田海泉
- 作品数：4 被引量：7H指数：1
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- 细胞密度对髓核细胞产生蛋白聚糖影响的体外实验被引量：1
- 2009年
- 背景:退变的椎间盘组织一个重要改变是聚集蛋白聚糖明显减少,如何能够刺激髓核细胞产生更多的蛋白聚糖是学者们一直探索的问题。目的:将椎间盘髓核细胞以不同的密度植入凝胶材料中,评价细胞密度对蛋白聚糖含量的影响。设计、时间及地点:对比观察实验,于2007-08/2008-02在解放军北京军区总医院骨科实验室完成。材料:清洁级3月龄日本大耳兔3只。Live/DeadAssaykit,sGAGAssaykit试剂盒由北京纵横洋洲医药生物科技有限公司提供。方法:无菌条件下取兔椎间盘,常规分离消化其髓核细胞,传第2代时以1.0×109L-1密度接种在自制的壳聚糖支架中,细胞密度扩增至4×109L-1和25×109L-1时进行检测。主要观察指标:阿利辛蓝法测蛋白聚糖含量。氪氩激光器共聚焦显微镜下观察培养细胞存活情况。结果:培养14d,细胞密度为4×109L-1时,聚集的蛋白聚糖总量为(551.65±70.10)mg/L,当细胞密度增加到25×109L-1时,聚集蛋白聚糖总量为(2245.28±462.52)mg/L。但蛋白聚糖增加的量和细胞密度并不成比例,细胞密度增加了6倍,蛋白聚糖含量只增加了两三倍。低密度培养7d时,结果显示100%的细胞存活。高密度培养7d时,30%的细胞在材料中央死亡,边缘部位的细胞几乎全部存活。结论:体外三维培养髓核细胞产生的蛋白聚糖随种植细胞密度增加而缓慢增加,高细胞密度对蛋白聚糖聚集有限制作用。
- 田海泉李放
- 关键词：细胞密度蛋白聚糖
- 壳聚糖-藻酸盐复合凝胶作为髓核组织工程支架的体外实验研究
- 研究背景：
腰痛是现代化社会中一种常见的症状，是导致劳动力丧失的主要原因之一，腰椎间盘突出症等椎间盘退行性疾病(DDD)是引起腰痛最常见的原因。伴随人体的老化，椎间盘也相应发生退行性改变，外科治疗方法如椎间盘切...
- 田海泉
- 关键词：壳聚糖藻酸盐腰椎间盘突出症
- 文献传递
- 体外三维支架诱导脂肪干细胞向髓核样细胞的分化被引量：5
- 2009年
- 背景:髓核组织工程被认为是椎间盘退变修复的理想方法,种子细胞是髓核组织工程的关键因素,但髓核细胞来源有限。目的:探讨兔脂肪干细胞在体外三维支架诱导培养条件下能否向髓核样细胞分化。设计、时间及地点:细胞-支架学体外观察,于2008-07/12在解放军北京军区总医院全军骨科研究所完成。材料:清洁级3月龄日本大耳兔3只,由北京实验动物技术有限公司提供。医用级壳聚糖为浙江金壳生物化学公司产品。方法:无菌条件下切取兔皮下脂肪组织,胶原酶消化法分离培养兔脂肪干细胞。取传至第2代细胞制成细胞悬液50μL(5×106个细胞),与150μL壳聚糖-藻酸盐复合物混合,置入12孔板,室温下20min左右形成凝胶状。设立3组,对照组仅添加含体积分数为10%胎牛血清的DMEM高糖培养液2mL;低氧诱导组、正常氧气诱导组均加入含牛血清白蛋白、转化生长因子β1、地塞米松、维生素C、BMP-7、1%ITS-plus、体积分数为10%胎牛血清的DMEM液,然后分别通气体积分数为2%的O2和20%的O2。各组置入37℃、体积分数为5%的CO2饱和湿度培养箱中培养21d。主要观察指标:组织形态学观察,蛋白多糖水平,Ⅱ型胶原水平。结果:扫描电镜显示细胞在支架内正常黏附,细胞绒毛清晰可见,生长状态良好,番红O染色与阿利辛蓝染色均呈阳性,产生较多的蛋白多糖。随时间延长,对照组脂肪干细胞产生的蛋白多糖、Ⅱ型胶原水平均无明显变化;低氧诱导组、正常氧气诱导组脂肪干细胞产生的蛋白多糖、Ⅱ型胶原水平均显著增加,与对照组比较差异有显著性意义(P<0.001,P<0.05);且低氧诱导组产生蛋白多糖、Ⅱ型胶原水平均多于正常氧气诱导组(P<0.05,P<0.01)。结论:在适当的诱导条件下,兔脂肪干细胞在壳聚糖-藻酸盐凝胶支架中可以向髓核样细胞分化,产生与髓核组织相同的细胞外基质,且低氧状态下诱导效果较好�
- 田海泉李放
- 关键词：脂肪干细胞髓核
- 生长因子在椎间盘退行性变组织修复重建中的意义被引量：1
- 2008年
- 目前学术界倾向将生物疗法应用于椎间盘退行性变,分子生物学和细胞培养技术的进步使研究者发现各种生长因子在椎间盘退行性变修复中的重要作用。生长因子在椎间盘组织代谢中所起的作用已有广泛研究,近来又有运用动物椎间盘退行性变模型,直接将生长因子注入椎间盘内逆转其退行性变的研究。文章详细介绍了各种生长因子如转化生长因子、骨形态发生蛋白、胰岛素样生长因子等在椎间盘退行性变修复过程中的应用情况。体内和体外研究均显示了在修复退行性变椎间盘过程中运用生长因子是一个非常有潜力的策略。
- 田海泉李放
- 关键词：椎间盘
