周爱民
- 作品数：3 被引量：7H指数：1
- 供职机构：教育部更多>>
- 发文基金：引进国际先进农业科技计划更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 过量表达星星草(Puccinellia tenuiflora)液泡型H^+-ATP酶c亚基基因提高转基因酵母的耐盐性被引量：5
- 2015年
- 植物液泡型H+-ATP酶(V-ATPase)在次级转运与应对多种逆境胁迫中具有重要作用。本研究克隆并解析了能够生长在盐碱地上的野生星星草V-ATPase c亚基基因(Put VHA-c)的功能。本研究利用荧光蛋白(GFP)标记结合内涵体染色的方法研究了Put VHA-c蛋白在酵母细胞中的定位,并利用转基因酵母分析了Put VHA-c基因在盐胁迫中的作用。共定位实验显示Put VHA-c-GFP融合蛋白主要定位在酵母细胞的内涵体上。Northern杂交和实时定量PCR显示在星星草悬浮细胞中Put VHA-c基因的表达能够被盐胁迫所诱导。研究结果结合过表达Put VHA-c的转基因酵母具有更高的耐盐性的发现,说明Put VHA-c基因参与着盐胁迫的应答。
- 周爱民卜媛媛张欣欣高野哲夫柳参奎
- 关键词：星星草V-ATPASE耐盐性
- 星星草(Puccinellia tenuifolra)铵转运蛋白(PutAMT)及N、C末端缺失对NH_4^+吸收能力的影响被引量：1
- 2013年
- 铵是植物吸收利用的主要氮源之一,NH4+的吸收主要通过铵转运蛋白(AMT)进行运输。本研究克隆了星星草铵转运蛋白(PutAMT),以GFP为标记构建了植物表达载体,观察表明PutAMT蛋白明显定位于质膜,但是根据观察发现PutAMT蛋白的定位具有复杂性及多样性的特点。为了深入了解铵转运蛋白的结构对NH4+吸收能力的影响,构建了N、C及NC末端缺失的PutAMT(ΔNPutAMT,ΔCPutAMT及ΔNCPutAMT)的载体,转入酵母突变体菌株31019b进行NH4+吸收能力的实验,结果显示了全长PutAMT在低氮条件下具有较强的吸收NH4+的功能。N、C及NC末端缺失的突变体与全长PutAMT相比,对NH4+的吸收能力有下降的趋势。结果表明了,N、C末端对NH4+的吸收起到重要的作用。
- 卜媛媛孙博骆媛媛周爱民柳参奎
- 关键词：NH4+星星草
- 马蔺(Iris lactea)液泡型H^+-ATP酶c亚基蛋白的原核表达与纯化被引量：1
- 2014年
- 液泡型H+-ATP酶(V-ATPase)是植物生长、发育及应对逆境胁迫的关键酶,全酶由13种不同亚基组成,而V-ATPase c亚基(VHA-c)是分子量为16 k D的高度保守的脂质蛋白,对V-ATPase全酶的组装和活性具有重要作用。本研究中,利用RT-PCR方法从马蔺(Iris lactea)中克隆出Irl VHA-c基因全长读码框,将其构建到原核表达载体pGEX上并在大肠杆菌BL21中诱导表达。结果发现在0.1 mmol/L的IPTG终浓度下诱导8hGST-IrlVHA-c融合蛋白高效表达,并利用层析方法纯化获得了GST-IrlVHA-c融合蛋白,进一步为研究IrlVHA-c蛋白的结构与功能提供帮助。
- 周爱民马婧林关佳琦王金刚车代弟柳参奎
- 关键词：C亚基GST融合蛋白
