徐煌
- 作品数：29 被引量：28H指数：2
- 供职机构：嘉兴学院医学院更多>>
- 发文基金：嘉兴市科技计划项目国家高技术研究发展计划浙江省教育厅科研计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学理学更多>>
- 人脂肪间充质干细胞的分离、培养及鉴定被引量：1
- 2012年
- 取脂肪吸脂术分离的脂肪细胞,在胰酶和胶原酶的作用下分离、培养ADSC并对其进行增殖能力、干细胞表面标志的测定以及转录因子水平的检测.分离、培养的ADSC在光镜下呈圆形、贴壁生长,可见小的胞浆突起.经细胞增殖曲线绘制,细胞在1～3d处于生长适应期,而3～6d处于对数生长期,8～10d后细胞增殖明显减缓.流式细胞术鉴定细胞表面标志结果显示分离培养的细胞表达间充质干细胞表面标志,而不表达造血干细胞和成纤维细胞表面标志.对培养的ADSC检测其转录因子Nanog和oct-4的表达,结果显示体外培养的ADSC在第15代仍可稳定表达Nanog和oct-4.
- 韩冬徐煌张新红肖燕萍
- 关键词：脂肪间充质干细胞
- HER2/neu ECD毕赤酵母工程菌大规模发酵工艺研究被引量：1
- 2008年
- 采用补料分批培养方法,在80 L发酵罐中对HER2/neu ECD工程菌进行高密度发酵,发酵温度28℃,pH值为4.4,溶氧范围25%以上。在湿重值达到180 g/L时开始诱导,甲醇诱导体积分数为0.5%,发酵时间96 h。发酵液离心后,上清经阳离子交换层析,对其表达产物进行纯化。结果表明:在优化发酵条件下,发酵上清通过阳离子交换层析纯化,可获得纯度较高的重组HER2/neu ECD,产量为600 mg/L。
- 韩冬徐煌牟旭鹏孔宁颜炜群关铭
- 关键词：毕赤酵母发酵
- 重组人HER2／neu ICD在毕赤酵母中的表达及鉴定
- 2008年
- 目的用毕赤酵母表达体系制备具有与天然HER2/neu ICD相同结构和活性的重组HER2/neu ICD。方法PCR法自质粒pCMV中克隆HER2/neu ICD基因,构建真核表达载体pPICZα/HER2/neu ICD,电转化至毕赤酵母菌株X-33。对基因转染Zeocin抗性阳性的克隆,采用PCR法筛选出稳定表达HER2/neu ICD的菌株。最后用SDS-PAGE鉴定甲醇诱导的培养上清液中的HER2/neu ICD。结果构建pPICZα/HER2/neu ICD真核表达载体并经电转化获得Zeocin抗性阳性的克隆;PCR法筛选了稳定表达HER2/neu ICD的菌株;SDS-PAGE分析显示甲醇诱导后表达上清中含有HER2/neu ICD,分子量约为84kDa。结论成功构建pPICZα/HER2/neu ICD真核表达载体并筛选出稳定表达HER2/neu ICD的毕赤酵母工程菌。
- 徐煌韩冬董波关铭颜炜群
- 关键词：基因表达毕赤酵母
- 乳腺癌T7噬菌体展示文库的构建
- 2015年
- 目的本研究拟构建人乳腺癌T7噬菌体展示文库,为进一步筛选特异性高的乳腺癌分子标志物原奠定基础。方法确诊乳腺癌患者手术标本20例,Trizol法提取总RNA,逆转录合成双链cDNA后,与T7Select 10-3载体连接,体外包装并扩增得到人乳腺癌T7噬菌体展示cDNA文库。结果构建了乳腺癌T7噬菌体展示cDNA文库,文库滴度2.1×107pfu/ml。随机从文库抽取50个克隆PCR扩增插入片段,电泳结果显示乳腺癌文库插入率98%(49/50)。结论成功构建了乳腺癌T7噬菌体展示cDNA文库,为筛选和鉴定乳腺癌相关抗原奠定基础。
- 韩冬徐煌肖燕萍
- 关键词：噬菌体展示CDNA文库乳腺癌
- 生物化学教学培养学生创新能力的实践——“基于学科前沿案例的三步阶梯”教学模式被引量：1
- 2022年
- 以嘉兴学院医学院2018级254名临床医学专业本科生为测试对象,随机分为观察组(129人)和对照组(125人);对照组的生物化学课程教学采用常规教学模式,观察组采用“基于学科前沿案例的三步阶梯”教学模式。结果发现,观察组学生的创新力倾向、冒险性、好奇心、想象力及挑战性得分均比教学实践前提高,差异均有统计学意义(P<0.05),且观察组与对照组教学实践后差异也均具有统计学意义(P<0.05)。因此,采用“基于学科前沿案例的三步阶梯”教学模式,可提升临床医学专业学生的创新能力。
- 徐煌任湘鹏刘托平韩冬
- 关键词：教学模式生物化学
- 组织工程角膜上皮治疗兔角膜缘干细胞缺损模型的实验研究
- 2010年
- 采用全板层切除术制作兔眼角膜缘干细胞完全缺损模型,取对侧眼角膜缘组织进行干细胞培养,并以纤维蛋白为基质网架构建组织工程角膜上皮.将实验动物随机分为实验组和对照组,对照组移植不含干细胞的凝胶膜,术后观察1个月.以角膜上皮染色、角膜混浊及新生血管3项指标进行效果评价.结果显示,实验组角膜上皮是一个逐渐修复的过程,角膜水肿、炎性反应逐渐减轻,新生血管明显减少.由此得出,以纤维凝胶膜为一种新型的组织工程材料制备的组织工程角膜上皮经移植术后证实可修复角膜上皮的损伤.
- 徐煌
- 关键词：角膜角膜损伤
- 高表达HER2/neu小鼠乳腺癌肿瘤模型的建立
- 2009年
- 用不同数量的处于对数生长期的D2F2细胞接种于BALB/C小鼠的胸部皮下,建立高表达HER2/neu的小鼠乳腺癌肿瘤模型,并观察小鼠肿瘤的生长特点,应用免疫组织化学染色方法进行鉴定,归纳总结接种细胞数与肿瘤发生率的关系和肿瘤生长对小鼠生活状态的影响。结果显示:在接种细胞数大于5×109/L时,BALB/C小鼠的肿瘤模型全部建立成功,免疫组织化学结果显示,肿瘤组织高表达HER2/neu且D2F2细胞接种于BALB/C小鼠的肿瘤模型成功率与接种细胞数成正比。
- 徐煌韩冬
- 关键词：乳腺癌肿瘤模型HER2/NEU
- Klotho基因转染促进脂肪间充质干细胞增殖的实验研究被引量：2
- 2012年
- 目的探讨klotho基因转染对脂肪间充质干细胞(ADSCs)增殖的影响。方法将含有klotho全长基因的真核质粒转染至从脂肪组织分离的ADSCs中,采用CCK-8法测定转染后细胞增殖率,western blot法检测转染后细胞周期蛋白D1的表达变化,流式细胞术检测转染前后ADSCs的细胞周期变化。结果转染klotho基因96h后AD-SCs的细胞增殖率为170.50%;流式细胞术检测结果显示,ADSCs转染klotho基因S期和G2期细胞明显增多;west-ern blot分析显示ADSCs转染klotho基因组细胞周期蛋白D1增高。结论转染klotho基因有促进ADSCs增殖的作用。
- 韩冬徐煌郑永霞肖燕萍
- 关键词：KLOTHO脂肪间充质干细胞细胞增殖
- 餐盘
- 1．本外观设计产品的名称：餐盘。;2．本外观设计产品的用途：本外观设计产品用于盛放食物。;3．本外观设计产品的设计要点：在于产品的形状及图案相结合。;4．最能表明本外观设计设计要点的图片或照片：立体图。
- 江思思韩念懿徐煌
- 基于Au纳米材料的电化学标记免疫传感器研究
- 2017年
- 利用Au-S键的强烈吸附特性以及金纳米粒子对蛋白质的吸附特性,以硫堇为电化学标记物,通过抗体、抗原的生物吸附性,构筑三明治结构的电化学免疫夹心传感器。在磷酸缓冲溶液(pH=7.4)中,用循环伏安法(CV)与微分脉冲伏安法(DPV),测定免疫夹心传感器的电化学性能。电流大小i_p(μA)与抗原的浓度在5～40 ng/mL成线性关系。线性回归方程为i_p(μA)=0.0305C(ng/mL)+0.0813,相关系数为0.9988,检出限为0.625 ng/m L(S/N=3)。
- 翁丽钦罗允允徐煌沈红霞许航程琼
- 关键词：纳米金硫堇电化学免疫传感器免疫分析
