吴莹
- 作品数:90 被引量:477H指数:13
- 供职机构:北京中医药大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金中央级公益性科研院所基本科研业务费专项国家杰出青年科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学文化科学农业科学更多>>
- 靶向ERM的慢病毒siRNA载体在原代肺微血管内皮细胞中的表达及对流感病毒复制的影响
- 目的:构建分别靶向Ezrin、Radixin、Moesin的siRNA慢病毒表达载体,转染原代大鼠肺微血管内皮细胞后观察其对ERM基因表达及流感病毒复制的影响。方法:根据siRNA设计原理,化学合成靶向大鼠Ezrin、R...
- 吴莹张淑静张晨月玄子男李姝玉高誉珊胡雨刘敏
- 关键词:小干扰RNA慢病毒载体肺微血管内皮细胞
- 文献传递
- 犀角地黄汤合银翘散对流感病毒性肺炎小鼠炎性因子和自由基表达的影响被引量:11
- 2012年
- 目的观察犀角地黄汤合银翘散对流感病毒感染致病毒性肺炎小鼠炎性因子、自由基表达的影响。方法Balb/c小鼠108只随机分为正常组、模型组、药物组,25μL 50LD50病毒液滴鼻建立流感病毒鼠肺适应株感染的小鼠肺炎模型(除正常组外),感染后1 h,正常组和模型组予以双蒸水灌胃,药物组予中药23 g/(kg.d)灌胃,各组均给药2次/d,连续5 d。感染后2、4、6 d分别取材,采用酶联免疫吸附法检测血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、肺组织匀浆中单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)的含量,生化法检测肺组织中超氧化物歧化酶(SOD)、一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(iNOS)、丙二醛(MDA)含量。结果临床等效剂量的犀角地黄汤合银翘散在感染后第4、6日可明显降低TNF-α的含量(P<0.01,P<0.05);感染后第6日,抑制MCP-1的表达(P<0.01),升高SOD活性(P<0.01);在各时间点均降低MDA含量(P<0.01);感染后第2日,明显降低iNOS的含量(P<0.01),第4、6日,明显降低NO含量(P<0.01)。结论犀角地黄汤合银翘散可明显抑制流感病毒致病毒性肺炎小鼠体内炎性细胞因子及氧自由基的产生,具有抗炎作用。
- 吴莹李季倩孟建路广林郝钰
- 关键词:犀角地黄汤银翘散病毒性肺炎自由基小鼠
- 犀角地黄汤合银翘散含药血清抑制流感病毒感染大鼠肺泡巨噬细胞致炎物质的研究被引量:13
- 2010年
- 目的:研究犀角地黄汤合银翘散含药血清对甲型流感病毒鼠肺适应株(FM1)感染大鼠肺泡巨噬细胞(NR8383)后产生的致炎物质的影响。方法:运用中药血清药理学的方法制备等效剂量(13.8g/kg)的大鼠犀角地黄汤合银翘散含药血清。FM1感染NR8383细胞1h后,加入15%的犀角地黄汤合银翘散含药血清,同时设正常细胞和病毒对照组。药物作用后6、12、24h,ELISA检测细胞上清中炎症细胞因子TNF-α、MCP-1的含量,放免法检测细胞上清中炎性介质PGE2、PLA2、LTB4的含量;药物作用后8、24、36、48h,生化法检测细胞内自由基NO、iNOS含量;药物作用后24h,RealtimePCR检测细胞内TNF-α、MCP-1的mRNA水平。结果:犀角地黄汤合银翘散含药血清抑制了FM1感染NR8383细胞后TNF-α、MCP-1的转录和表达(P<0.05),抑制了NO、iNOS的产生(P<0.05),降低了PGE2、PLA2、LTB4、MDA的含量(P<0.05)。结论:犀角地黄汤合银翘散含药血清明显抑制了流感病毒感染后肺泡巨噬细胞内炎性细胞因子、炎性介质及自由基的产生,具有抗炎作用。
- 吴莹金叶智孟建吴珺于雪飞郝钰
- 关键词:含药血清流感病毒肺泡巨噬细胞
- LCMS-IT-TOF法快速分析薄荷黄酮部位的主要化学成分被引量:22
- 2015年
- 目的快速分析鉴别薄荷黄酮部位的化学成分。方法采用高效液相色谱-离子阱-飞行时间质谱法(LCMS-IT-TOF)对薄荷黄酮部位化学成分进行分析,Sunfire C18色谱柱(4.6 mm×150mm,5μm),甲醇(A)-水(B)为流动相进行梯度洗脱,电喷雾离子源为质谱离子源,同时采用正、负离子检测模式,获得不同化合物的多级质谱数据。结果根据高分辨质谱结果和MS/MS碎片信息,结合对照品质谱信息及相关文献,共鉴定推断出12个黄酮类化合物,其中4个黄酮苷:芹菜素-7-O-芸香糖、香叶木苷、木犀草素-7-O-芸香糖、蒙花苷;6个黄酮苷元:5,6-二羟基-7,8,3',4'-四甲氧基黄酮、栀子黄素B、5,6-二羟基-7,8,4'-三甲氧基黄酮、刺槐素、5-羟基-6,7,8,3',4'-五甲氧基黄酮、香叶木素;1个黄酮醇苷:芦丁;1个二氢黄酮苷:橙皮苷。结论 LCMS-IT-TOF能快速有效地分析薄荷黄酮部位的化学成分,为其进一步研究提供物质基础。
- 陈向阳张乐吴莹王卫华刘斌
- 关键词:薄荷
- 靶向ezrin、radixin、moesin的siRNA慢病毒感染原代肺微血管内皮细胞促进流感病毒的复制被引量:4
- 2015年
- 目的构建分别靶向ezrin(E)、radixin(R)、moesin(M)的siRNA慢病毒表达载体,转染原代大鼠肺微血管内皮细胞,观察其对E、R、M基因表达及流感病毒复制的影响。方法根据siRNA设计原理,化学合成靶向大鼠E、R、M基因的siRNA序列,克隆入慢病毒表达质粒GV248,构建分别靶向E、R、M基因的慢病毒siRNA载体Lenti-E-siRNA、Lenti-R-siRNA、Lenti-M-siRNA,同时构建靶向无关序列的Lenti-control-siRNA;组织块法分离培养大鼠原代肺微血管内皮细胞(PMVEC);Lenti-E-siRNA、Lenti-R-siRNA、Lenti-M-siRNA转染原代大鼠PMVEC后,荧光定量PCR检测E、R、M的mRNA的表达,Western blot法检测ERM蛋白的表达,激光共聚焦显微镜技术检测ERM蛋白的分布;FM1流感病毒鼠肺适应株感染慢病毒转染的PMVEC后,荧光定量PCR检测慢病毒载体对流感病毒复制的影响。结果重组质粒经测序鉴定,Lenti-E-siRNA、Lenti-R-siRNA、Lenti-MsiRNA、Lenti-control-siRNA构建成功。慢病毒载体转染大鼠PMVEC,感染复数(MOI)为10时感染率达80%以上。Lenti-E-siRNA、Lenti-R-siRNA、Lenti-M-siRNA明显抑制PMVEC中E、R、M的转录及表达。流感病毒感染PMVEC中,慢病毒空载体及Lenti-control-siRNA抑制流感病毒的复制,而Lenti-E-siRNA、Lenti-R-siRNA、Lenti-M-siRNA增加PMVEC中流感病毒的mRNA水平。结论成功构建靶向ERM基因的慢病毒载体,证实其可稳定转染PMVEC特异高效地抑制E、R、M基因表达;慢病毒载体本身能抑制PMVEC中流感病毒复制,而靶向E、R、M的慢病毒siRNA却促进流感病毒的复制。
- 吴莹张淑静张晨月玄子男李姝玉高誉珊胡雨
- 关键词:小干扰RNAEZRINRADIXINMOESIN肺微血管内皮细胞
- 黄芪注射液联合葛根素注射液对2型糖尿病KKAy小鼠肾脏TGF-β_1和BMP-7表达的影响被引量:13
- 2012年
- 目的:观察黄芪注射液联用葛根素注射液对2型糖尿病KKAy小鼠肾脏转化生长因子β1(TGF-β1)和骨形态发生蛋白7(BMP-7)表达的影响。方法:雄性KKAy小鼠饲养至14周龄时随机分成模型组和黄芪注射液联合葛根素注射液治疗组,同龄雄性C57BL/6J小鼠作为正常组。观察各组小鼠一般状态并测量体重;检测20周龄、24周龄及28周龄小鼠空腹血糖(BG)、血清甘油三酯(TG)、胆固醇(TC)和血清肌酐(SCr);免疫组化法测定肾脏组织TGF-β1蛋白表达情况,RT-PCR法检测肾脏组织BMP-7和TGF-β1的mRNA表达情况。结果:与正常组相比,模型组小鼠的体重、BG、TG、TC和SCr均有较明显增高;肾组织TGF-β1蛋白和mRNA表达明显升高,BMP-7 mRNA表达下降。与模型组比较,黄芪注射液联合葛根素注射液治疗组小鼠的体重、BG、TG、TC及SCr均有不同程度下降;肾组织BMP-7 mRNA表达升高,而TGF-β1蛋白及mRNA表达明显下调。结论:黄芪注射液联合葛根素注射液对2型糖尿病KKAy小鼠肾脏有保护作用,其机制可能与恢复肾组织BMP-7表达,降低肾组织TGF-β1过度表达有关。
- 李姝玉柴新楼吴莹贾德贤郝钰苏玮莲王谦
- 关键词:黄芪注射液葛根素注射液骨形态发生蛋白-7
- 正常皮肤与瘢痕疙瘩增殖-凋亡差异性的比较被引量:3
- 2008年
- 目的:比较瘢痕疙瘩成纤维细胞与正常皮肤成纤维细胞在增殖-凋亡方面的差异。方法:标本选取手术瘢痕疙瘩与正常皮肤各10例,分别用HE染色,增殖细胞核抗原(PCNA),末端脱氧核苷酸转移酶介导的末端标记技术法(TdT-Mediated dUIP Nickendlabeling,TUNEL)以及检测Caspase-3蛋白表达法来比较瘢痕疙瘩与正常皮肤在增殖一凋亡方面的差异。结论:与正常皮肤相比,瘢痕疙瘩增殖明显增加,凋亡明显减弱,这可能与其形成机制及浸润性生长有关。
- 吴莹尚经轩白定群许川山虞乐华
- 关键词:瘢痕疙瘩增殖细胞核抗原TUNELCASPASE-3
- 黄芩及其成分抗流感病毒感染的实验研究进展被引量:12
- 2014年
- 黄芩性味苦寒,可清热燥湿、泻火解毒,历代医籍中记载了黄芩及其配伍方剂治疗肺疾病的功效,现代临床治疗流感的方剂和制剂中黄芩也是常用的一味中药,。黄芩的主要有效成分为黄芩苷、黄芩素和汉黄芩素等,现代研究表明黄芩及其成分对多种流感病毒感染的肺炎动物模型确有效果,其作用机制包括直接抗病毒作用和调节免疫炎症反应两方面。黄芩及其成分通过阻止病毒吸附、抑制病毒基因复制和蛋白合成、抑制神经氨酸酶活性等起到直接的抗病毒作用;通过调节促炎性细胞因子的合成和释放、抑制炎症介质、抗氧化、清除自由基等作用,抑制免疫炎症反应,减轻病理损伤。在调节免疫炎症反应方面的研究总体还偏少,研究也不够系统、深入。今后应加强在调节免疫炎症机制方面的研究,突出中药的特点,阐明黄芩及其成分的药效机制,最终开发出抗流感病毒制剂。
- 王羽侬金叶智董莹莹吴莹郝钰
- 关键词:黄芩黄芩苷黄芩素汉黄芩素流感病毒
- TBL+LBL双轨教学模式在医学免疫学与微生物学教学中的应用被引量:10
- 2015年
- 在医学免疫学与微生物学教学中试行以LBL教学法为主,TBL教学法为辅的双轨教学模式的改革,使学生做到课前预习、分组答辩、阐述观点,以实现对较分散、抽象的教学内容更好地理解与掌握,培养学生自主学习的能力及团队合作的意识。通过问卷调查的方式对教学效果进行初步分析,结果表明,TBL+LBL教学法在培养学生学习态度,能力及提高专业知识方面优于单一的LBL教学法。本研究为进一步在医学免疫学与微生物学教学中推广TBL+LBL双轨教学模式提供了基础和依据。
- 吴莹王旭丹贾翎郝钰
- 关键词:医学免疫学与微生物学教学模式
- 四神丸和葛根芩连片对结肠炎小鼠炎性细胞因子的影响被引量:2
- 2015年
- 目的探讨四神丸和葛根芩连片对硫酸葡聚糖钠(DSS)诱导的小鼠急性和慢性结肠炎细胞因子的影响。方法小鼠自由饮用4%DSS连续5 d,制备急性结肠炎模型;小鼠4次循环饮用3%DSS制备慢性结肠炎模型。急性或慢性结肠炎实验小鼠均随机分为对照组、DSS急性或慢性模型组(模型组)、四神丸组、葛根芩连片组。急性模型小鼠于DSS饮水次日开始给药,连续8 d;慢性模型于DSS饮水2次循环后开始给药,连续16 d。ELISA检测各组小鼠结肠培养上清液中γ-干扰素(IFN-γ)、IL(白细胞介素)-17A及IL-22的含量。结果急性结肠炎模型小鼠结肠培养上清液中IFN-γ、IL-17A及IL-22含量均明显增加(P<0.01),葛根芩连片能显著降低急性结肠模型小鼠IFN-γ、IL-17A的含量(P<0.05),四神丸则能显著降低IL-17A的含量(P<0.05)。慢性结肠炎模型小鼠结肠培养上清液中IFN-γ、IL-17A较对照组显著升高(P<0.01);葛根芩连片及四神丸有降低二者的趋势。与对照组比较,四神丸可升高IL-22含量(P<0.05)。结论葛根芩连片和四神丸通过降低急性结肠炎模型小鼠IFN-γ、IL-17A含量达到其治疗作用,四神丸通过促进IL-22升高发挥其治疗慢性结肠炎的作用。
- 王旭丹葛东宇邱泽计吴莹李根茂郝钰
- 关键词:四神丸葛根芩连片结肠炎白细胞介素-17A白细胞介素-22小鼠