力，也有共抑制因子降低AR的转录激活能力。尽管目前已发现很多的AR共调节因子，比如P160家族的，雄激素受体激活因子类(ARAs)和热休...
- 刘春华
- 关键词：前列腺癌雄激素受体核转位
- 雄激素受体负向调节雄激素非依赖性前列腺癌细胞FN1和ZNF438基因表达的研究被引量：3
- 2015年
- 目的 验证FN1和ZNF438是否为雄激素非依赖性前列腺癌细胞雄激素受体靶基因,并探索雄激素受体对FN1和ZNF438基因的表达调节作用.方法 采用染色质免疫共沉淀-实时荧光定量PCR及琼脂糖凝胶电泳技术验证雄激素受体（AR）作用于FN1和ZNF438基因.用双氢睾酮（DHT）刺激LNCaP-AI细胞及慢病毒干扰LNCaP-AI细胞AR的表达,通过逆转录荧光定量PCR（RT-qPCR）和蛋白质免疫印迹（Western blot）分析FN1和ZNF438基因的表达情况.结果 AR-ChIP实验组所富集到的FN1和ZNF438基因分别为7.274±0.290和6.843±0.078,显著高于IgG-ChIP对照组的1.004±0.113和1.000±0.014,差异有统计学意义（t=34.91、128.377,均P＜0.05）.在双氢睾酮（DHT）刺激LNCaP-AI细胞后,FN1和ZNF438基因的mRNA及蛋白表达水平分别为0.434±0.050和0.069±0.042,显著低于对照组的1.000±0.016和1.025±0.277;差异有统计学意义（t=18.532、5.905,均P＜0.05）.而在慢病毒转染干扰LNCaP-AI细胞AR的表达后,FN1和ZNF438基因的mRNA及蛋白表达水平分别为17.579±4.415和1.895±0.424,显著高于对照组的1.028±0.445和1.041 ±0.190;差异有统计学意义（=6.461、3.184,均P＜0.05）.结论 FN1和ZNF438为雄激素非依赖性前列腺癌LNCaP-AI细胞雄激素受体负向调节的靶基因,可为进一步研究雄激素非依赖性前列腺癌细胞的生长发展机制提供新的研究思路.
- 俞攀尹彬彬刘春华程玥刘伟伟段秀枝廖昭平陈玉华王旭楚潘小艳陶志华
- 关键词：前列腺肿瘤受体
- DAT阳性的DEL血型鉴定及其家系分析被引量：2
- 2019年
- 目的:对1例DEL血型合并直接抗人球蛋白试验阳性患者进行血型鉴定并分析其遗传规律。方法:采用常规血清学试剂对先证者及其家系成员RhD血型进行血清学分析,使用PCR-SSP方法对RHD基因10个外显子及侧翼序列进行扩增、测序并分析其杂合性。对先证者家系进行调查并分析DEL血型遗传规律。结果:先证者DAT强阳性,RHD基因9外显子存在1227G>A等位基因(RHD*DEL1),其母亲为RHD*DEL1携带者。RHD合子型鉴定为RHD+/RHD-,提示该个体单倍型为CD1227Ae/Cde。结论:先证者为DEL型(RHD*DEL1)。
- 项凯华徐慧英刘春华王蕊俞石芳俞攀徐璐菲陶志华廖昭平
- 关键词：家系分析
- 雄激素受体负向调节雄激素非依赖性前列腺癌细胞FN1和ZNF438基因表达的研究
- 目的:验证FN1和ZNF438是否为雄激素非依赖性前列腺癌细胞雄激素受体靶基因,并探索雄激素受体对FN1和ZNF438基因的表达调节作用。方法:采用染色质免疫共沉淀-实时荧光定量PCR及琼脂糖凝胶电泳技术验证雄激素受体(...
- 俞攀尹彬彬刘春华程玥刘伟伟段秀枝廖昭平陈玉华王旭楚潘小艳陶志华
- 关键词：前列腺肿瘤靶基因
- 文献传递
- 杭州市健康人群血清中36项理化指标的参考区间调查被引量：3
- 2014年
- 目的：通过测定浙江省杭州市健康成年人群的ALB等36项理化指标,建立该36项指标的生物参考区间。方法：以杭州市8区5县（市）的健康人群为调查对象，征集5组年龄段（19～29岁、30～39岁、40～49岁、50～64岁和大于65岁）的男女志愿者523例（男257例、女266例），对其血清中的ALB等36项理化指标进行了检测分析。结果：杭州市健康体检人群中的ALB、ALT、AST、CK、CL、GGT、HDL、LDL、LIP、NA、TG、UREA、FOL在男女组间和不同年龄组间的差异均有统计意义（P＞0.05），ALP、CR、TBIL、TP、TRF、UA、Fe、AFP、FER、CEA、CA125、PSA只在男女组间的差异有统计意义，ALP、CR、TBIL、UA、Fe、AFP、PSA男性水平高于女性，TP、TRF、CA125女性水平高于男性。Ca、GLU、LDH、Mg、P、TC、PTH在不同年龄组间有统计意义，GLU、LDH、Mg、TC、PTH随着年龄的增加而增加，Ca和P随着年龄的增加而减少。AMY、K、VB12、INS在男女组间和不同年龄组间的差异均不具有统计学意义。结论：杭州市及周边地区的健康人群血清中的Fe、TG、HDL、LDL、CR、UA、UREA、AFP、CEA、CA125、PSA、FER水平在男女分组有显著性差异，建议在临床诊断的健康评估时，应根据性别设立不同的参考区间。UA、UREA、TC、TG、LDL、GGT、ALB水平与相关报道差异较大，因此杭州地区有必要建立自己的正常值参考范围。
- 程玥徐思琪刘春华廖昭平陶志华
- 关键词：血清
- 遗传性异常纤维蛋白原血症一家系的发病机制分析被引量：4
- 2014年
- 目的对1个遗传性异常纤维蛋白原血症家系进行表型和基因型分析及相关功能结构研究，探讨其发病机制。方法采集2012年11月浙江大学医学院附属第二医院诊断的遗传性异常纤维蛋白原血症1家系4代共19人外周静脉血，检测凝血指标，用免疫比浊法检测纤维蛋白原抗原含量。通过血栓弹力图检测血小板功能和纤维蛋白原功能；用PCR方法对纤维蛋白原基因FGA、FGB和FGG所有外显子及其侧翼序列进行基因扩增，通过正反向测序明确突变位点；用还原性十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）免疫印迹法检测纤维蛋白原突变体；采用分子结构模拟图分析预测突变氨基酸对纤维蛋白原的结构和功能的影响。结果先证者（Ⅱ-1）及其母亲（I-2）、妹妹（Ⅱ-2）、弟弟（Ⅱ-3）、女儿（II-1）纤维蛋白原活性明显下降，凝血酶时间（1tr）明显延长，但纤维蛋白原抗原含量、活化部分凝血酶原时间（APYF）和D-二聚体（D—dimer）均在正常范围内。血栓弹力图显示I-2、Ⅱ-2、111．1血小板功能正常，纤维蛋白原功能减低，而先证者及Ⅱ-3纤维蛋白原功能严重降低。基因检测结果显示先证者及Ⅱ-3存在纤维蛋白原FGGC．1001A〉C纯合突变，导致叫链第308位天冬酰胺（Asn）突变为苏氨酸（Thr）（P．Asn308Thr），而I-2、Ⅱ-2及IL-1存在纤维蛋白原FGGC．1001A〉c（P．Asn308Thr）杂合突变，家系其他成员均未检测到此突变位点。还原性SDS—PAGE免疫印迹未检测到纤维蛋白原突变体。分子结构模拟图显示突变位点Asn308位于纤维蛋白原二聚体结合的接触面，此位置氨基酸突变会对纤维蛋白的正常形成及功能产生影响。结论该家系成员异常纤维蛋白原血症系显性遗传，纤维蛋白原FGGC．1001A〉C突变是引起该家系异常纤维蛋白原血症的发病原因。
- 廖昭平徐思琪唐沪强谢怡怡段秀枝刘春华程玥陈玉华王德强罗淼陶志华
- 关键词：突变纯合子杂合子
- 类孟买表型FUT1新等位基因的鉴定及家系研究
- 2022年
- 目的报告1例类孟买血型并探讨其分子机制。方法对1例ABO血型常规检测正反定型不相符的就诊者,采用吸收放散试验检测红细胞弱表达的ABH血型抗原,唾液酸实验检测唾液中血型物质。采用PCR产物直接测序法进行ABO基因第6、7外显子和FUT1和FUT2基因序列分析。结果ABO血型正定型为O型,反定型为AB型,唾液中检测到有H和A、B物质,直接测序发现先证者FUT1基因存在c.35C>T、c.328G>A、c.504delC复合杂合变异,单倍型序列分析表明先证者的FUT1基因型为h328A/h35T+504delC,已上传NCBI,序列号为MW323551。结论本研究发现了1例由FUT1基因复合杂合新变异c.504delC引起的类孟买表型ABmh,该变异可能影响糖基转移酶的活性,导致其酶的功能缺陷。
- 李强项凯华刘春华邓刚倪列芳华妍洁俞石芳
- 关键词：类孟买血型血型血清学基因测序FUT1基因
