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一种快速检测食物中维生素B1的胶体金试纸: 本实用新型公开了一种快速检测食物中维生素B1的胶体金试纸，包括支撑垫1，硝酸纤维素膜2，偶合物垫片3，吸水垫4和样品垫7；所述硝酸纤维素膜2位于所述支撑垫1上，所述硝酸纤维素膜2一端上方连接吸水垫4，另一端上方连接偶合物...; 汤新刘刚; 文献传递

一种基于核磁共振技术提高黑曲霉α-葡萄糖苷酶活力的方法: 本发明公开了一种提高黑曲霉α‑葡萄糖苷酶活力的方法，属于生物工程领域。本发明通过核磁共振技术来筛选影响黑曲霉生产α‑葡萄糖苷酶的一种或多种代谢物，建立所述代谢物与黑曲霉α‑葡萄糖苷酶活力的关联，以此调节黑曲霉的发酵培养液...; 李晓帆周慧余少文胡萍汤新; 文献传递

木质素过氧化物酶lipH8基因的克隆及在里氏木霉QM9414中的表达: 在白腐真菌中发现的木质素过氧化物酶(Lignin Peroxidase,LiP,EC 1.11.1.13)是一种含Fe、卟啉环和血红素(Heme)辅基的同工酶,对底物无特异性要求。当有H0时可氧化分解芳环多聚体,催化木质...; 余少文曾敏王亚玲汤新刘刚; 关键词：木质素过氧化物酶里氏木霉木质素降解; 文献传递

一种α‑葡萄糖苷酶基因敲除的黑曲霉菌株及其应用: 本发明提供了一种α‑葡萄糖苷酶基因敲除的黑曲霉菌株和α‑葡萄糖苷酶基因敲除在提高黑曲霉糖化酶酶活中的应用。本发明还提供了一种提高黑曲霉糖化酶酶活的方法和一种制备α‑葡萄糖苷酶基因敲除的黑曲霉菌株的方法。; 余少文杨丽娟胡萍谢宁汤新; 文献传递

里氏木霉内切葡萄糖苷酶Ⅳ在毕赤酵母中的表达被引量：30: 2005年; 进行了内切葡萄糖苷酶Ⅳ(EGⅣ)在毕赤酵母(Pichia pastoris)表达系统中的表达。采用RT-PCR的方法从里氏木霉(Trichoderma reesei)中分离到eg4基因。将eg4基因与毕赤酵母表达载体pPICZαA连接,得到重组质粒pPICZαA-eg4。将该重组质粒线性化后转化毕赤酵母GS115,eg4基因通过同源重组被整合到毕赤酵母的染色体上,并处于酵母α因子的下游,得到重组菌株P.pastoris-EGⅣ1。在甲醇诱导下,重组菌株P.pastoris-EGⅣ1可以合成并分泌EGⅣ,培养液的CMC活力达到2.11 U/mL。; 汤新刘刚田生礼张煜邢苗; 关键词：纤维素酶里氏木霉毕赤酵母

血红蛋白基因在产CBHⅡ毕赤酵母工程菌中的表达被引量：2: 2007年; 目的:提高毕赤酵母工程菌P.pastoris-CBHⅡ液体发酵产纤维二糖水解酶(CBHⅡ)的能力。方法:分别构建了用于胞外及胞内表达透明颤菌血红蛋白(VHb)基因的毕赤酵母重组表达质粒pPICZαA-vhb与pPICZαA(-s)-vhb。通过电转化将两种质粒转化巴氏毕赤酵母重组菌体P.pastoris-CBHⅡ菌株,经过筛选分别获得可正确表达具有生物活性的VHb蛋白的重组菌株P.pastoris-CBHⅡ-vhb(胞内表达VHb)及P.pastoris-CBHⅡ-vhb(-s)(胞外表达VHb)。结果:摇瓶发酵实验表明,血红蛋白在贫氧条件下可促进CBHⅡ的分泌表达,培养液上清的CMC酶活分别从出发菌株P.pastoris-CBHⅡ的1.81U/ml提高到2.04U/ml(胞内表达VHb)与1.93U/ml(胞外表达VHb)。VHb蛋白胞内表达菌株比胞外表达菌株效果更明显。; 余河斌余少文汤新张煜邢苗; 关键词：纤维二糖水解酶透明颤菌血红蛋白胞内表达分泌表达毕赤酵母

一种提高头孢菌素C酰化酶活性的方法: 本发明提供了一种提高头孢菌素C酰化酶活性的方法及其应用，所述方法包括制备卡那霉素抗性基因和ptsG基因双缺陷型的大肠杆菌菌株；将携带头孢菌素C酰化酶基因的表达载体转化所述大肠杆菌菌株，获得转化子；培养并诱导所述转化子表达...; 余少文蒙秋平谢宁胡萍潘庆汤新; 文献传递

一种CPC酰化酶重组表达系统的构建与应用: 本发明公开了一种经密码子优化的CPC酰化酶基因，含有所述基因的表达载体和宿主菌，以及由所述CPC酰化酶基因翻译获得的氨基酸序列。本发明利用基因工程的方法构建了稳定表达CPC酰化酶的大肠杆菌表达系统，并进一步通过对培养基的...; 余少文孙勇汤新胡萍; 文献传递

里氏木霉纤维二糖水解酶Ⅱ在毕赤酵母中的高效表达被引量：32: 2005年; 本工作采用巴氏毕赤酵母Pichiapastoris表达系统进行了里氏木霉Trichodermareesei纤维二糖水解酶Ⅱ(CellobiohydrolaseII)的表达。用RT-PCR的方法从经稻草粉诱导的里氏木霉培养物中分离出纤维二糖水解酶Ⅱ的基因,将其插入到巴氏毕赤酵母的表达载体pPICZαA中,并使之处于α-因子信号肽序列的下游,得到重组质粒pPICZαA-cbh2。通过电穿孔的方法用线性化的pPICZαA-cbh2转化巴氏毕赤酵母GS115菌株,经过大量筛选后得到可以高效表达纤维二糖水解酶的毕赤酵母菌株P.pastorisCBHⅡ1。在甲醇诱导的条件下培养P.pastorisCBHⅡ1,培养液中的CMC活性可达到3.82U/mL,SDS-PAGE分析结果表明纤维二糖水解酶在P.pastorisCBHⅡ1中的表达量远远高于里氏木霉。对表达产物进行了LC-MS分析,结果表明所表达的蛋白为里氏木霉的纤维二糖水解酶。; 张煜刘刚余少文汤新邢苗; 关键词：纤维素酶液质联用羧甲基纤维素

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