目的:优化粉尘螨1类变应原proDer f 1的酶解条件及探讨酶解产物的变应原性。方法:以水解度为指标,采用正交试验考察木瓜蛋白酶和胰蛋白酶水解proDer f 1蛋白的最佳工艺;采用间接酶联免疫吸附试验(ELISA)检测酶解产物的过敏原性。结果:温度是影响proDer f 1蛋白水解效果的主要因素,其中木瓜蛋白酶最佳水解条件为pH 6.5,温度60℃,水解时间4 h,酶用量4 000 U.g-1;胰蛋白酶最佳水解条件为pH 8.0,温度45℃,水解时间4 h,酶用量5 000 U.g-1;ELISA检测表明与proDer f 1变应原相比,木瓜蛋白酶水解产物和胰蛋白酶水解产物的过敏原性均显著减低,且胰蛋白酶水解产物的过敏原性较木瓜蛋白酶水解产物的过敏原性低。结论:优选的粉尘螨1类变应原proDer f 1蛋白的酶解工艺可行,且变应原酶解后,过敏原性有不同程度减低,尤以胰酶水解产物变化最为显著。
