王明宇
- 作品数：7 被引量：20H指数：2
- 供职机构：吉林大学第一医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家教育部博士点基金吉林省科技发展计划基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 脑脉泰对慢性脑缺血致血管性痴呆大鼠脑血流量及海马神经元凋亡的影响被引量：6
- 2009年
- 目的研究慢性脑缺血致血管性痴呆大鼠海马区局部脑血流量(rCBF)改变及细胞凋亡情况,探讨脑脉泰治疗血管性痴呆的疗效及可能机制。方法采用双侧颈总动脉永久结扎法(2VO)制备慢性脑缺血致血管性痴呆的动物模型,随机分为假手术对照组(12只)、模型对照组(12只)、给药组(脑脉泰)(12只)。手术后4周,HE染色观察神经元形态学改变,免疫组化染色检测海马区Caspase-3、bax蛋白表达变化。应用激光多普勒血流仪检测各组大鼠海马局部脑血流量。结果模型对照组大鼠海马Caspase-3、Bax阳性细胞灰度平均值低于假手术对照组、给药组,差异均具有显著性(P<0.05);模型对照组海马rCBF低于假手术对照组、给药组,差异均具有显著性(P<0.05)。结论VaD模型大鼠海马rCBF下降,海马神经细胞凋亡增加;脑脉泰能增加实验大鼠海马局部脑血流量,抑制海马神经细胞凋亡。
- 张海宁孙莉汤跃宇王明宇吴江
- 关键词：脑脉泰凋亡局部脑血流量
- 慢性前脑缺血致血管性痴呆大鼠神经元超微结构的经时变化被引量：11
- 2009年
- 目的观察慢性前脑缺血致血管性痴呆大鼠额叶皮层、海马神经元不同时间点的超微结构改变。方法采用双侧颈总动脉永久结扎方法(2VO)制备慢性前脑缺血动物模型,于术后不同时间点(1月、2月、3月、4月)电镜观察额叶皮层、海马区结构改变。结果额叶皮层:1月时见额叶皮层大量脂褐素,2月有所下降,后与假手术对照组相仿,暗神经元则在2月时最多,后下降;海马区神经元胞质溶酶体逐渐增多,术后3月时暗神经元大量增多,并且出现大量脂褐素,术后4月神经元出现固缩。结论电镜下脂褐素和暗神经元的改变提示慢性脑缺血初期脑损伤是可逆的,电镜下1个月或更早可能是可逆损伤的转折点。
- 张海宁吴江孙莉王明宇汤跃宇
- 关键词：脑缺血慢性超微结构
- Aβ结合乙醇脱氢酶与阿尔茨海默病被引量：1
- 2011年
- 近年来,线粒体功能障碍（Mitochondrial dysfunction）对包括阿尔茨海默病（Alzheimer disease,AD）在内的中枢神经系统退行性疾病的影响日益引起科研人员的关注。Aβ结合乙醇脱氢酶（Aβ binding alcohol dehydrogenase，ABAD）是一种能与β-淀粉样肽（β-amyloid peptide，Aβ）特异性结合的线粒体酶，诸多的研究结果显示ABAD与AD的发生、发展有着密切关系，本文就其研究进展综述如下。
- 王明宇杨宇吴江
- 关键词：阿尔茨海默病乙醇脱氢酶AΒ中枢神经系统退行性疾病线粒体功能障碍Β-淀粉样肽
- 分泌表达Aβ阻断肽的重组腺相关病毒的构建
- 2012年
- 目的构建可稳定分泌表达ABAD-DP的重组腺相关病毒系统,并在细胞水平研究它与Aβ42的结合能力。方法应用分子克隆技术构建含有融合基因NT4-TAT-6His-ABAD-DP(NTA)的腺相关病毒载体。应用磷酸钙共沉淀法进行病毒包装。应用免疫细胞化学方法检测重组病毒在Hela细胞中的表达。应用免疫荧光技术检测重组病毒与Aβ42在Hela细胞中的结合作用。结果 pGEM-T Easy/ABAD-DP经EcoR I酶切后,可以得到96bp的目的片段,ABAD-DP基因经DNA测序证实与GenBank序列一致;重组质粒pSSGH/NTA经EcoRⅠ与BamHⅠ联合酶切,可以得到384bp的目的片段;成功获得滴度为3.01×109PFU/ml的重组病毒;含有6×His标签的重组病毒在Hela细胞中实现表达;通过免疫荧光技术,可以分别观察到重组病毒组、Aβ42组和重组病毒+Aβ42组的绿色、红色和黄色荧光。结论成功获得能够稳定表达ABAD-DP并能够在细胞内与Aβ42结合的重组腺相关病毒,为阿尔茨海默病的治疗提供新的思路。
- 王明宇杨宇吴江王旭车丽赫孙欣杨弋
- 关键词：基因克隆
- 原发性进行性失语综合征
- 患者,男性,汉族,76岁,右利手,曾在某国有大型企业担任领导职务,因渐进性言语障碍5年于2008年2月在我院住院治疗。该患5年前被发现言语功能减退,最初表现为言语欠流利,之后出现找词困难,继而只能说出单个字词,呈爆破样语...
- 王明宇孟红梅吴江张昱
- 文献传递
- 抗Aβ42细胞内抗体TAT-6His-mAbA/B的构建
- 2011年
- 目的构建能够在细胞内特异性拮抗Aβ42的小分子细胞内抗体TAT-6His-mAbA/B,为细胞内抗体技术用于AD的诊断和治疗提供新依据。方法根据GenBank提供的Aβ42单克隆抗体的已知序列,选取重链和轻链可变区(CDR1和CDR3)进行偶联,应用DNASIS计算机软件设计引物,通过两次PCR获得目的片段mAbA/B。将目的片段与pGEM-Teasy载体相连,限制性内切酶酶切鉴定重组质粒,Sanger单链末端终止法测出克隆的核苷酸序列。结果限制性内切酶EcoR I酶切pGEM-TEasy/mAbA/B,可见132bp或141bp的目的片段,与理论值一致;DNASIS软件分析测序结果与GenBank所报道的结果完全一致。限制性内切酶PamHI和BamH I联合酶切pssHG-CMV/TAT-6His-mAbA/B,琼脂糖凝胶电泳鉴定重组质粒,得到大小约为400bp的融合基因TAT-6His-mAbA/B目的片段,与理论值一致。结论通过PCR方法成功克隆了Aβ42小分子细胞内抗体TAT-6His-mAbA/B片段。
- 车丽赫吴江杨弋李超王明宇王旭杨广笑王全颖孙欣杨宇
- 关键词：阿尔茨海默病细胞内抗体SCFVAΒ
- Aβ阻断肽适配子TRX1-ABAD-DP-TRX2融合基因的克隆及表达被引量：2
- 2012年
- 目的 将Aβ阻断肽（ABAD-DP） cDNA插入人硫氧化还原蛋白（hTRX）的活化位点,克隆融合基因TRX1-ABAD-DP-TRX2 （T-A-T） cDNA,为基因治疗阿尔茨海默病奠定基础.方法 通过PCR获得目的片段TRX1、TRX2、ABAD-DP,进一步将上述3目的片段按既定顺序插入腺相关病毒穿梭质粒pSSHG-CMV的多克隆位点,从而获得融合基因TRX1 -ABAD-DP-TRX2.经PEI介导Hela细胞包装重组腺相关病毒rAAV/T-A-T.感染NIH-3T3细胞,通过荧光免疫组织化学染色检测融合基因的表达及其与Aβ42的定位.结果 酶切后得到TRX1 -ABAD-DP-TRX2融合基因片段的大小约为435 bp,与理论值一致.荧光免疫组织化学染色检测到融合基因的表达,且共定位组T-A-T和Aβ42均位于NIH-3T3细胞胞质内.结论 成功克隆及表达了Aβ阻断肽适配子TRX1-ABAD-DP-TRX2融合基因,为进一步将阻断肽用于基因治疗阿尔茨海默病提供了基础.
- 王旭吴江杨弋王明宇车丽赫杨宇
- 关键词：融合基因
