江建新 作品数:87 被引量:267 H指数:7 供职机构: 武汉大学人民医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国际科技合作与交流专项项目 贵阳市科学技术计划项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
人胆管癌CD24+ CD44+ EpCAMhigh细胞亚群的分选及其肿瘤干细胞样特性的鉴定 被引量:3 2010年 目的 检测及分选人胆管癌中的CD24+ CD44+ EpCAMhigh细胞亚群,探讨其是否具有肿瘤干细胞样生物学特性.方法 流式细胞术检测6例人胆管癌中CD24、CD44、EpCAM的表达率 取2例人胆管癌新鲜标本种植到NOD/SCID鼠皮下,建立荷人胆管癌小鼠模型.流式细胞术分选CD24+ CD44+ EpCAMhigh亚群细胞,NOD/SCID鼠移植瘤试验鉴定其成瘤和分化能力.结果 6例人胆管癌组织标本和2例移植瘤中,CD24+ CD44+ EpCAMhigh在人胆管癌中表达率为0.58%~2.43%(平均值0.94%).运用NOD/SCID鼠移植瘤模型,分选得到CD24+ CD44+ EpCAMhigh亚群细胞.NOD/SCID鼠移植瘤试验,1×103个CD24+ CD44+ EpCAMhigh细胞能成瘤(3/8),而CD24- CD44- EpCAMlow/-细胞在5×104才能成瘤(1/8).CD24+ CD44+ EpCAMhigh胆管癌细胞NOD/SCID鼠移植瘤的组织类型及标记物的表达率和原代肿瘤相似.结论 人胆管癌中含有CD24+ CD44+ EpCAMhigh细胞亚群,具有强成瘤能力、自我更新和分化的能力,可能是胆管癌干细胞. 朱峰 王敏 秦仁义 申铭 王欣 田锐 江建新 石程剑关键词:胆管癌 肿瘤干细胞 长链非编码RNA对胰腺癌侵袭转移分子机制的影响 被引量:2 2022年 胰腺癌是一种恶性程度极高的消化道肿瘤,由于其高度侵袭转移特性,使得目前胰腺癌患者的总体生存率仍非常低。长链非编码RNA(lncRNA)可通过表观遗传调控、转录调控或转录后调控等多种方式参与胰腺癌的发生发展及侵袭转移过程。lncRNA在胰腺癌中表达失调,并通过特定调控方式使其发生上皮间充质转化,进而引起肿瘤细胞生物学行为发生改变。本文就研究lncRNA在胰腺癌中促使其发生上皮间充质转化,作为ceRNA调控肿瘤的生物学功能,并通过调控肿瘤细胞铁死亡、自噬及外泌体等多途径影响胰腺癌发生侵袭转移进行简要综述,为胰腺癌的早期诊断及治疗提供理论依据和新的靶点。 徐建 潘燕妮 刘欣原 江建新关键词:胰腺肿瘤 肿瘤侵润 肿瘤转移 蛋白组学分析胰腺癌干细胞相关差异蛋白的表达 被引量:3 2013年 目的:筛选与鉴定胰腺癌干细胞相关的差异表达蛋白质.方法:以MIA-PaCa2(TIChigh)与BxPc-3(TIClow)为研究胰腺癌干细胞的工具细胞,采用荧光差异双向凝胶电泳技术分离并筛选上述细胞差异表达蛋白,反射式基质辅助激光解吸附电离串联飞行时间质谱鉴定差异蛋白,免疫印迹验证差异表达的TRIM28.结果:获得了MIA-PaCa2(TIChigh)与BxPc-3(TIClow)荧光差异蛋白表达图谱,经DeCyder v6.5软件分析,共有23个差异在1.5倍以上的蛋白质点,经质谱鉴定得到19个蛋白质,相对于BxPc-3(TIClow),在MIA-PaCa2(TIChigh)细胞组中高表达者有8个,低表达者有11个,包括参与细胞通讯和信号传导蛋白、免疫反应蛋白、转录因子与细胞周期调控蛋白、调节脂肪细胞分化和脂滴形成蛋白、细胞骨架蛋白、细胞黏附分子、差向异构酶、转运活性蛋白及参与翻译调节相关蛋白.免疫印迹结果显示TRIM28在BxPc-3(TIClow)没有表达,在MIA-PaCa2(TIChigh)高表达.结论:筛选得到的TRIM28等胰腺癌干细胞相关差异表达蛋白可能与胰腺癌干细胞的发生、发展和调控机制相关,有望成为胰腺癌新的治疗靶点. 江建新 高珊 潘耀振 孙诚谊关键词:胰腺癌 干细胞 电泳 凝胶 蛋白质组学 再改良的Sugiura术治疗门静脉高压症的临床疗效 被引量:2 2016年 目的 探讨再改良的Sugiura术治疗门静脉高压症的临床疗效.方法 采用回顾性队列研究方法.收集2006年6月至2014年10月宜昌市第二人民医院收治的119例门静脉高压症患者的临床资料.72例采用贲门周围血管离断术治疗的患者设为Hassab术组,47例采用再改良的Sugiura术治疗的患者设为R-M Sugiura术组.两组患者均先切除脾脏.Hassab术组采用传统的贲门周围血管离断术,R-MSugiura术组对改良Sugiura术作以下改进:(1)斜形横断贲门.(2)选择性贲门周围血管离断,保留食管旁静脉.(3)带蒂大网膜覆盖吻合口前壁并固定于后腹壁.观察指标:(1)术中及术后情况:手术时间、术中出血量、术后肛门排气时间、术后住院时间.(2)术后并发症发生情况:胸腔积液、围术期再出血、吞咽困难、门静脉血栓形成和胃动力障碍.(3)随访情况.采用电话和门诊方式进行随访,主要通过胃镜观察术后6个月、18个月食管静脉曲张程度分级情况.随访时间截至2016年2月.正态分布的计量资料以-x±s表示,组间比较采用t检验,计数资料采用x2检验,等级资料采用Wilcoxon秩和检验.结果 (1)术中及术后情况:全组患者手术成功.Hassab术组和R-M Sugiura术组手术时间分别为(201±27) min和(255±32) min,两组比较,差异有统计学意义(t=9.67,P<0.05).Hassab术组和R-M Sugiura术组术中出血量、术后肛门排气时间、术后住院时间分别为(380±86) mL、(2.7±0.7)d、(14.2±2.4)d和(401±72)mL、(3.0±1.7)d、(15.1 ±2.7)d,两组上述指标比较,差异均无统计学意义(t=1.35,1.26,1.86,P>0.05).(2)术后并发症发生情况:术后第10天出现吞咽困难情况Hassab术组和R-M Sugiura术组分别为3、10例,两组比较,差异有统计学意义(x^2=0.86,P<0.05).术后第20天出现吞咽困难情况Hassab术组和R-MSugiura术组分别为1、4例,两组比较,差异无统计学意 龚江波 梅长青 江建新关键词:门静脉高压症 改良SUGIURA术 外科手术 成人胰岛细胞的分离与纯化 2011年 目的 探讨体外分离与纯化成人胰岛细胞的方法与可行性,为胰岛细胞移植治疗1型糖尿病提供大量高质量的胰岛细胞。方法获取的成人胰腺组织称重后,采用V型胶原酶消化法分离;再用Ficoll间断密度梯度离心纯化法纯化;在DTZ染色显微镜下,评价胰岛细胞的数量、纯度;并用体外培养、放射免疫测定胰岛素法鉴定胰岛细胞活性。结果成人胰腺经胶原酶消化分离后,胰岛平均收获量(3600±447)个/g胰腺;Ficoll间断密度梯度离心纯化后,胰岛平均收获量(2140±207)个/g胰腺,纯度〉70%;成人胰岛细胞培养2、4、6d后,测定其培养液中基础胰岛素浓度(mIU·L^-1·100^-1)分别为(3.302±1.63)、(3.504±1.10)、(2.921±1.13)。结论胶原酶消化法、Ficoll间断密度梯度离心纯化法分离纯化成人胰岛是有效的方法。 江建新 孙诚谊关键词:胰岛细胞 细胞分离 纯化 沉默FOXC1基因对人胰腺癌细胞增殖的影响 被引量:3 2015年 目的:研究小干扰RNA(small interfering R N A,s i R N A)沉默人胰腺癌Capan-2、PANC-1细胞中叉头框蛋白C1(fork head box C1,FOXC1)基因对胰腺癌细胞增殖能力的影响及作用机制.方法:以胰腺癌细胞、原发胰腺癌组织为研究对象,实时定量逆转录聚合酶链反应(quantitative real-time reverse transcription polymerase chain reaction,q RT-PCR)检测FOXC1 m RNA在胰腺癌细胞及组织中的表达情况;将人胰腺癌细胞分为2组:FOXC1s i R N A组(实验组)、N C s i R N A组(阴性对照组),脂质体转染法将FOXC1 si RNA转染入胰腺癌细胞,q RT-PCR、Western blot技术检测胰腺癌细胞FOXC1 m RNA及蛋白表达变化,5-乙炔基-2'-脱氧尿苷(5-ethynyl-2'-deoxyuridine,Ed U)细胞增殖法检测各组胰腺癌细胞增殖情况;流式细胞技术(flow cytometry,FCM)检测各组胰腺癌细胞的周期分布,Western blot技术分析周期相关蛋白P21、P53、Cyclin D1蛋白表达情况.结果:q RT-PCR结果提示:相比正常胰腺上皮细胞和癌旁胰腺组织,FOXC1 m RNA在胰腺癌细胞及胰腺癌组织中表达较高(P<0.05);q RT-P C R及Westernblo t结果显示FOXC1 si RNA有效沉默了胰腺癌细胞F O X C1基因的转录和表达,E d U细胞增殖实验提示:沉默了胰腺癌细胞F O X C1基因表达后,胰腺癌细胞胞的增殖能力明显下降,较阴性对照组,差异有统计学意义(P<0.05);F C M结果显示:沉默了胰腺癌细胞FOXC1基因表达后胰腺癌细胞被阻滞在G0/G1期,较阴性对照组,差异有统计学意义(P<0.05);Western blot结果显示:较阴性对照组,P21、P53表达水平无明显变化,Cyclin D1表达水平下降,差异有统计学意义(P<0.05).结论:FOXC1 si RNA能够有效沉默人胰腺癌Capan-2、PANC-1细胞FOXC1基因的表达,抑制其增殖,将细胞周期阻滞于G0/G1期,提示FOXC1影响细胞增殖可能是通过调控细胞周期实现的,其机制可能是部分通过调控细胞周期蛋白Cyclin D1的表达而实现. 喻超 江建新 孙诚谊关键词:小干扰RNA 胰腺癌 增殖 五味子甲素协同吉西他滨抑制胆管癌TFK-1细胞的增殖并促进其凋亡 被引量:8 2020年 目的:检测五味子甲素(deoxyschizandrin)单药及联合吉西他滨(gemcitabine)对胆管癌TFK-1细胞增殖及凋亡的影响,并探讨其可能的作用机制。方法:采用不同浓度的五味子甲素(12.5、25和50μmol/L)及等体积DMSO(作为对照组)处理TFK-1细胞,应用CCK-8法检测五味子甲素对TFK-1细胞增殖的影响并计算半数抑制浓度(half maximal inhibitory concentration,IC50)。以不同浓度的吉西他滨(0、0.1、1、10和100μmol/L)单药或联合五味子甲素(25μmol/L)处理TFK-1细胞,CCK-8法检测五味子甲素(25μmol/L)与各浓度吉西他滨的协同指数(q值)。分别采用不同浓度的五味子甲素(12.5、25和50μmol/L)以及吉西他滨(1μmol/L)单药、五味子甲素(25μmol/L)单药或吉西他滨(1μmol/L)联合五味子甲素(25μmol/L)处理TFK-1细胞,均以DMSO处理细胞作为对照组;应用平板克隆实验检测各组TFK-1细胞的克隆形成能力,DAPI染色法和FCM法检测对TFK-1细胞凋亡的影响。采用计算机分子对接技术验证五味子甲素与蛋白靶点表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)和磷脂酰肌醇3-激酶(phosphoinositide 3-kinase,PI3K)的结合能力;应用蛋白质印迹法检测TFK-1细胞中EGFR、PI3K、蛋白激酶B(protein kinase B,PKB,又称AKT)、磷酸化AKT(phospho-AKT,p-AKT)、剪切型-caspase 3(cleaved-caspase 3)、cleaved-caspase 8和Bcl-2的表达水平。结果:五味子甲素对TFK-1细胞的杀伤作用与浓度具有依赖性,五味子甲素对TFK-1细胞的IC50值为32.13μmol/L。五味子甲素与吉西他滨存在协同效应,吉西他滨(1μmol/L)联合五味子甲素(25μmol/L)的q值最大为1.40。五味子甲素单药即能明显抑制TFK-1细胞的克隆形成能力,联合吉西他滨能进一步提高对TFK-1细胞克隆形成的抑制作用(P值均<0.05)。五味子甲素单药即能明显提高TFK-1细胞的凋亡率,联合吉西他滨能进一步提高诱导TFK-1细胞凋亡的能力(P值均<0.05)。计算机分子对接结果显示,� 陈鹏 陈鹏 雷珊 沈伊依 张丹 张丹关键词:胆管肿瘤 五味子素 吉西他滨 原发性肝癌免疫治疗的研究进展 2021年 原发性肝癌是一种致死率很高的恶性肿瘤。目前,临床上主要是采用根治性手术治疗原发性肝癌。对此病患者进行手术后其病情的复发率较高。采用手术联合术后化疗、放疗治疗原发性肝癌虽然能在一定程度上延缓患者病情复发的时间,延长其生存期,但会使其出现较为严重的不良反应,导致其生存质量下降。有研究发现,原发性肝癌的发生、发展与患者的免疫功能存在密切联系。近年来随着肿瘤免疫学的发展,免疫疗法成为临床上治疗原发性肝癌的一种新方法。本文就原发性肝癌免疫治疗的研究进展进行综述。 张丹 江建新关键词:原发性肝癌 免疫治疗 转录中介因子1β在胰腺癌中的表达及临床意义 被引量:1 2015年 目的 通过对胰腺癌组织及对应的癌旁无瘤组织中转录中介因子1β (TIF1β)的表达进行分析,探讨其表达与胰腺癌患者临床病理因素的关系.方法 利用组织芯片技术结合免疫组化法检测91例胰腺癌组织及对应癌旁无瘤组织中TIF1β蛋白的表达.结果 TIF1β蛋白在胰腺癌组织及对应癌旁无瘤组织中均有不同程度的表达,其定位于胞核,胰腺癌组织中TIF1β阳性表达率显著高于癌旁组织(P <0.05);TIF1β的表达与临床病理分期、淋巴转移及TNM分级相关(P<0.05).结论 TIF1β在胰腺癌中高表达,并且与胰腺癌的临床病理分期、淋巴转移及TNM分级有关.TIF1β可能在胰腺癌的发生发展过程中起重要促进作用. 喻超 江建新 陈玲 孙诚谊关键词:胰腺癌 组织芯片 免疫组织化学 分选蛋白17对胰腺癌细胞生物学性状的影响 2022年 目的探讨分选蛋白(SNX)17通过激活表皮生长因子受体(EGFR)影响胰腺癌细胞侵袭、增殖和迁移能力。方法采集3例人胰腺癌组织及癌旁组织样本,自2021年1月至2021年3月收集于贵州医科大学附属医院肝胆外科,用免疫组织化学(IHC)染色检测癌组织与癌旁组织中SNX17的表达量。用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)技术检测胰腺癌细胞系中SNX17的相对表达量;用空siRNA以及两种敲低SNX17的小干扰RNA(siRNA)分别转染上述细胞,分组为NC组、SNX17-si1组和SNX17-si2组。通过细胞计数试剂盒(CCK-8)、平板克隆实验检测胰腺癌细胞的增殖能力,Transwell及划痕实验检测胰腺癌细胞迁移能力。蛋白质印迹法(Western blot)检测在SNX17敲低的癌细胞中EGFR以及细胞外调节激酶(ERK)的相对表达量差异。最后在胰腺癌细胞中共转染siRNA以及EGFR的过表达质粒进行功能回复实验(分组为NC组、SNX17-si1组、EFGR-overexpression+SNX17-si1组),组间比较采用t检验,组内两两比较采用LSD-t检验。结果免疫组织化学检测结果显示癌组织中SNX17相对表达量高于癌旁组织(5.750±1.323,t=4.345,P<0.05),差异有统计学意义。RT-qPCR发现在胰腺癌细胞系中,人胰腺癌细胞-2(MIA PaCa-2,19.240±2.048、t=8.844,P<0.05)和人胰腺癌细胞-1(PANC-1,5.796±1.256,t=3.712,P<0.05)细胞中SNX17相对表达量显著高于其他胰腺癌细胞系,差异有统计学意义。CCK-8实验技术结果显示,SNX17-si1组、SNX17-si2组低于NC组吸光度值(0.707±0.059比0.346±0.075比1.109±0.052比0.602±0.047,t=12.060、4.642、21.440、12.750,P<0.01),差异有统计学意义。平板克隆结果显示转染组细胞集落数减少。划痕实验结果显示敲低SNX17降低细胞的侵袭能力。Transwell迁移实验结果显示,SNX17-si1组、SNX17-si2组单位视野穿过的细胞数低于NC组[(666.300±14.400)个比(574.300±10.800)个比(129.300±4.300)个比(93.700±3.100)个,t=46.260、53.220、29.850、15.450 潘燕妮 王杰 陈炎坤 江建新关键词:胰腺癌 表皮生长因子受体 增殖