方肇勤 作品数:450 被引量:2,438 H指数:29 供职机构: 上海中医药大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 上海市科委国际合作基金 上海市教育委员会重点学科基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 文化科学 生物学 自动化与计算机技术 更多>>
基于芯片数据分析丝裂原激活蛋白激酶信号通路基因在不同证候H22肝癌小鼠肾上腺的表达差异 被引量:3 2009年 目的:探索丝裂原激活蛋白激酶(MAPK)信号通路基因在不同证候H22肝癌荷瘤小鼠肾上腺的表达特征。方法:采用小鼠标准化四诊及辨证方法,以及GeneChip Mouse Exon 1.0 ST Array等技术,检测H22肝癌小鼠早期邪毒壅盛证和气虚证、中期阳气虚证、中晚期气阴阳虚证共4个证候肾上腺基因表达的差异,分析不同证候小鼠肾上腺组织MAPK信号通路的表达特征。结果:与正常小鼠比较,①肝癌小鼠各证候中,ERK通路、p38/MAPK通路、ERK5通路基因在肾上腺中表达升高;②JNK通路基因在各证候肝癌小鼠肾上腺中表达下降;③其他级联激酶基因在MAPK信号通路中表达也下降。结论:H22肝癌小鼠肿瘤发生后,其肾上腺组织MAPK信号转导中与TGF-β相关的p38/MAPK通路被激活,而JNK通路被抑制;另外两条ERK与ERK5通路同样也被激活。提示不同证候肝癌小鼠的肾上腺组织主动参与了MAPK信号转导过程。 潘志强 方肇勤 卢文丽 梁超 吴中华 刘小美 高必峰关键词:信号转导通路 丝裂原激活蛋白激酶 P38 证候 肾上腺 《中医学综合实验》PBL的设计与实施 被引量:7 2011年 目的:探索在《中医学综合实验》课程中开展PBL教学。方法:依据课程教学目的,确立PBL具体教学目标,选择我国常见病临床经验总结到动物实验相互衔接的3个案例,分4个单元小班PBL教学;在课程结束之际开展评价及学生无记名填写调查问卷。结果:连续3年开展了PBL教学,共计有232名学生参加,每年平行开设的4个PBL班均顺利完成教学任务。调查表明,学生对PBL教学的形式和内容给予了充分的肯定,赞同本课程PBL形式和内容者占90%、认为有助于培养知识交叉渗透和融会贯通者占95%、认为有助于激发好奇心和调动其主观能动性者占93%、认为有助于培养创造能力者占84%,达到了教学目的。结论:本课程PBL教学设计与实施是可行的,对于提高实验中医学课程体系的教学质量,加强中医药人才科研素质与能力等的培养是有益的。 方肇勤 张煜 管冬元 宋菊敏 潘志强 梁超 卢文丽 刘小美关键词:PBL教学 H22荷瘤小鼠早期邪毒证与气虚证对甲状腺Tg等基因转录及激素水平的影响 被引量:3 2012年 目的:观察H22肝癌小鼠早期邪毒证和气虚证对甲状腺Tg等11个基因转录及激素水平影响。方法:采用标准化诊法技术筛选出邪毒证、气虚证H22肿瘤小鼠,RTqPCR检测激素生成相关Tshr等11个基因转录水平,同时ELISA法检测血清甲状腺激素T3和T4水平。结果:(1)甲状腺激素水平在肿瘤发生后下降,且邪毒证甚于气虚证;(2)Tg等11个基因,转录水平变化总体趋势与激素水平类似。结论:肿瘤发生后,小鼠甲状腺机能受到抑制,其中邪毒壅盛证尤甚。 卢文丽 方肇勤 潘志强 刘小美 梁超 管冬元 吴中华关键词:小鼠 气虚证 甲状腺 激素 健脾益气法对DEN大鼠肝癌后基因组转录调控的生物信息学分析 被引量:8 2014年 目的研究健脾益气法对DEN大鼠肝癌基因表达谱的影响,初步探讨健脾益气法治疗肝癌的分子机制。方法利用affymetrix NetAffxTM、DAVID和STRING等在线分析软件,对前期用Affymetrix Rat 230A GeneChip arrays检测到的不同中医治法干预后的DEN大鼠肝癌基因表达谱进行生物信息学分析。结果健脾益气法对肝癌基因表达的调节要明显优于其它治法,其调节的差异基因440个,包括上调表达130个和下调表达310个。这些差异基因编码蛋白在生物学过程中主要参与对有机物的应答反应和胞外刺激反应,在分子功能上主要参与特定蛋白的结合,而在信号通路中主要参与Gq蛋白激活的花生四烯酸-HETEs代谢通路;这些差异蛋白的相互作用主要集中在Adcy3、Gnao1、Tgfb1、Vim等15个基因的表达产物,结合文献挖掘发现健脾益气法对肝癌基因表达的调节主要表现在对TGF-β1诱导的上皮-间质转化(EMT)的下调、cAMP含量的上调和PPARα等核受体的逆向调节等,其中以TGF-β1-EMT蛋白网络相关分子在DEN大鼠肝癌中的表现及健脾益气法对其下调作用最明显。结论健脾益气法对DEN肝癌大鼠的治疗是多方位的;对TGF-β1诱导的肝癌EMT过程和Gq蛋白激活的花生四烯酸-HETEs代谢通路的下调作用可能是健脾益气法治疗肝癌的重要机制。 卓少元 方肇勤 管冬元 吴中华 高必峰关键词:肝癌 基因 任务驱动教学法在大学生“科创中阶训练”课程中的应用 被引量:1 2023年 在上海新型冠状病毒肺炎严重时期,我校全部课程转为在线授课。据此,我们在中医学九年制屠呦呦班大二学生中尝试采用任务驱动教学法开展“科创中阶训练”课程的在线教学,即教师提出问题(任务)——学生完成任务——师生交流讨论——教师总结的教学形式,取得了较好的效果。调查问卷显示,86.67%的学生认可这种教学形式,66.67%的学生觉得教学内容和进度安排合理;几乎所有的学生认为该课程对激发科研兴趣、形成科研思维、提升科研相关能力、形成创新和开拓精神、促进团队协作等方面具有较大帮助。针对部分学生反映课程安排比较紧、自主探索学习时间偏长的问题,后期将进行相应的优化和改进。 刘小美 潘志强 方肇勤 卢文丽 梁超 贾冬威 彭佩克 张静关键词:任务驱动教学法 批判性阅读 科研思维 同病异证H22荷瘤小鼠甲状腺溶酶体酸性水解酶基因表达特征(摘要) 目的:观察同病异证H22荷瘤小鼠甲状腺溶酶体酸性水解酶类基因表达的特征.方法:采用小鼠计量化四诊和辨证方法、及GeneChip Mouse Exon 1.0 ST Array等技术,观察肿瘤早期邪毒壅盛证及气虚证H22小... 卢文丽 方肇勤 潘志强 刘小美 梁超 管冬元 吴中华关键词:荷瘤小鼠 证候 同病异证 甲状腺 溶酶体 自发性高血压大鼠证候特征及辨证论治疗效评价 被引量:7 2009年 目的:观察自发性高血压大鼠SHR模型证候的发生和演变,及辨证论治疗的疗效及评价。方法:设置Wistar大鼠对照组,SHR大鼠模型组,同时采用西药及中西结合辨证治疗进行干预,观察四诊、血压、心率、心脏重量等指标的变化。结果:①西药治疗能有效降低SHR大鼠血压和心脏指数,中西医结合辨证论治作用有增强倾向。②与正常大鼠对照,SHR大鼠具有肝阳上亢的表现;与对照西药相比,中西医结合辨证论治改善SHR气盛方面具有一定的优势;西药和中西医结合辨证论治,有改善其爪色偏淡程度的趋势。③SHR大鼠虽然存在同病异证,但个体间证候及其严重程度接近,可能与动物尚处于中青年阶段有关。④以血瘀方为基本方,对血压和爪色能起到一定改善作用。结论:中西医结合辨证论治可以在一定程度上增强降压疗效、保护靶器官及改善证候,而如何不断优化辨证论治方案则是值得努力的方向。 卢文丽 方肇勤 潘志强 刘小美 陈宝英关键词:高血压 证候 辨证论治 疗效 对Walker256荷瘤大鼠实施实体瘤中心变性粉碎引流术的可行性评价 被引量:1 2017年 目的:评价实体瘤中心变性粉碎引流术(the method of solid tumors center’s denaturation,smashing and drainage,TCDSD)的疗效及安全性。方法:采用腹水型Walker 256乳腺癌细胞接种雄性SD大鼠腋下形成实体瘤模型,分别设模型对照组(A组)、实体瘤中心热变性组(B组)、热变性+中心粉碎+引流(TCDSD)组(C组)、TCDSD后粉碎腔内阿霉素和预知子种子醇提物复合给药组(D组)。分别予相应干预,并分析各组大鼠肿瘤生长及肿瘤空腔重构情况,比较大鼠荷瘤体质量及对肝、肾、脾的影响。结果:瘤质量见C组D组>B组的趋势;C、D组大鼠肿瘤粉碎腔均被肿瘤及变性后肿瘤组织填满,实现术区重构;各组大鼠荷瘤体质量、去瘤体质量、肝肾脾质量差异均无统计学意义(P>0.05),肝肾脾外观无明显差别,提示各治疗组均未见毒副作用。结论:TCDSD治疗实体瘤安全有效,是对完善和优化现有肿瘤治疗方案的积极探索。 卢涛 潘志强 方肇勤 梁龙龙 王晓敏 周张杰 卢文丽关键词:WALKER 经典气血阴阳虚证模型小鼠在“肾藏象”层面的证候物质基础研究 被引量:6 2018年 目的研究气血阴阳虚证模型小鼠在"肾藏象"层面的证候物质基础。方法以雄性ICR小鼠为对象,以控食法复制气虚证模型,以乙酰苯肼复制血虚证模型,以甲状腺素复制阴虚证模型,以氢化可的松复制阳虚证模型。动态观察小鼠体质量变化,检测各脏器变化;取肾脏、肾上腺和骨髓组织抽提RNA,以实时荧光定量PCR技术检测相关基因表达;以ELISA方法检测血清皮质酮含量。结果 (1)与正常对照组比较,控食组小鼠体质量下降最显著(P<0.01),乙酰苯肼和氢化可的松组小鼠体质量也显著下降(P<0.05);控食组和氢化可的松组小鼠脾脏与胸腺明显萎缩(P<0.01),乙酰苯肼组小鼠脾脏显著肿大、而胸腺严重萎缩(P<0.01)。(2)与正常对照组比较,控食组和乙酰苯肼组血清皮质酮水平显著升高(P<0.05),而氢化可的松组显著下降(P<0.001)。(3)控食组小鼠肾上腺合成皮质激素的重要酶Star、Cyp21a1、Cyp11b1表达显著升高(P<0.05);肾脏Epo表达显著升高(P<0.05),Csf2显著下降(P<0.05);骨髓Tpo、IL-4表达显著上调(P<0.05)。(4)乙酰苯肼组小鼠肾上腺Cyp11a1、Cyp21a1、Cyp11b1表达显著升高(P<0.05);肾脏Epo、Csf2、Csf3表达显著升高(P<0.05);骨髓Csf3、IL-4、IL-5、IL-6表达显著升高,而IL-1b和IL-7显著下降(P<0.05)。(5)甲状腺素组小鼠肾上腺Cyp11b1表达显著升高(P<0.05);肾脏Epo表达显著升高,Csf2显著下降(P<0.05);骨髓Csf3、IL-2和IL-5表达显著下降(P<0.05)。(6)氢化可的松组小鼠Star、Cyp21a1、Cyp11b1、Cyp11b2表达显著下降(P<0.05),肾脏Epo表达显著升高,而Csf1和Csf2显著下降(P<0.05),骨髓Csf3、IL-1b、IL-5和IL-7表达显著下降,IL-4却显著升高(P<0.05)。结论通过控制摄食量,给予乙酰苯肼、甲状腺素及氢化可的松,可以复制出相关的中医虚证模型,且在肾上腺、肾脏及骨髓等"肾藏象"层面存在相应的物质功能变化。 潘志强 钱宏梁 王晓敏 梁龙龙 方肇勤关键词:气虚证 血虚证 阴虚证 阳虚证 证候模型 肾藏象 原发性肝癌中医证演变规律的临床调查 <正>目前,中医界对原发性肝癌(以下简称肝癌)证的研究往往注重整理古代医家论述和临床个案总结,对其整体的宏观分布和演变规律的把握尚缺少专门严格的研究,由于缺少这样的研究,给中医药防治肝癌临床疗效的总结和提高带来困难,也造... 方肇勤 李永健 管冬元 陈德溯 唐辰龙 马骏文献传递