梁跃
- 作品数:5 被引量:8H指数:2
- 供职机构:广西民族大学海洋与生物技术学院更多>>
- 发文基金:广西壮族自治区自然科学基金教育部留学回国人员科研启动基金广西高校人才小高地建设创新团队资助计划更多>>
- 相关领域:生物学轻工技术与工程化学工程更多>>
- 草酸脱羧酶的无载体固定化及化学修饰的研究
- 草酸(HOOC-COOH)是自然界中酸性最强的有机二元酸,它以草酸盐的形式广泛的存在于植物,微生物和包括人在内的动物体内。人们食用高草酸含量的食物后容易的造成草酸在人体内的积累,进而引发多种病理状态。许多原发性的高草酸尿...
- 梁跃
- 关键词:草酸草酸脱羧酶右旋糖酐
- 文献传递
- 右旋糖酐对草酸脱羧酶的修饰研究被引量:4
- 2014年
- 草酸脱羧酶(Oxdc)具有预防和治疗草酸钙结石症的应用前景,为提高其稳定性,改善其应用性能,本文采用高碘酸钠活化右旋糖酐(Dextran)对Oxdc进行化学修饰,并初步优化修饰条件:当高碘酸钠/右旋糖酐质量比为1∶1,右旋糖酐/Oxdc质量比为200∶1,修饰反应6h时,修饰率为93.2%,酶活回收率55.8%。聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDSPAGE)和红外光谱(IR)分析结果证明右旋糖酐和草酸脱羧酶成功共价结合。同时,比较纯化的草酸脱羧酶(Oxdc)和右旋糖酐修饰的草酸脱羧酶(Dextran-Oxdc)的部分酶学性质发现,Dextran-Oxdc的最适反应pH、热稳定性及对胰蛋白酶的耐受性都明显提高,说明经过修饰的草酸脱羧酶稳定性显著增强。
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- 关键词:草酸脱羧酶活化右旋糖酐化学修饰
- 重组草酸脱羧酶的表达及诱导条件优化
- 2013年
- 本文研究了枯草芽胞杆菌(Bacillus subtilis)来源的重组草酸脱羧酶的诱导表达,并对诱导条件进行了优化。结果表明,重组草酸脱羧酶的最佳诱导表达条件为:发酵液初始pH8.0,诱导时机为3h,添加IPTG0.4mmol/L,MnCl26mmol/L,诱导表达10h,在此条件下每升发酵液产草酸脱羧酶960U。
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- 关键词:草酸脱羧酶
- 重组NADP^+依赖甲酸脱氢酶的表达及纯化被引量:1
- 2010年
- 利用甲酸脱氢酶(FDH)催化甲酸脱氢反应是酶促有机合成中重要的还原型烟酰胺辅酶再生系统。实验对E.coli BL21(DE3)/pET32/Bsp-FDH诱导表达NADP+依赖甲酸脱氢酶的表达条件进行了优化,在培养第4h加入0.4 mmol/l的IPTG、诱导时间8h、诱导温度30℃的诱导表达条件下,每升发酵液产甲酸脱氢酶170U。利用亲和层析法一步分离纯化重酶,纯化倍数为9.65、酶活回收达60.43%。实验为重组甲酸脱氢酶应用于有机合成中的NADPH再生奠定基础。
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- 关键词:甲酸脱氢酶纯化
- 交联草酸脱羧酶聚集体的制备及其性质被引量:4
- 2013年
- 为了获得缓解泌尿系统草酸盐结石病症的酶制剂,用无载体固定化方法——交联酶聚集体(CLEAs)制备交联草酸脱羧酶聚集体。使用基因工程菌E.coli BL21(DE3)/pET32a/YvrK诱导表达制备草酸脱羧酶粗酶液,用30%的乙醇进行沉淀分离提纯,纯化倍数为2.7倍,酶活回收率91.2%;在戊二醛添加量为0.06%、pH5、牛血清白蛋白添加量0.5g/L、4℃的条件下处理该酶2h,得到交联草酸脱羧酶聚集体(oxdc-CLEAs),酶活回收率达95.4%;酶学性质研究表明,相对游离草酸脱羧酶,交联草酸脱羧酶聚集体的耐酸性、耐热性、耐胰蛋白酶降解能力均有提高。
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- 关键词:草酸脱羧酶