张忠辉
- 作品数:8 被引量:41H指数:3
- 供职机构:上海交通大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金上海市科学技术委员会资助项目上海市科学技术委员会科研基金更多>>
- 相关领域:医药卫生农业科学生物学更多>>
- 一种制作大鼠膝关节和椎间盘石蜡组织切片的方法被引量:8
- 2009年
- 改良一种制作大鼠完整膝关节和椎间盘的石蜡切片的方法,为观察骨关节透明软骨和椎间盘纤维软骨的结构提供实验基础。取正常大鼠完整膝关节和胸椎(T3-T4),10%中性福尔马林溶液固定24h,流水冲洗后分别采用3%硝酸脱钙液、混合脱钙液及EDTA脱钙液3种不同的脱钙液配合不同脱钙条件进行脱钙,制作石蜡切片,苏木精-伊红和番红O/固绿染色方法染色,显微镜下观察并评价其效果。结果表明,采用混合脱钙液4℃搅拌脱钙条件下制作的切片颜色鲜艳,细胞和细胞核清晰,组织破坏程度小,且耗时短,全部过程仅需一周即可完成。采用混合脱钙液方法制作的大鼠膝关节和椎间盘石蜡组织切片,骨和软骨组织结构完整,细胞形态清晰,能够满足组织学评价骨关节和椎间盘的要求。
- 李会贤朱顺英戚亦萍张忠辉韩伟
- 关键词:膝关节椎间盘石蜡切片
- 中期因子蛋白的用途及含该蛋白的医用装置
- 一种生物技术领域的中期因子蛋白的用途及含该蛋白的医用装置,本发明公开了一种如下(a)或(b)的蛋白在制备促软骨组织生长药物或治疗软骨组织疾病药物中的用途,该蛋白作为促软骨细胞生长因子的用途以及包含该蛋白的医用装置:(a)...
- 韩伟张忠辉
- 文献传递
- 体内表达谷胱甘肽过氧化物酶-7基因对骨髓抑制的防护作用研究被引量:1
- 2008年
- 目的探讨体内表达谷胱甘肽过氧化物酶-7基因(Gpx-7)对5-氟尿嘧啶(5-Fu)引发小鼠骨髓抑制的防护作用。方法以尾静脉注射5-Fu(250mg/kg)的方法建立小鼠骨髓抑制和再生模型。5-Fu注射后第1天,通过电穿孔转染法将pcDNA3.1-Gpx7重组质粒50μg注入小鼠胫前肌(实验组),以pcDNA3.1空质粒载体50μg电穿孔转染作为对照组,每组各30只小鼠。5-Fu注射前和注射后3、7、11、14d,2组各断颈处死6只小鼠,计数小鼠外周血白细胞数、血小板数和单条腿骨髓细胞总数;然后分别取5-Fu注射后7、14d断颈处死小鼠各3只进行骨髓细胞集落形成试验;并分别取5-Fu注射前和注射后3、7、11、14d断颈处死的小鼠各1只制备完整大腿骨石蜡组织切片,观察骨髓组织形态学的变化。结果注射5-Fu后11和14d,实验组外周血白细胞数分别为(3917±733)和(6857±1878)/μl,均明显高于同时点对照组[分别为(2683±920)和(4017±1011)/μl,均P<0.05)];注射5-Fu后11d,实验组外周血小板数为(150.8±64.3)万/μl,明显高于同时点对照组[(63.0±60.3)万/μl,P<0.05)];注射5-Fu后不同时间2组间单条腿骨髓细胞总数差异无统计学意义。注射5-Fu后7、14d,2组之间骨髓细胞集落形成数差异无统计学意义。实验组注射5-Fu后11d小鼠的骨髓组织形态恢复程度与对照组注射5-Fu后14d小鼠类似;注射5-Fu后14d小鼠的骨髓组织形态接近注射前。结论体内表达Gpx-7基因可以促进被化疗药物5-Fu抑制的小鼠骨髓再生。
- 毛文伟王晓何慧娟沈娟俞眉杜丽娟张忠辉朱顺英吴明媛路慧丽王群韩伟
- 关键词:基因表达骨髓谷胱甘肽过氧化酶
- 中期因子蛋白的用途及含该蛋白的医用装置
- 一种生物技术领域的中期因子蛋白的用途及含该蛋白的医用装置,本发明公开了一种如下(a)或(b)的蛋白在制备促软骨组织生长药物或治疗软骨组织疾病药物中的用途,该蛋白作为促软骨细胞生长因子的用途以及包含该蛋白的医用装置:(a)...
- 韩伟张忠辉
- 文献传递
- 兔膝关节炎骨关节组织切片的制备方法被引量:8
- 2009年
- 制备高质量骨关节组织的石蜡切片,是组织病理学评价相关动物骨关节炎的重要技术支撑。通过在兔一侧膝关节的股骨内侧髁关节面制造直径3mm深度4mm的全层关节软骨缺损,获得兔骨关节炎动物模型。术后4周,分离股骨髁,经过10%中性甲醛固定和混合酸脱钙后制备组织石蜡切片,并行苏木精-伊红(HE)和番红-固绿染色。结果显示:造模侧损伤填充区细胞表现为软骨样细胞特征。该法制备的骨关节组织切片,标本平坦完整,软骨和骨组织结构分明。是一种快速有效的骨关节组织石蜡切片的制备方法,为骨关节炎相关动物的组织病理学评价奠定基础。
- 戚亦萍吴明媛王明海李会贤张忠辉韩伟
- 关键词:骨关节炎骨组织石蜡切片
- 大鼠骨关节炎三种动物模型的建立及比较被引量:20
- 2010年
- 为探讨三种骨关节炎动物模型的建立方法、效果及其适用条件,采用Hulth手术、碘乙酸关节腔注射、前交叉韧带切除处理,对SD大鼠造骨关节炎模型,并在适当时间,取两侧膝关节进行切片,比较各组骨关节大体形态及病理变化。实验结果表明,Hulth模型组及碘乙酸模型组6周即可造模成功,损伤程度较严重,类似骨关节炎中晚期;前交叉韧带切除模型组造模需8周以上,病情类似骨关节炎早期或中期,更适合用作发病机制、药物治疗方面的研究。
- 王婧张忠辉孙娇梦许传营俞雁韩伟
- 关键词:骨性关节炎动物模型
- 重组人中期因子midkine对大鼠膝关节软骨部分损伤的修复作用被引量:2
- 2010年
- 目的:通过外源注射不同剂量的重组人中期因子midkine(rhMK),研究其对大鼠膝关节软骨部分损伤的修复作用。方法:雄性SD大鼠双侧膝关节建立软骨部分损伤的动物模型,术后24小时分别向关节腔内注射生理盐水或rhMK(20μg/kg、60μg/kg、180μg/kg)。于术后8周将大鼠全部处死,取材进行组织学观察,从而确定最佳注射剂量;在药代动力学研究中,按最佳注射剂量向正常大鼠膝关节腔内注射rhMK,分别于注射后1小时、1天、3天、6天、9天、12天和15天处死大鼠,检测膝关节软骨组织中rhMK的含量。结果:不同剂量的重组蛋白对膝关节软骨部分损伤均有不同程度的修复作用,其中180μg/kg的剂量效果最佳;以180μg/kg的剂量向正常大鼠膝关节腔内注射rhMK后,经过Kinetica5.0药代动力学软件拟合后,计算得rhMK在软骨组织中的消除相半衰期为8.69天。结论:rhMK对大鼠膝关节软骨部分损伤有明显的修复作用,最佳注射剂量为180μg/kg,最佳注射时间间隔为8天。
- 孙娇梦许传营张忠辉王婧俞雁韩伟
- 关键词:药代动力学
- 小鼠骨髓抑制和再生过程中Sod/Gpx/Cat抗氧化酶基因的动态表达研究被引量:2
- 2008年
- 目的研究Sod/Gpx/Cat抗氧化酶系列基因在小鼠骨髓抑制和再生过程中的动态表达,了解氧化应激在骨髓再生过程中的作用。方法制备经5-氟尿嘧啶(5-Fu)注射后的骨髓抑制和再生C57BL/6小鼠模型,分别在5-Fu注射前(第0天)和注射后第3、7、11、14天各断颈处死6只小鼠(分别记为0d组、3d组、7d组、11d组、14d组),收集小鼠骨髓单核细胞。Trizol试剂抽提小鼠骨髓单核细胞总RNA,采用Affymetrix小鼠全基因组cDNA 430A芯片检测小鼠骨髓细胞Sod/Gpx/Cat系列基因的表达,并对检测结果进行半定量RT-PCR鉴定。结果Sod1/Sod2/Gpx1/Gpx3b/Gpx4b/Cat在各组小鼠骨髓细胞中均有较高的表达,Sod3/Gpx2则在7d组开始表达,11d组和14d组表达量持续减少。其中Sod2/Gpx3b/Gpx4b/Cat从0d组到14d组均为表达量先增加后减少;Sod1/Gpx1则为表达量先减少后增加;在各组小鼠骨髓细胞中未检测到Gpx3a/Gpx4a/Gpx5/Gpx6的表达。结论Sod/Gpx/Cat抗氧化酶系列基因在小鼠骨髓抑制和再生过程中呈现特征性的动态变化,这种变化提示了骨髓细胞氧化应激反应过程的组织特异性和调控特定的细胞信号通路的过程。
- 毛文伟路慧丽刘芳张晶王方圆杜丽娟张忠辉向砥赵梅吴明媛王群韩伟
- 关键词:过氧化氢酶骨髓谷胱甘肽过氧化物酶