张莲芬
- 作品数：45 被引量：299H指数：11
- 供职机构：江南大学生物工程学院工业生物技术教育部重点实验室更多>>
- 发文基金：江苏省自然科学基金国家自然科学基金国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学轻工技术与工程化学工程更多>>
- 合欢皂甙Julibroside J_8对人微血管内皮细胞凋亡的影响研究被引量：2
- 2011年
- 本文采用体外培养人微血管内皮细胞(HMEC-1),不同浓度和时间的Julibroside J8干预,SRB法测定细胞存活率,同时结合DAPI荧光染色,TUNEL染色法检测细胞凋亡情况;Annexin-V/PI双标记行流式细胞仪测定定量观察细胞凋亡率。发现合欢皂甙Julibroside J8可显著抑制HMEC-1生长,抑制率可达75.6%,并呈时间-剂量效应关系。同时诱导细胞发生凋亡率,最高比例可达32.32%。
- 花慧冯磊张小平张莲芬金坚
- 关键词：凋亡
- 赭曲霉毒素A的高灵敏时间分辨荧光免疫分析被引量：36
- 2005年
- 采用时间分辨荧光免疫分析(TRFIA)技术建立快速的高灵敏度的赭曲霉毒素A(OTA)全自动检测方法.将OTA-BSA作为免疫分子免疫Balb/c小鼠,OTA-KLH为筛选用抗原包被板,用间接酶联免疫分析(ELISA)法筛选出专一针对OTA的高效价的阳性克隆3G9,用杂交瘤细胞制备抗OTA单克隆抗体.用OTA-BSA包被96孔板为固相抗原,与游离OTA共同竞争有限的抗OTA单克隆抗体,以稀土离子Eu3+标记的羊抗鼠抗体进行示踪,采用间接竞争免疫分析方法在解离增强荧光免疫分析体系中建立OTA-TRFIA.该方法的灵敏度为0.03μg/L,测量范围为0.03￣1000μg/L,批内和批间变异分别为3.7%和5.3%,平均回收率为94.2%,与赭曲霉毒素B的平均交叉反应为3.7%,与黄曲霉毒素B1、牛血清白蛋白和苯基丙氨酸无交叉反应,说明抗体的特异性很好.8条不同时间进行的间接竞争OTA-TRFIA的效应点均值ED80、ED50、ED20分别为(0.33±0.02)μg/L、(1.44±0.08)μg/L和(5.22±0.12)μg/L,说明方法的稳定性好,样品经TRFIA和ELISA试剂盒同时检测OTA,两者的相关系数为0.925,结果相符.研究表明,OTA-TRFIA是目前报道的OTA检测中最灵敏的方法,该分析方法稳定性好,可测范围宽,具有很好的应用前景.
- 黄飚陶文沂张莲芬时瑾杨海麟金坚
- 关键词：真菌毒素单克隆抗体
- 水蛭素促尿激酶纤溶作用研究被引量：8
- 2006年
- 目的研究水蛭素对尿激酶诱导的纤溶作用的影响,并分析可能的机制。方法采用尿激酶为纤溶激酶,复钙柠檬酸钠抗凝血浆为纤溶酶原来源的体外溶栓模型,通过测定纤溶产物D-D imm er生成量,微孔板分光光度法跟踪纤溶过程,比较水蛭素与肝素对纤溶的影响。运用土豆羧肽酶抑制剂(CPI)对TAFIa的专一性抑制作用,分析水蛭素与肝素对TAFI活化的影响。结果水蛭素组D-D imm er较肝素组高(P<0.01),水蛭素加CPI组较水蛭素组更高(P<0.01);微孔板分光光度法跟踪纤溶过程,肝素组有明显的纤溶停止和血栓再形成倾向,水蛭素组则可观察到明显的溶栓现象,水蛭素加CPI组效果最好。结论对尿激酶诱导的纤溶,水蛭素比肝素有更好的间接促纤溶作用,其原因主要是水蛭素能有效抑制再次血凝的发生,减少了尿激酶和纤溶酶原的短暂性耗竭。在这一过程中,水蛭素不能彻底抑制TAFI活化,表明对TAFI活化的抑制可能不是水蛭素促尿激酶纤溶作用的主要原因。
- 唐瑜菁张莲芬段作营张荣军孙钧铭金坚
- 关键词：水蛭素尿激酶纤溶
- 合欢皮提取物抑制血管生成作用的研究被引量：13
- 2010年
- 本文采用体外细胞培养法和体内鸡胚尿囊绒膜模型、荷瘤模型检测合欢皮提取物抑制人微血管内皮细胞(HMEC-1)的增殖、迁移活性,观察合欢皮提取物的抑制血管生成情况。发现合欢皮提取物能显著抑制HMEC-1的增殖(IC50为30μg/mL)和迁移,并且呈明显的剂量依赖性。在体内同时具有抑制鸡胚尿囊膜和肿瘤组织中血管生成的作用。
- 花慧冯磊张小平张莲芬金坚
- 关键词：合欢皮血管生成内皮细胞
- 苦参灵芝发酵液在2.2.15细胞中抗HBV作用被引量：17
- 2004年
- 比较苦参的灵芝发酵液和苦参与灵芝发酵液的混合液体外抗乙肝病毒(HBV)的效果.用HBVDNA转染的2.2.15细胞作为模型,放射免疫法测定2种药物作用后细胞培养上清液中HB sAg和HBeAg量,计算其对HBsAg和HBeAg分泌的抑制率,用MTT法检测细胞毒性.结果表明:剂量在12.5～200μg/mL的范围内,均能不同程度地减少细胞培养上清液中的HBsAg和HBeAg量,发酵液细胞的毒作用不明显,而混合液具有一定的细胞毒作用.结果显示发酵液具有一定的体外抗HBV作用.
- 李雁群张莲芬张志斌金坚章克昌
- 关键词：苦参灵芝抗乙肝病毒药效
- 血管抑素作用特异性及其结合蛋白的初步研究
- 采用99Tcm-rhAS,在S180肿瘤和Matrigel模型上分别进行了显像及放射自显影的研究,以求明确AS的作用特异性。结果发现S180肿瘤及Matrigel模型对99Tcm-rhAS特异性摄取,表明AS可与新生血管...
- 陶永辉张莲芬金坚
- 关键词：血管抑素MATRIGEL结合蛋白
- 文献传递
- 人β干扰素-血清白蛋白融合蛋白在毕赤酵母中的分必表达
- 利用重叠PCR技术在体外拼接IFN β和HSA基因,将得到的融合基因插入到毕赤酵母分泌型表达载体pPIC9K中,置于启动子AOX1和α交配因子信号肽的作用下,分泌表达融合蛋白IFNβ-HSA.重组质粒pPIC9K-IFN...
- 雷楗勇张莲芬杨健良金坚
- 关键词：Β干扰素毕赤酵母融合蛋白分泌表达
- 文献传递
- ^(99)Tc^m-angiostatin的体内分布及其与新生血管作用的实验研究被引量：1
- 2006年
- 本文研究血管抑素(Angiostatin,AS)对血管内皮细胞作用的特异性。采用SnCl2还原法制备99Tcm-rhAS,通过鼠尾静脉注射99Tcm-rhAS,观察其体内分布并在小鼠S180肿瘤和Matrigel模型上进行显像及放射自显影,研究AS对新生血管的作用特异性。结果显示,99Tcm-rhAS在体内通过肝、肾进行代谢;S180肿瘤和Matrigel均可特异性摄取99Tcm-rhAS。S180肿瘤及Matrigel模型对99Tcm-rhAS特异性摄取表明AS可与新生血管特异性结合,其抑制肿瘤的作用是基于靶向血管内皮细胞的。
- 陶永辉张莲芬尤徐阳万卫星金坚
- 关键词：血管抑素显像S180肿瘤^99TC^M
- 白藜芦醇抗肿瘤分子机制的探讨
- 目的观察白藜芦醇对耐阿霉素人乳腺癌细胞系MCF-7/ADM增殖和细胞周期的影响及探讨其靶点蛋白。方法采用MTT法、光学显微镜观察白藜芦醇对MCF-7/ADM细胞增殖的影响,流式细胞仪检测观察白藜芦醇对细胞周期的影响,噬菌...
- 冯磊金坚陶文沂张莲芬
- 关键词：白藜芦醇结合蛋白噬菌体展示技术
- 文献传递
- 黄曲霉毒素B_1的高灵敏时间分辨荧光免疫分析被引量：28
- 2006年
- 采用时间分辨荧光技术建立了高灵敏的黄曲霉毒素B1(AFB1)间接竞争免疫分析法(AFB1-TRFIA)。以AFB1-BSA为免疫原免疫新西兰大白兔制备抗AFB1抗体;AFB1与辣根过氧化酶的联结物(AFB1-HRP)包被96孔板为固相抗原,与游离AFB1共同竞争有限的抗AFB1抗体;用稀土离子Eu3+标记的羊抗兔抗体进行示踪。该方法的灵敏度为0.01μg/L,测量范围为0.01—100μg/L,批内和批间变异分别为4.1%和6.8%,平均回收率为97.2%,与黄曲霉毒素B2的平均交叉反应为10%左右;黄曲霉毒素G2、赭曲霉毒素A、赭曲霉毒素B及HRP基本不干扰本方法对AFB1的检测。8条不同时间进行的AFB1-TRFIA的效应点值ED80、ED50、ED20分别为(0.07±0.01)μg/L、(0.63±0.02)μg/L和(12.5±0.47)μg/L。比较AFB1-TRFIA和AFB1-ELISA检测AFB1,两者的相关系数为0.917。研究表明,AFB1-TRFIA是目前报导的AFB1检测中最灵敏的方法,该分析方法稳定性好,可测范围宽,具有很好的应用前景。
- 黄飚陶文沂张莲芬时瑾赵晓联金坚
- 关键词：真菌毒素
