寸怡娜 作品数:25 被引量:24 H指数:3 供职机构: 中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所 更多>> 发文基金: 国际科技合作与交流专项项目 云南省应用基础研究基金 云南省应用基础研究计划面上项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 理学 生物学 农业科学 更多>>
IPV皮内免疫有效性评价用动物模型的建立方法 本发明提供一种IPV皮内免疫有效性评价用动物模型的建立方法,选择猪龄为3-5个月、体重为10-20kg的属于华南型猪种的云南版纳小耳猪,随机分组,分别进行第一次无针皮内注射IPV疫苗免疫,免疫后30天采血,分离血清,再分... 廖国阳 孙明波 马磊 寸怡娜 蔡玮 周健 杨卉娟 刘婧 张新文 戴忠祥 代小虎 胡文柱 姜述德文献传递 核磁共振波谱法测定b型流感嗜血杆菌荚膜多糖中的核糖含量 被引量:3 2014年 目的 建立核磁共振波谱(nuclear magnetic resonance,NMR)法测定b型流感嗜血杆菌(Haemophilus influenzae type b,Hib)荚膜多糖中核糖含量的方法。方法 利用NMR技术中的氢核磁共振波谱(1H-NMR)的定量功能,对不同浓度的D-核糖进行定量分析,验证该方法的精密度及准确度,并与传统化学方法进行比较。结果NMR法定量结果相对标准偏差(RSD)均小于1.0%,相对误差除最低浓度20 mmol/L为7.4%外,其余浓度均在1%-3%之间,不同浓度的样品回收率在97.2%-107%之间;化学法定量结果RSD在0.6%-7.9%之间,相对误差在3%-6.5%之间,不同浓度样品回收率在93.5%-105.3%之间;两种方法检测的3批Hib荚膜多糖中核糖含量无明显差别,均在《中国药典》三部(2010版)规定的320~410 mg/g之间。结论1H-NMR定量方法取样少,可直接定量,该方法精密度高、准确度高、重现性好,且不破坏多糖结构,可应用于细菌荚膜多糖质量控制的核糖定量。 普元倩 朱文勇 寸怡娜 代小虎 张新文 钟汉斌 宋绍辉 吴亚楠 赵娜娜 王明清 廖国阳 李卫东利用生物反应器无血清大规模培养轮状病毒的方法 本发明涉及病毒灭活疫苗制备技术领域,具体涉及一种利用生物反应器无血清大规模培养轮状病毒的方法。该利用生物反应器无血清大规模培养轮状病毒的方法包括以下步骤:生物反应器无血清培养Vero细胞、病毒接种和培养。通过每天补加胰酶... 周健 陈洪波 赵红玲 陈瑜 刘雅灵 衡燮 寸怡娜 刘伯川 范琪琪 鲍晓林 雍国胜 张泽珩 施锦丽Vero细胞培养流感病毒的低血清培养基的筛选 被引量:7 2014年 目的筛选Vero细胞生长的最适低血清培养基,用于流感病毒的细胞培养。方法分别以MEM、M199、DMEM/F12、DMEM/F12与MEM混合物(1∶1)为基础培养基,添加5%、2%、1%的小牛血清传代培养Vero细胞,通过细胞形态观察、细胞计数及MTT法检测细胞的增殖活力筛选最适基础培养基;将流感病毒接种低血清适应的Vero细胞,检测病毒收获液的血凝效价及残留BSA含量,电子显微镜观察病毒形态。结果以DMEM/F12与MEM混合物(1∶1)为基础培养基,添加2%小牛血清培养的Vero细胞长势良好,细胞数量较多,增殖活力最强。低血清适应的Vero细胞培养的流感病毒血凝效价最高可达1∶512,平均值为1∶384;病毒液中的残留BSA含量约为正常血清培养条件下的1/18;病毒形态完整。结论成功筛选出Vero细胞培养流感病毒的低血清培养基,为更具生物安全性的流感疫苗的研发奠定了基础。 耿兴良 戴宗祥 段盼盼 郭琦 宋绍辉 寸怡娜 姜述德 廖国阳关键词:VERO细胞 流感病毒 血清 培养基 生物安全性 遗传重配制备B型流感病毒Vero细胞适应毒株 2019年 目的本研究旨在研究B型流感病毒Vero细胞适应株作为母本,遗传重配制备B型流感病毒Vero细胞适应株。方法选择WHO推荐2017—2018年疫苗株B/massa chusetts/2/2012(简称BX-51B)与实验室原有母本株B/Malaysia/2506/2004Va(简称Bv)共同感染鸡胚和Vero细胞,用抗Bv血清筛选重配病毒,空斑纯化筛选出含有流行株表面抗原的Vero细胞适应株。结果获得重配株命名为BX-51BVa,能在Vero细胞连续传代,通过血凝抑制试验和单向免疫琼脂扩散试验证明BX-51BVa与疫苗株BX-51B是同一型别,基因序列测定证明其HA和NA氨基酸序列与疫苗株BX-51B相同。结论本研究通过筛选出1株B型流感病毒Vero细胞适应株BX-51BVa证明Bv可以作为母本毒株,制备Vero细胞B型流感病毒疫苗毒种。 寸怡娜 宋绍辉 苏敏 刘泽 吴雅楠 高菁霞 马磊 廖国阳 李卫东关键词:VERO细胞 B型流感病毒 b型流感嗜血杆菌D蛋白原核可溶性表达研究 被引量:1 2013年 目的通过原核表达系统可溶性表达重组D蛋白,为多糖结合疫苗的制备提供蛋白载体。方法将HibCMCC株基因组DNA中去除信号肽的hpd基因片段插入pET43.1a表达质粒,转化人感受态大肠埃希菌BL21(DE3),IPTG诱导表达。表达的重组蛋白,经过硫酸铵沉淀和DEAE阴离子交换柱层析纯化后,用WesternBlot的方法鉴定其免疫反应原性。结果表达的重组蛋白以可溶性形式存在,表达量约占菌株总蛋白的44%,经过初步纯化后的重组蛋白可以和Hib抗血清发生特异性反应。结论成功构建了D蛋白重组表达质粒,并在原核细胞中以可溶性形式表达出具有良好免疫反应原性的D蛋白。 尹梦梦 苏秋东 郭敏卓 寸怡娜 普元倩 贾志远 杨景然 汤洋 廖国阳 伊瑶 毕胜利 李卫东关键词:蛋白质 一种b型流感嗜血杆菌荚膜多糖的制备工艺 本发明涉及一种b型流感嗜血杆菌荚膜多糖的制备工艺,属于革兰氏阴性细菌荚膜多糖技术领域。本发明方法将发酵液仅需通过离心、浓缩、除杂、超滤4步,并且无需柱层析即可得到b型流感嗜血杆菌荚膜多糖的精糖溶液。该制备工艺避免了苯酚、... 廖国阳 朱文勇 欧阳圣洁 宋绍辉 代小虎 李卫东 马磊 高菁霞 寸怡娜 钟汉斌 胡文著 陈枫 李双丽 非成瑞 李宗霖 张冰洁 贺凌煜文献传递 乙型流感病毒Vero细胞高产适应株传代稳定性研究 被引量:5 2019年 由于能快速、大规模生产以应对随时可能暴发的流感,细胞流感疫苗已成为当今流感疫苗的主要研发方向,而选育流感病毒Vero细胞高产适应株对于细胞流感疫苗的研发至关重要。本文旨在研究流感病毒Vero细胞高产适应株BX-51BVa(By)在Vero细胞上的传代稳定性,以证明该毒株是否可以作为制备Vero细胞流感疫苗的种子批。以Vero细胞高产株BX-51BVa(By)在Vero细胞上连续传代50次,测定其血凝效价和感染性滴度,并通过型别鉴定及基因序列测定考察传代过程中生物学性状的稳定性。结果显示BX-51BVa在Vero细胞连续传代50次,血凝效价维持在256~512,感染性滴度稳定在1×107TCID50/mL左右,型别未发生改变,HA和NA氨基酸序列与流行株BX-51B相比没有发生变化。本研究发现B型流感病毒重配株能够稳定地在Vero细胞连续传代,可以作为制备Vero细胞流感疫苗的种子批。 寸怡娜 宋绍辉 周健 刘泽 郭琦 高菁霞 马磊 李卫东 廖国阳关键词:VERO细胞 B型流感病毒 种子批 一种乙型流感病毒Vero细胞冷适应株及其应用 本发明提供一种乙型流感病毒Vero细胞冷适应株及其应用,其命名为B/Yunnan/2/2005Vca(By),微生物保藏号为:CGMCCNO.7009。该毒株能在Vero细胞上连续传代培养,血凝滴度保持在1:512-1:... 廖国阳 李卫东 马磊 杨帆 杨景晖 周健 宋绍辉 蔡玮 寸怡娜 高菁霞 张新文 戴宗祥 姜述德文献传递 b型流感嗜血杆菌荚膜多糖提取新工艺中Triton X-114残留含量的质量标准研究 2020年 目的验证苯酚法检测b型流感嗜血杆菌荚膜多糖提取新工艺中Triton X-114残留含量的可行性,并建立Triton X-114在Hib荚膜多糖中残留含量的质量标准。方法参考2015版《中国药典》三部中检测Triton X-100及相关文献中的苯酚法,对其线性范围、准确性、精密性进行验证,对多批次荚膜多糖的残留含量及对应的安全性结果进行统计归纳。结果苯酚法可以应用于b型流感嗜血杆菌荚膜多糖中Triton X-114的残留量检测,其线性范围、准确性及精密性较好,经15批次荚膜多糖中数据统计,b型流感嗜血杆菌荚膜多糖中Triton X-114的残留含量标准建议定为<25.00mg/g荚膜多糖。结论苯酚法可以有效检测Triton X-114在b型流感嗜血杆菌荚膜多糖中的残留含量,本研究所制定质量标准可以保证产品的安全性。 朱文勇 欧阳圣洁 代小虎 宋绍辉 寸怡娜 陈枫 廖国阳关键词:B型流感嗜血杆菌 荚膜多糖