李新涛 作品数:40 被引量:190 H指数:9 供职机构: 中国人民解放军总医院 更多>> 发文基金: 国家高技术研究发展计划 卫生行业科研专项 国家重点基础研究发展计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 自动化与计算机技术 文化科学 理学 更多>>
miR-223在肾透明细胞癌中的表达与功能 被引量:10 2015年 目的探讨mi R-223在肾透明细胞癌中的表达与功能。方法用real-time RT-PCR法检测mi R-223在肾透明细胞癌组织和瘤旁组织中的表达以及细胞系中mi R-223的表达量。用transwell迁移实验和划痕实验测转染mi R-223模拟物的786-O细胞的迁徙能力,MTS法测其增殖情况,流失细胞仪分析其细胞周期。并用SPSS统计软件分析其临床数据与mi R-223表达量的关系。结果 mi R-223在肾透明细胞癌组织和细胞系中的表达量高于瘤旁组织和正常肾小管上皮细胞(P=0.0003),其mi R-223的表达量与肿瘤的大小有关,肿瘤直径大于4 cm的肿瘤mi R-223表达量升高(P=0,0028)。转染mi R-223模拟物的786-O细胞transwell细胞迁移数比对照组多(P<0.0001),划痕实验显示实验组愈合能力比对照组快,增殖实验表明实验组增殖速度快于对照组(P=0.006),细胞周期显示实验组细胞G1期减少,S期细胞增加,提示处于增殖的细胞数多(P<0.05)。结论 mi R-223可能起着促进肾透明细胞癌发生发展的作用,可能是抗肾透明细胞癌治疗的新的抗癌靶标。 牛少曦 马鑫 张瑜 巩会杰 高宇 李新涛 沈东来 王雷 姚远新 张旭关键词:肾透明细胞癌 迁移 增殖 VHL慢病毒表达和干扰载体的构建及对肾癌细胞增殖和凋亡的影响 被引量:3 2015年 目的构建人VHL重组慢病毒表达载体及干扰载体,建立稳定转染细胞株,观察VHL对肾癌细胞株增殖和凋亡的影响。方法构建p Zs Green1-VHL及p LL3.7-sh VHL重组慢病毒载体,与3质粒包装系统用脂质体法共同转染293T细胞,包装成病毒颗粒,分别感染A498、Caki-1细胞,并进行RT-PCR和Western blot检验细胞中VHL的表达。用MTS法和流式细胞仪检测VHL对肾癌细胞增殖和凋亡效应的影响。结果重组慢病毒载体及稳定转染细胞株构建成功,转染后VHL在细胞中表达明显变化;VHL过表达细胞的增殖速度明显低于各对照组,而凋亡率明显高于各对照组;VHL干扰细胞的增殖速度明显高于各对照组,而凋亡率明显低于各对照组(P<0.05)。结论 VHL对肾癌细胞具有抑制增殖和诱导凋亡的作用。 沈东来 马鑫 张瑜 高宇 李新涛 顾良友 巩会杰 牛少曦 张旭关键词:慢病毒载体 VHL基因 肾肿瘤 机器人辅助腹腔镜肾上腺肿瘤切除术不同手术入路疗效对比与典型病例分析 被引量:9 2017年 目的:比较经腹腔入路与经腹膜后入路达芬奇机器人辅助腹腔镜肾上腺切除术的疗效,结合典型病例分析不同手术入路的选择依据。方法:2015年5月~2017年5月在我科接受机器人辅助腹腔镜肾上腺肿瘤切除术的患者共49例,回顾性分析其临床基本资料,比较两组患者在性别、年龄、BMI、手术史、肿瘤大小、手术时间、术中失血量、术后是否留置引流管等方面的差异。结果:两组患者在年龄、性别、BMI、肿瘤直径、手术时间、术中出血量、是否留置引流管等方面差异均无统计学意义(P>0.05)。两组患者既往手术史的差异有统计学意义,对于有同侧腹膜后既往手术史的患者均采用经腹腔入路,而存在上腹部手术史的患者80%(4/5)采用了腹膜后入路(P=0.000)。结论:经腹腔与经腹膜后途径机器人辅助腹腔镜肾上腺肿瘤切除术都是安全可行的,二者之间具有相似的手术效果。根据患者既往手术史以及肿瘤的解剖位置特点合理选择手术入路可降低手术难度,达到最佳治疗效果。 倪栋 马鑫 李宏召 唐露 高宇 李新涛 张旭关键词:肾上腺肿瘤切除术 手术入路 腹腔镜肾部分切除术的多模培训模式 被引量:5 2016年 目的:介绍腹腔镜肾部分切除术的多模培训模式,包括腹腔镜模拟器、动物模型和手术培训三部分,并评价其安全性、可行性和有效性。方法:邀请5名具有初步腹腔镜基本操作技术或没有腹腔镜手术经验的住院医师参与培训,在腹腔镜模拟器、小型猪模型和人体上进行肾部分切除术的模拟训练,收集培训过程中学员完成训练的手术时间,手术数量和围手术期数据并进行评价。结果:5位学员均成功接受所有培训,接受腹腔镜模拟器、小型猪动物模型训练,并最终独立完成4~6例肾部分切除术。所有患者均未中转开放手术,无输血及死亡病例发生,平均热缺血时间分别为29.8、30.8、29.7、32.3、30.0 min,平均手术时间分别为109.2、104.8、115.7、112.8、112.6min。5位学员独立完成手术的手术时间、失血量、术后住院时间和围手术期并发症均差异无统计学意义。结论:该多模培训模式安全可行,效果良好,适合于没有腹腔镜经验和肾部分切除术经验的学员进行学习培训。 王保军 黄庆波 李新涛 张旭关键词:腹腔镜手术 肾部分切除术 后腹腔镜肾实质切开肿瘤剜除术治疗肾窦部位完全内生型肾肿瘤 被引量:7 2016年 目的:探讨后腹腔镜下沿Brodel线纵向切开肾实质,剜除肾窦部位完全内生型肾肿瘤的安全性和可行性。方法:回顾性分析2012年1月~2015年12月行此类后腹腔镜手术共21例的临床资料。其中男13例,女8例,中位年龄50(24~76)岁,体质指数25.8(20.9~29.8)kg/m2,患肾平均GFR为36.2(30~43)ml·min-1·1.73m-2,肿瘤直径2.0(1.2~2.5)cm,术前CT或MRI显示此类肿瘤位于肾窦部位,与集合系统紧贴,完全内生,平均R.E.N.A.L.评分9.4(9~10)分。术中阻断患肾动、静脉后,2次注入冰水混合物200ml,降低肾脏表面温度,沿Brodel线切开肾实质,在肿瘤假包膜外游离并完整剥离肿瘤,分两层缝合创缘。结果:21例手术均获成功,平均手术时间94(60~150)min。平均热缺血时间28.4(24~40)min。平均出血量63(20~200)ml。平均术后住院时间5.5(5~6)d。术后病理显示无切缘阳性,术后1例患者出现血尿,于术后3d消失。无出血及漏尿等并发症发生。病理诊断16例肾透明细胞癌,4例乳头状肾细胞癌,1例肾球旁器细胞瘤。术后3个月行肾脏ECT复查,患肾脏平均GFR为31.5(24~38)ml·min-1·1.73m-2,均比术前略有降低。随访4~36个月(中位值20个月),无肿瘤复发及转移发生。结论:后腹腔镜下沿Brodel线切开肾实质,剜除肿瘤治疗肾窦部位完全内生型肾肿瘤安全可行,可以最大限度保留正常的肾实质。近期肿瘤控制效果满意,但有待进一步增加例数并观察远期疗效。 王保军 王云鹏 李新涛 史立新 刘启明 王威 蔡伟 张旭关键词:肾窦 肾实质切开 人微管蛋白辅助因子A基因真核表达载体的构建鉴定及对肾癌细胞株786—0增殖的影响 2014年 目的构建含有人微管蛋白辅助因子A(TBCA)的真核表达载体并观察其对。肾癌细胞株786-0增殖的影响。方法构建真核表达载体pcDNA3.0.Flag-TBCA和pCMV-TBCA—IRES—EGFP,并进行酶切、测序检验、脂质体转染细胞后利用Western blot法检测蛋白表达。以四唑氮化合物(MTS)法绘制细胞生长曲线。结果成功构建了真核表达载体pcDNA3.0-Flag—TBCA和pCMV—TBCA—IRES-EGFP。转染后TBCA在细胞中表达明显升高(P〈0.05)。但在转染后第3、4、5、6天,重组质粒组吸光度值分别为0.52±0.04、0.85±0.04、1.20±0.08、1.61±0.11;与对照组比较无统计学意义(P〉0.05)。结论TBCA的过表达载体构建成功,但在786-0细胞中过表达TBCA后对并不能对细胞增殖产生明显影响。 逄海港 张鹏 宋尔霖 李新涛 马鑫 张旭关键词:肾癌 增殖 TD—IκBα病毒包装及其对肾癌细胞株ACHN增殖和侵袭的影响 被引量:3 2014年 目的构建pLVX-TD—IκBα—IRES—ZsGreenl慢病毒表达载体及包装病毒,观察稳定转染TD-IκBα对肾癌细胞株ACHN增殖和侵袭的影响。方法从pCFG5-IEGZ—TD—IκBα质粒上获得的目的基因片段克隆入pLVX-IRES—ZsGreenl载体,并进行测序。将慢病毒载体与包装质粒delta8.91和p-VSVG以4:3:2比例共转染293T细胞,收集病毒上清并感染肾癌细胞株ACHN,5d后采用Western blot检测TD-IκBα蛋白的表达,使用四唑氮化合物(MTS)和Transwell侵袭实验方法检测细胞增殖、迁移和侵袭能力的变化。结果成功构建pLVX—TD—IκBα—IRES—ZsGreenl慢病毒表达载体,包装病毒后成功感染ACHN细胞株,感染组细胞株中的TD—IκBα蛋白显著表达增高。感染组细胞在490nm处吸光度值明显下降(P〈0.05)。细胞迁移和侵袭实验中,相对于阴性对照组穿膜细胞数[(361.400±42.379)个和(328.500±27.031)个],感染组穿膜细胞数[(252.200±26.142)个和(127.300±35.572)个]显著减少(P〈0.05)。结论成功构建pLVX—TD—IκBα-IRES—ZsGreenl重组慢病毒表达载体并包装病毒,过表达TD—IκBα蛋白可显著降低ACHN细胞株的增殖、迁移和侵袭能力。 李新涛 马鑫 逄海港 高宇 范阳 张旭关键词:IΚBΑ 肾透明细胞癌 增殖 KCNJ5基因148dupT突变对H295R细胞醛固酮分泌的影响 2014年 目的:研究KCNJ5基因148dupT突变对H295R细胞醛固酮分泌的影响及相关机制。方法:构建KCNJ5基因148dupT突变和非突变型质粒,选取H295R肾上腺腺瘤细胞系和293T人胚肾细胞系,应用jetPRIME转染试剂将突变和非突变以及对照质粒转染H295R细胞系以及293T细胞系,使用DiSBAC2染料检测293T细胞膜电位的变化、放射免疫分析法检测H295R细胞醛固酮的合成以及实时定量PCR检测CYP11B1和CYP11B2基因的表达。结果:148dupT突变型KCNJ5基因转入293T细胞可以导致膜电位去极化;转入H295R细胞可以导致醛固酮分泌增加,和CYP11B1和CYP11B2基因的表达增加。结论:148dupT突变型KCNJ5基因可能通过细胞膜电位去极化使得醛固酮合酶基因表达增加,进而导致H295R细胞醛固酮分泌增多和醛固酮瘤的发生发展。 李新涛 王保军 马鑫 吕香君 逄海港 范阳 高宇 艾青 张旭关键词:醛固酮瘤 基因突变 后腹腔入路机器人肾部分切除术:手术效果与技术现状 被引量:8 2016年 后腹腔入路机器人肾部分切除术是近几年逐渐发展起来的手术技术。与经腹腔入路相比,经后腹腔入路更适于有腹腔手术史或腹膜炎病史的患者,更方便处理肾脏背侧和上极肿瘤,能够更快更直接的显露肾动脉,从而减少手术时间,同时减少对肠道、肝脏、脾脏等腹腔脏器的干扰和损伤风险。后腹腔入路机器人肾部分切除术结合机器人操作系统和经后腹腔入路两者的优势,并于近5年相关研究报道逐渐增多。随着手术操作经验的积累,后腹腔入路机器人肾部分切除术将成为处理肾脏背侧和上极肿瘤的更优势选择。 李新涛 张旭 吕香君关键词:机器人 肾部分切除术 机器人辅助腹腔镜肾部分切除术的学习曲线 被引量:7 2014年 目的:探讨机器人辅助腹腔镜肾部分切除术的学习曲线.方法:比较同一外科医生施行的早期20例机器人辅助腹腔镜肾部分切除术和最近20例腹腔镜肾部分切除术的围手术期结果.所有手术在2013年5月~2013年8月完成.既往该医生成功施行1000余例腹腔镜肾部分切除术和300余例机器人辅助腹腔镜根治性前列腺切除术.比较2种术式的手术时间、热缺血时间、出血量、切缘阳性率、术后住院时间、围手术期并发症发生率.结果:2组患者术前临床资料和肿瘤病理学结果的比较差异无统计学意义(P >0.05).2组均无切缘阳性病例.2组手术出血量、术后住院时间、围手术期并发症发生率差异无统计学意义(P >0.05).在机器人辅助腹腔镜肾部分切除术的学习曲线中,手术时间和热缺血时间均呈下降趋势.经过早期9例手术后,机器人辅助腹腔镜肾部分切除术的平均手术时间即可接近最近20例腹腔镜肾部分切除术的平均手术时间.前9例机器人辅助腹腔镜肾部分切除术的平均手术时间是134 mi n ,热缺血时间是20 mi n ,远远长于后11例机器人辅助腹腔镜肾部分切除术平均手术时间107 mi n ,热缺血时间14 mi n .结论:一个资深腹腔镜外科医生从腹腔镜肾部分切除术到机器人辅助腹腔镜肾部分切除术过渡是一个非常迅速的过程,经过前9例机器人辅助腹腔镜肾部分切除术后,行机器人辅助腹腔镜肾部分切除术和腹腔镜肾部分切除术的手术时间大致相同.2组热缺血时间、手术出血量、术后住院时间、手术出血量、术后住院时间、围手术期并发症发生率差异无统计学意义(P >0.05). 谢永鹏 马鑫 李宏召 王保军 史涛坪 张瑜 艾青 黄庆波 范阳 高宇 李新涛 陈路遥 明少雄 张旭关键词:肾肿瘤 机器人辅助腹腔镜 肾部分切除术