王伟章
- 作品数：33 被引量：117H指数：7
- 供职机构：广东药科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省医学科学技术研究基金广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学化学工程更多>>
- Chk1基因沉默增强姜黄素诱导肝癌细胞Huh7凋亡的敏感性被引量：6
- 2010年
- 背景与目的:Chk1和Chk2有望成为肿瘤放化疗增敏的新靶点,然而,Chk1/2能否作为姜黄素治疗肿瘤的增敏靶点却很少有研究报道。本研究旨在探讨Chk1/2小干扰RNA(siRNA)对姜黄素诱导肝癌细胞Huh7凋亡的影响,评价其作为姜黄素治疗肝癌增敏靶点的有效性。方法:Western blot方法检测姜黄素对肝癌细胞Huh7中细胞周期检测点信号通路蛋白的影响;RT-PCR和Western blot方法检测Chk1/2siRNA对Chk1/2mRNA和蛋白的沉默效果;DAPI核染色法分别检测Chk1/2siRNA抑制Chk1/2表达后姜黄素诱导Huh7细胞凋亡的情况;流式细胞术检测Chk1/2表达被沉默后姜黄素对Huh7细胞周期的影响。结果:姜黄素明显抑制细胞周期检测点信号通路蛋白Chk1(S317),Cdc25C(S216)和Cdk1(Y15)蛋白的磷酸化水平;与si-NC转染组相比,Chk1/2siRNA使细胞中Chkl和Chk2mRNA水平分别下降了95%和60%,蛋白水平分别下降了92%和55%(P<0.01);抑制Chk1使姜黄素诱导的细胞凋亡率由(21.3±1.8)%上升到(29.5±2.6)%(P<0.05),抑制Chk2并无此作用;Chk1/2siRNA对姜黄素处理后的Huh7细胞周期均无明显影响。结论:Chk1siRNA能有效提高姜黄素诱导Huh7细胞的凋亡率,提示Chk1可能作为姜黄素治疗肝癌的有效增敏靶点。
- 王伟章金小宝毛建文郑敏
- 关键词：姜黄素凋亡敏感性
- miR-21在调控CML干细胞对格列卫原发性耐药的研究方法
- 本发明公开了一种本发明的miR-21在调控CML干细胞对格列卫原发性耐药的研究方法，包括以下步骤：(1)miRNAs在健康人HSC和慢性期CML病人LSC中的差异表达研究；(2)miR-21在调控LSC对IM原发性耐药中...
- 王伟章金小宝
- 文献传递
- 一种人源EZH2条件性过表达的慢性髓系白血病小鼠模型的构建方法
- 本发明属于疾病模型构建技术领域，具体涉及一种人源EZH2条件性过表达的慢性髓系白血病小鼠模型的构建方法。本发明构建的人源EZH2条件性过表达的慢性髓系白血病小鼠模型，通过一系列的杂交、繁育过程最终获得Lyz2‑creER...
- 王伟章王秋棵张文翊涂传明
- 鬼臼苦素抗Ph^+急性淋巴细胞白血病细胞Sup-B15的作用及其机制被引量：3
- 2017年
- 目的探讨鬼臼苦素(picropodophyllin,PPP)对Ph^+急性淋巴细胞白血病(Ph^+ALL)细胞Sup-B15的作用及其分子调控机制,为将PPP开发成为治疗Ph^+ALL药物提供理论依据。方法 MTS法检测PPP和格列卫(IM)对Sup-B15细胞增殖的影响;流式细胞术检测PPP和IM对Sup-B15细胞周期的影响;Western blot检测PPP对细胞增殖和周期相关蛋白表达,以及对IGF1R蛋白磷酸化和表达的影响。结果PPP和IM均呈时间和剂量依赖性关系抑制Sup-B15细胞的增殖,且相同剂量下PPP对细胞增殖的抑制作用均强于IM;PPP处理细胞12 h和24 h后G2/M期细胞比例显著升高,而S期细胞比例则相应减少;PPP能够上调p53和cyclin B1蛋白的表达以及抑制p21和c-myc蛋白的表达,但对IGF1R总蛋白表达水平和磷酸化水平均无明显影响。结论 PPP能有效抑制Sup-B15细胞增殖和诱导细胞发生G2/M期阻滞,其机制与上调p53和cyclin B1蛋白表达以及抑制p21和c-myc蛋白表达相关。
- 陈永恒廖芬芳程琳侯宇王伟章
- 依托泊苷对伊马替尼体内清除慢性髓性白血病干细胞的作用研究被引量：2
- 2021年
- 目的:探讨依托泊苷(ETO)对伊马替尼体内清除慢性髓性白血病干细胞的作用。方法:以SCL-t TA/BCRABL小鼠为慢性髓性白血病动物模型,采用流式细胞术检测ETO单独或联合伊马替尼治疗慢性髓性白血病小鼠和正常FVB小鼠后,对小鼠骨髓和脾脏中白血病干细胞和外周血中性粒细胞数目的影响。结果:ETO和伊马替尼联合治疗后,SCL-t TA/BCR-ABL小鼠骨髓白血病干细胞数及比例、外周血中性粒细胞比例均明显下降,且下降的程度比两者单用更显著。在野生型FVB小鼠中,ETO和伊马替尼联合治疗对骨髓Lin-Sca1^(+)c-kit^(+)细胞数和比例、脾脏中性粒细胞比例无明显影响。结论:ETO在体内具有选择性增强伊马替尼靶向清除慢性髓性白血病干细胞的作用。
- 陈向洁吴清清吴清清刘漫宇
- 关键词：依托泊苷伊马替尼慢性髓性白血病白血病干细胞
- 姜黄素激活线粒体凋亡通路诱导肝癌细胞Huh7凋亡被引量：9
- 2010年
- 目的观察姜黄素对肝癌细胞Huh7中Bcl-2家族成员表达,cytochromec胞内定位以及caspase-3活化的影响,探讨姜黄素诱导肝癌细胞凋亡的分子机制。方法Western blotting分析姜黄素处理Huh7细胞后Bcl-2、Bcl-xL、Bad、Bid、Beclin、Bag-1和caspase-3蛋白表达的变化;间接免疫荧光技术观察在姜黄素干预后Bad和cytochromec蛋白的定位及变化。结果25μmol/L的姜黄素明显上调Huh7细胞中Bad的表达水平,但是对Bcl-2、Bcl-xL、Bid、Beclin和Bag-1的表达并无显著影响。同时,姜黄素能够促使cytochromec从线粒体释放至胞浆中,以及诱导caspase-3的活化。结论姜黄素通过激活线粒体凋亡通路诱导肝癌细胞Huh7凋亡。
- 王伟章毛建文郑敏陈宏远
- 关键词：姜黄素肝癌细胞
- 姜黄素和穿心莲内酯对鼻咽癌细胞CNE-2的作用及机制被引量：2
- 2015年
- 目的研究姜黄素和穿心莲内酯对人鼻咽癌细胞CNE-2体外抗癌的联合作用,并探讨其可能抗癌分子机制。方法 MTS法检测穿心莲内酯(Andro)单独作用以及与姜黄素(Cur)的联合作用(DMSO、Andro 5.0μmol/L、Andro 10.0μmol/L、Cur 10.0μmol/L、Andro 5.0μmol/L+Cur 10.0μmol/L、Andro 10.0μmol/L+Cur 10.0μmol/L)对不同肿瘤细胞增殖的影响;流式细胞术分析姜黄素和穿心莲内酯联合作用对CNE-2和He La细胞周期影响;Wes-tern blot分析姜黄素和穿心莲内酯联合作用对CNE-2细胞的NF-κB家族相关蛋白P50和P65蛋白的表达。结果穿心莲内酯单独作用时在10μmol/L以下浓度对各肿瘤细胞无显著抑制作用,而10μmol/L姜黄素联合穿心莲内酯处理CNE-2和He La细胞48 h能使细胞存活率显著降低以及使细胞发生明显的G2/M期阻滞;Western blot结果显示两者联合作用能够协同抑制NF-κB家族相关蛋白P50和P65以及NF-κB调控蛋白c-Myc的表达。结论姜黄素和穿心莲内酯协同作用于NF-κB信号通路发挥抗肿瘤作用。
- 吴清清陈永恒廖芬芳王伟章
- 关键词：姜黄素穿心莲内酯CNE-2NF-ΚB
- 鸡胚石蜡组织切片免疫组化中的问题探讨及方法改进
- 2009年
- 目的总结鸡胚组织免疫组织化学染色中的操作经验。方法应用常规免疫组化方法对不同发育时期的鸡胚石蜡组织切片进行免疫组化染色。结果免疫组化的方法检测早期鸡胚发育中的相关抗体的表达定位准确,背景清晰。结论注意鸡胚免疫组化的操作要点,有助于提高鸡胚组织的免疫组化染色质量。
- 郑敏毛建文王伟章李明李红枝王丽京
- 关键词：鸡胚HE染色免疫组织化学
- 基于GFP/SCL-tTA/Bcr-abl转基因小鼠建立CML嵌合小鼠模型
- 2016年
- 目的建立慢性粒细胞白血病(CML)的转基因嵌合小鼠模型,为靶向白血病干细胞(LSCs)治疗CML的研究提供良好的动物模型。方法将Bcr-abl转基因小鼠与SCL-t TA转基因小鼠进行杂交,子代小鼠再与GFP转基因小鼠杂交,PCR鉴定Bcr-abl、t TA和GFP基因三阳性的小鼠(GFP/SCL-t TA/Bcr-abl小鼠)。通过诱导GFP/SCL-t TA/Bcr-abl小鼠Bcr-abl基因表达4周后,取其骨髓白细胞移植至经致死剂量(900 c Gy)辐照的FVB/N野生型小鼠。移植3周后,采用Western blotting检测Bcr-abl蛋白表达,流式细胞术检测小鼠外周血GFP+中性粒细胞的比例以及脾脏和骨髓GFP+LSCs的比例。结果 PCR结果显示,GFP/SCL-t TA/Bcr-abl小鼠骨髓细胞成功植入FVB/N受体小鼠;Western blotting检测结果显示,移植小鼠的骨髓细胞中表达Bcr-abl蛋白;流式细胞术结果显示,移植小鼠的外周血GFP+中性粒细胞比例以及脾脏和骨髓GFP+LSCs的比例明显升高。结论成功建立了GFP/SCL-t TA/Bcr-abl转基因CML嵌合小鼠模型。
- 廖芬芳陈永恒吴清清程琳周晓明王伟章
- 关键词：慢性粒细胞白血病转基因小鼠BCR-ABL
- 新型铋(Ⅲ)卟啉配合物的合成、表征及其与小牛胸腺DNA相互作用的初步研究被引量：3
- 2011年
- 目的合成1个新型铋卟啉配合物,并对其与小牛胸腺DNA(CT-DNA)的相互进行初步研究。方法以5-(3′-吡啶基)-10,15,20-三甲氧苯基卟啉(MPyTMOPP)和硝酸铋为原料制备新型铋(Ⅲ)卟啉配合物B i(MPyTMOPP)NO3,采用元素分析、1H-核磁共振、电喷雾质谱、红外光谱和紫外光谱对化合物进行表征,采用紫外-可见光谱、荧光光谱、圆二色谱、热变性实验和黏度实验系统研究B i(MPyTMOPP)NO3与小牛胸腺DNA(CT-DNA)的相互作用。结果 B i(MPyTMOPP)NO3的电喷雾质谱(ESI-MS)图上在912.47出现1个归属于[M+H]+的分子离子峰,实验结果与理论计算值一致;紫外-可见光谱研究表明,B i(MPyTMOPP)NO3的特征Soret带出现较小的减色率和红移(13.7%和3 nm),结合常数为8.6×103L/mol;CT-DNA的圆二色谱在B i(MPyTMOPP)NO3的Soret区域出现1个正的诱导信号;B i(MPyTMOPP)NO3使CT-DNA的熔解温度升高2.1℃;随着B i(MPyTMOPP)NO3的浓度不断升高,CT-DNA的相对黏度基本不变。结论 B i(MPyTMOPP)NO3能够与CT-DNA发生作用,并且以外部沟面结合方式与CT-DNA结合。
- 尹鹏梅文杰王伟章王淇孙福强王成蹊贺丽敏
- 关键词：小牛胸腺DNA相互作用
