景滢滢
- 作品数:11 被引量:9H指数:1
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- 检测土拉弗朗西斯菌的生物素—亲和素ELISA法的建立被引量:1
- 2010年
- 〔目的〕建立一种快速、敏感、特异检测土拉弗朗西斯菌的免疫学方法。〔方法〕应用生物素-亲和素标记系统,建立双抗体夹心ELISA方法,检测土拉弗朗西斯菌,并进行"模拟样品"的检测判定其定量检测能力。〔结果〕建立的生物素—亲和素ELISA检测土拉弗朗西斯菌的方法具有很好的敏感性和特异性,检测FopA蛋白的灵敏度达到6ng/ml;批内变异系数1.96%~6.64%,批间变异系数8.94%~10.02%,重复性好;检测不同浓度马秋波GP2蛋白、天花M1R蛋白、黄热YF-E-D3蛋白、禽流感NP蛋白、登革病毒Deng-E-D3蛋白和普氏立克次体120N蛋白,未发现交叉反应;对"模拟样品"中土拉弗朗西斯菌FopA蛋白的检测回收率为91.7%~125.0%。〔结论〕应用生物化的FopA多抗与酶标亲合素结合,建立了检测土拉弗朗西斯菌的生物素—亲和素放大酶联免疫吸附法(BSA-ELISA),具有较好的灵敏度和特异性,在病原菌的识别、快速检测、应对生物恐怖威胁中具有广阔的应用前景。
- 景滢滢杨宇王静杨永莉孙肖红胡孔新王振东
- 关键词:土拉弗朗西斯菌多克隆抗体
- 土拉弗朗西斯菌检测研究进展被引量:8
- 2009年
- 土拉弗朗西斯菌(Francisella tularensis)是土拉菌病(Tularemia)的致病菌,是最具传染性的致病菌之一,在自然界中已发现一百种以上的动物感染此菌。因其传播途径多样,易扩散、毒性强而被美国疾病控制预防中心列入A类生物恐怖制剂。土拉菌病是一种人畜共患病,致死率高,及时、准确的检测土拉菌对于土拉菌病患者及时治疗和防止扩散具有重要的意义。土拉菌检测方法很多,如菌培养,微凝集实验、酶联免疫吸附、快速检测试纸条、生物传感器、PCR、核酸杂交检测、质谱分析、基因芯片等。但到目前为止还没有一种成熟的用于土拉菌检测方法,其主要原因在于土拉菌致病性强,且不易分离培养。本文综述了土拉菌细菌学、免疫学、分子生物学方法检测的最新研究进展。
- 王振东景滢滢王静
- 关键词:土拉弗朗西斯菌
- 一种土拉弗朗西斯菌检测试纸及其制备方法、利用该检测试纸的检测方法和定量检测系统
- 本发明公开了一种土拉弗朗西斯菌检测试纸及其制备方法、利用该检测试纸的检测方法和定量检测系统,本发明利用胶体金标记和双抗体夹心免疫层析技术,建立土拉弗朗西斯菌的快速检测方法,建立的检测土拉弗朗西斯菌的胶体金免疫层析方法,能...
- 王静景滢滢王振东杨宇
- 文献传递
- 土拉弗朗西斯菌抗体的检测试纸及其制备方法、利用该检测试纸的检测方法和定量检测系统
- 本发明公开了一种土拉弗朗西斯菌抗体的检测试纸及其制备方法、利用该检测试纸的检测方法和定量检测系统、利用该检测试纸的检测方法和定量检测系统,其利用胶体金标记和双抗体夹心免疫层析技术,建立土拉弗朗西斯菌抗体的快速检测方法,建...
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- 文献传递
- 一种土拉弗朗西斯菌检测试纸
- 本实用新型公开了一种土拉弗朗西斯菌检测试纸,包括反应支撑物、紧密连接于反应支撑物上表面中部的硝酸纤维膜,硝酸纤维膜起始端的上表面与吸水垫部分重叠连接、硝酸纤维膜末端的上表面与含有胶体金标记的FopA-S多克隆抗体的金标抗...
- 王静景滢滢王振东杨宇
- 文献传递
- 土拉弗朗西斯菌胶体金免疫层析快速检测方法的建立
- 2010年
- 目的建立胶体金免疫层析技术快速定量检测土拉弗朗西斯菌。方法利用胶体金标记和双抗体夹心免疫层析技术,建立土拉弗朗西斯菌的快速检测方法,评价其特异性和敏感性,并拟合检测曲线进行定量检测。在面粉、饼干、果冻、梨汁等食品样品中添加土拉弗朗西斯菌的FopA蛋白模拟污染样品,评价该方法对固体、半固体、液体等食品样品的检测能力。结果该法可在10min内完成定性和定量检测,灵敏度为750ng/ml,线性范围750~24000ng/ml、回收率为56.7%~89.2%。结论所建立的检测土拉弗朗西斯菌的胶体金免疫层析方法,能快速、灵敏、特异、准确地检测样品中的土拉弗朗西斯菌,适用于现场快速检测。
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- 关键词:土拉弗朗西斯菌胶体金免疫层析
- 土拉弗朗西斯菌两种不同长度的外膜蛋白FopA抗原和抗体的制备
- 2010年
- 目的:根据外膜蛋白FopA的序列信息,建立土拉弗朗西斯菌FopA蛋白全长(FopA-L)和部分(FopA-S)的特异性抗原的BL21表达系统,获得高活性的重组FopA-L、FopA-S蛋白并制备相应的多克隆抗体,为土拉菌的监测、诊断和治疗提供依据。方法:通过pET100质粒构建FopA-L及FopA-S的表达载体,转化大肠杆菌BL21细胞并诱导表达FopA-L及FopA-S蛋白,螯合镍离子次氨基三乙酸(Ni-NTA)亲合层析纯化FopA蛋白,用重组蛋白免疫大耳白兔制备多克隆抗体,通过ELISA、Western印迹、胶体金免疫层析技术等方法进行检测。结果:构建了FopA-L及FopA-S的表达载体,获得相应的高表达目的蛋白BL21细胞株,用表达的蛋白为抗原成功制备了FopA特异性的抗体,效价皆在1∶100000以上且特异性良好。结论:FopA-S与FopA-L两种抗原和相应抗体的制备为建立土拉菌快速检测方法奠定了基础。
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- 关键词:大肠杆菌多克隆抗体
- 一种检测血清样本中土拉抗体的蛋白悬浮芯片及其制备方法和使用方法
- 本发明公开了一种检测血清样本中土拉抗体的蛋白质悬浮芯片及其制备方法和使用方法。本发明的方法检测能力好、灵敏度高、特异性强、动态范围宽,并建立了以土拉抗体为代表的细菌性抗体蛋白悬浮芯片检测的开放性检测模式化平台。
- 王静杨永莉杨宇孙肖红张晓龙景滢滢
- 一种检测血清中土拉抗体的蛋白悬浮芯片系统
- 本实用新型公开了一种检测血清样品中土拉抗体的蛋白悬浮芯片系统,包括:芯片基体、加液系统、悬浮芯片检测仪和计算机,芯片基体内装有相关缓冲溶液和待测抗体,相关缓冲液中设置有编码微球,编码微球上包被有捕获抗原,加液系统依次向芯...
- 王静杨宇杨永莉孙肖红张晓龙景滢滢
- 文献传递
- 检测土拉弗朗西斯菌抗体的胶体金免疫检测试纸条
- 本实用新型公开了一种检测土拉弗朗西斯菌抗体的胶体金免疫检测试纸条,包括反应支撑物、紧密连接于反应支撑物上表面中部的硝酸纤维膜,硝酸纤维膜起始端的上表面与吸水垫部分重叠连接、硝酸纤维膜末端的下表面与金标抗体保护膜部分重叠连...
- 王静景滢滢杨宇杨永莉孙肖红胡孔新
- 文献传递