姚春
- 作品数:9 被引量:28H指数:3
- 供职机构:江汉大学附属第二医院更多>>
- 发文基金:湖北省卫生厅科研基金武汉市卫生局资助项目武汉市科技计划项目更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- siRNA靶向干扰GPC3基因慢病毒载体的构建及其对肝癌Huh-7细胞凋亡的影响被引量:2
- 2014年
- 目的构建GPC3基因短发夹干扰RNA(shRNA)慢病毒载体,观察GPC3基因对人肝癌细胞系Huh-7凋亡的影响,探讨GPC3基因影响肝癌细胞生长的机制,为肝癌的基因治疗提供理论基础。方法采用RNA干扰技术转染肝癌细胞系Huh-7,荧光定量PCR检测GPC3基因在多种肝癌细胞株中的表达情况。构建重组靶向GPC3基因的小干扰RNA序列PGC-shRNA-GPC3,以脂质体(lipofectamineTM2000)为载体转染人肝癌细胞系,筛选并建立稳定表达siRNA的细胞株。采用RT-PCR及Western blot检测GPC3 siRNA转染后mRNA表达情况,验证siRNA的干扰效率。流式细胞仪检测阴性对照组、未转染组和转染组细胞凋亡的情况。结果在肝癌细胞株Huh-7中,GPC3基因显示高表达。测序验证PGC-shRNA-GPC3重组质粒构建成功。将重组质粒稳定转染入肝癌细胞株Huh-7后能明显抑制GPC3 mRNA表达水平;同时,流式细胞仪检测发现,GPC3表达下调后,诱导Huh7细胞的凋亡。结论靶向GPC3的siRNA能有效抑制GPC3的表达,并能促进肝癌Huh7细胞凋亡。
- 雷长江龙浩成李磊姚春曾诚郑刚
- 关键词:慢病毒载体肝癌细胞株
- 5-Aza-CdR诱导抑癌基因PTEN重新表达对乳腺癌细胞的影响及机制
- 2012年
- 目的观察5-氮杂-2'-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)对人乳腺癌细胞系MCF-7增殖、凋亡及体外侵袭能力的影响并初步探讨其机制。方法体外培养MCF-7细胞,采用不同浓度的5-Aza-CdR(1×10-6、2×10-6、5×10-6和1×10-5mol/L)分别作用24h、48h和72h,分别采用MTT法检测细胞增殖抑制率、流式细胞仪检测细胞凋亡、Transwell法检测细胞侵袭能力、Western-blot检测PTEN和VEGF-C蛋白表达的变化。结果经不同浓度的5-Aza-CdR作用后,MCF-7细胞的增殖受到不同程度的抑制并发生凋亡,细胞侵袭能力也发生不同程度的降低,且其作用随浓度增加和时间延长而增强(P<0.05)。在5-Aza-CdR作用后,MCF-7细胞PTEN的表达逐渐增强,而VEGF-C的表达逐渐减弱。结论 5-Aza-CdR可抑制乳腺癌细胞增殖、诱导其发生凋亡、降低其体外侵袭能力,其可能是通过去甲基化作用使抑癌基因PTEN重新表达并下调VEGF-C的表达而发挥作用的。
- 姚春任德发郜朝霞邵力伟刘锦修伍龙
- 关键词:乳腺肿瘤PTEN凋亡
- 雷帕霉素对胃癌细胞增殖与凋亡的影响及机制被引量:3
- 2011年
- 目的观察雷帕霉素对人胃癌细胞株SGC-901和MKN45的增殖、凋亡以及侵袭能力的影响并探讨其机制。方法采用不同浓度的霄帕霉素(5、10、20、40nmol/L),噻唑蓝(MTT)和流式细胞术分别检测SGC-7901和MKN45细胞的增殖和凋亡、Transwell检测胃癌细胞的侵袭能力、逆转录.聚合酶链反应(RT-PCR)和Westernblot检测Survivin和roTOR的mRNA和蛋白的表达。结果不同浓度的雷帕霉素可以抑制胃癌细胞株SGC-7901和MKN45的增殖并诱导其发生凋亡,同时可降低其体外侵袭能力,其作用具有剂量依赖性。RT—PCR和Westernblot检测显示胃癌细胞中rnTOR和Survivin的mRNA和蛋白表达存雷帕霉素作用后受到抑制。结论雷帕霉素可以体外抑制胃癌细胞的增殖和侵袭并且诱导其发生凋亡,其可能是通过抑制roTOR和Survivin的表达来发挥作用的。
- 姚春邵力伟刘锦修伍龙
- 关键词:雷帕霉素MTOR胃癌SURVIVIN
- 早期肠内营养对胆囊功能影响的观察被引量:1
- 2011年
- 近年来人们发现,长时间禁食及全肠外营养的患者在实施肠内营养(enteral nutrition,EN)的初期,常常出现肠内营养再灌食综合征(enteral feeding restarting syndrome),即患者出现不同程度的全身炎症反应综合症(systemic inflammatory response syndrome,SIRS)以及淤胆先重后轻和腹泻等并发症“J。其中由于胆汁淤滞所引起的临床症状往往导致肠内营养无法坚持,重者甚至需要行胆囊切除术,严重影响了患者的治疗效果BJ。全院近年来采用在肠内营养初期给予静脉输注氨基酸以减轻肠内营养再灌食综合征的胆汁淤滞情况取得了显著的效果,现报道如下。
- 邵力伟刘锦修姚春任德发郜朝霞
- 关键词:早期肠内营养胆囊功能INFLAMMATORY全身炎症反应综合症胆汁淤滞全肠外营养
- 音猬因子在乳腺癌中的表达及其临床意义被引量:2
- 2014年
- 目的观察音猬因子(Shh)在乳腺癌组织中的表达及其临床意义。方法收集2008年1月至2012年12月在武汉市第五医院手术治疗的乳腺癌患者的乳腺癌组织和癌旁正常乳腺组织各46例。采用实时荧光定量PCR法和免疫组织化学染色检测乳腺癌组织及癌旁正常乳腺组织中Shh mRNA和Shh蛋白的表达,并探讨Shh蛋白与乳腺癌临床病理特征的关系。计数资料比较采用χ2检验,计量资料比较采用独立样本t检验或单因素方差分析。结果乳腺癌组织中Shh mRNA表达水平明显高于癌旁正常乳腺组织(1.54±0.47比0.60±0.38,t=-12.02,P=0.000),Shh蛋白阳性表达率也明显高于癌旁正常乳腺组织[69.6%(32/46)比17.4%(8/46),χ2=25.48,P=0.000],并且其表达水平与乳腺癌的临床分期密切相关,患者临床分期越晚,Shh蛋白表达水平越高[Ⅲ期+Ⅳ期∶Ⅰ期+Ⅱ期:77.8%(28/36)比4/10,χ2=5.28,P=0.022]。结论 Shh信号在乳腺癌组织中被激活。Shh异常表达可能与乳腺癌的发生、发展相关,其可以作为一个潜在的肿瘤标志物应用于临床。
- 姚春邵力伟郑刚刘锦修郜朝霞任德发伍龙
- 关键词:乳腺肿瘤
- 环巴胺抑制Shh信号对乳腺癌细胞增殖和凋亡的影响被引量:4
- 2015年
- 目的探讨环巴胺靶向抑制Shh信号对乳腺癌细胞增殖、凋亡以及Survivin表达的影响。方法采用荧光定量PCR法检测乳腺癌组织及癌旁正常组织中Shh、PTCH1及GLi1的表达,MTT法检测不同浓度环巴胺对人乳腺癌细胞MCF-7增殖抑制的影响,流式细胞术检测环巴胺对MCF-7细胞凋亡的影响,Western blot检测环巴胺处理前后MCF-7细胞GLi1和Survivin的表达。结果 Shh、PTCH1及GLi1在乳腺癌组织中均呈高表达;不同浓度环巴胺均可抑制MCF-7细胞增殖并诱导其凋亡;环巴胺处理后GLi1和Survivin的表达均降低。结论 Shh信号在乳腺癌组织中呈激活状态,靶向抑制Shh信号可抑制乳腺癌细胞增殖并诱导其凋亡,其可能通过抑制Survivin表达发挥作用。
- 邵力伟姚春伍龙任德发
- 关键词:乳腺癌环巴胺细胞增殖细胞凋亡SURVIVIN蛋白
- 乳腺癌的表观遗传学研究进展被引量:1
- 2012年
- 乳腺癌的发生、发展是由多因素、多步骤协同作用的复杂过程,如物理因素、化学因素、基因突变、染色体异常等。目前研究发现,表观遗传学修饰对于乳腺癌的发生、发展也具有重要的意义。
- 姚春任德发刘锦修
- 关键词:表观遗传学乳腺癌染色体异常化学因素基因突变
- DIC患者尿纤维蛋白肽A检测及其临床意义被引量:3
- 1999年
- 弥散性血管内凝血(DIC)是多种疾病在病程发展过程中所发生的一种严重的临床综合征。早期诊断与DIC的治疗效果及预后密切相关。目前临床上常用的实验诊断指标主要是针对DIC中、晚期检测的结果,不利于其早期诊断。近几年来的研究表明纤维蛋白肽A(FPA)是凝...
- 姚春魏文宁刘朝宋善俊
- 关键词:血管内凝血DIC
- 脐血CIK细胞对耐药白血病细胞体外杀伤效应及其机制的研究被引量:12
- 2008年
- 目的:探索干预或克服白血病细胞耐药的新策略。方法:采用抗CD3McAb联合多种细胞因子诱导的脐血杀伤细胞(CB-CIK)体外作用于K562耐药细胞株(K562/A02),用MTT比色法检测其杀伤效应;用免疫组化染色法检测杀伤前后K562/A02细胞表面多药耐药基因mdr1表达产物P170水平;采用DNA凝胶电泳进行CB-CIK细胞诱导白血病细胞凋亡的检测。结果:CB-CIK细胞杀伤K562/A02细胞活性(73.647±5.72)与杀伤K562细胞活性(75.124±4.36)相比差异无统计学意义,P>0.05;其杀瘤活性显著高于CB-LAK细胞、CB-CD3AK细胞,P<0.05,与成人CB-CIK细胞相比差异无统计学意义,P>0.05。②经CIK细胞杀伤后,K562/A02细胞表面mdr1表达产物P170含量明显减少。③K562/A02细胞在CIK细胞作用20h后,其DNA结构断裂,在DNA凝胶电泳上呈现凋亡特有的梯形图谱(DNA Ladder)。结论:CB-CIK细胞对K562细胞及其耐药株K562/A02细胞均有较强的杀伤作用,其杀伤机制可能与CIK细胞能下调白血病细胞表面多药耐药基因mdr1表达产物P170水平,以及诱导白血病细胞凋亡有关。提示脐血CIK细胞在抗白血病多药耐药性方面具有独特的优势,若与化疗联合使用,有可能成为克服白血病细胞多药耐药性的一种可供选择的新策略,因脐血的来源较广,采制相对简便,该研究方法可能具有广泛的应用前景。
- 姚春宋善俊
- 关键词:白血病脐血CIK细胞多药耐药性