祁光宇
- 作品数:26 被引量:55H指数:4
- 供职机构:中国农业科学院兰州兽医研究所更多>>
- 发文基金:甘肃省科技厅资助项目国家科技支撑计划甘肃省科技重大专项计划更多>>
- 相关领域:农业科学医药卫生生物学电子电信更多>>
- O型口蹄疫抗体水平检测试纸及制备方法
- 本发明涉及一种用于对偶蹄类动物O型口蹄疫抗体水平进行快速检测的胶体金试纸条,这种试纸条的制备,以及其具体检测的方法。试纸条的底板上固定有多孔纤维材料构成的加样吸收垫、位于加样吸收垫尾端并与加样吸收垫相连的免疫金标层、和由...
- 蒋韬梁仲王超英杨亚民刘西兰陈涓张军翟国元才学鹏卫广森刘湘涛刘在新任维维智晓莹祁光宇
- 文献传递
- 检测O型口蹄疫病毒的胶体金免疫层析法的建立
- 目的:建立一种快速、简便的检测O型口蹄疫病毒(FMDV)的胶体金免疫层析法(GICA)。方法:采用柠檬酸三钠-鞣酸还原法制备胶体金颗粒,标记纯化的标准株O型口蹄疫抗体。将纯化的口蹄疫流行株O/China99抗体和羊抗豚鼠...
- 祁光宇智晓莹任维维黄银军牟克斌刘学荣王宇蒋韬
- 关键词:O型口蹄疫病毒胶体金免疫层析法
- 文献传递
- 微生物添加剂的研究进展
- 2010年
- 微生物添加剂作为无毒、无污染生物制品类饲料添加剂,在调节动物机体微生态平衡、预防疾病、提高饲料转化率、促进动物健康和保护生态环境等方面有着其它抗生素类添加剂不可替代的作用,而且随着对其作用机理研究的深入,应用效果的进一步凸显,应用也越来越广泛。本文对微生物添加剂的概念、种类、国内外研究和应用概况及应用前景进行了综述。
- 祁光宇王宇李娟
- 关键词:微生物添加剂
- 口蹄疫病毒通用型金标检测试纸条诊断方法的建立被引量:4
- 2012年
- 为了兽医基层工作人员能够快速诊断口蹄疫病原,与其他传染病做鉴别诊断,有必要建立一种快速、简便区分它们的胶体金免疫层析方法。本试验采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金。将纯化的Asia 1/China/05流行毒株12S偶联抗原的兔抗体制备免疫胶体金,喷免疫胶体金于玻璃纤维制成金标垫。将纯化A/AF72流行株12S偶联抗原的兔抗体和适量O/China/99流行毒株12S偶联抗原的兔抗体混合固定于硝酸纤维素膜上作为检测带。将羊抗兔抗体固定在硝酸纤维素膜的不同区域作为质控带,并组装成口蹄疫病毒通用型金标检测试纸条。利用其对阴性参考样品、各型阳性参考样品、已知背景的田间样品进行检测。灵敏度试验结果显示:建立的试纸条方法敏感性高、可检测到病毒最低含量为0.98×104 LD50;特异性试验显示:在检测与口蹄疫临床症状相似病原———猪水泡病病毒(SVDV)、水泡性口炎(VS)、水泡性疹(VES)抗原时无交叉反应;重复性试验显示:不同批次间、同一批次内检测结果完全一致;符合性试验显示:检测国家口蹄疫参考实验室已确定口蹄疫病毒血清型的样品90份,阳性符合率、阴性符合率分别为96.70%、100%。本试验研发的口蹄疫病毒通用型金标检测试纸条具有很好的灵敏度、特异性、重复性和符合性,适合国内流行的口蹄疫病原的鉴别诊断。
- 任维维梁仲智晓莹祁光宇刘湘涛才学鹏蒋韬
- 关键词:口蹄疫病毒偶联通用型
- O型口蹄疫抗体金标检测试纸条判定标准的确立被引量:3
- 2012年
- 本试验旨在迅速、准确检测口蹄疫阴性血清和阳性血清,确立O型口蹄疫抗体金标检测试纸条的判定标准。通过3批次O型口蹄疫抗体金标检测试纸条,对180份猪、牛、羊口蹄疫阴性血清,197份猪、牛O型口蹄疫弱阳性血清,317份猪、牛、羊O型口蹄疫阳性血清,223份牛Asia 1、A型口蹄疫阳性血清,600份田间血清样品进行检测,同时用O型口蹄疫液相阻断ELISA和O型口蹄疫正向间接血凝2种方法检测相同的血清样品。对3种方法检测的结果进行分析,并且将试纸条的检测线和质控线的显色情况与O型口蹄疫液相阻断ELISA的抗体滴度相比较。确立了试纸条的诊断标准:试纸条抗体滴度1∶2-为口蹄疫抗体阴性;试纸条抗体滴度1∶8+为O型口蹄疫阳性血清。根据试纸条的显色结果与液相阻断ELISA的结果的关系,绘制了比色卡。试纸条的判定标准检测血清结果与液相阻断ELISA和正向间接血凝结果分别进行统计学分析,试纸条与液相阻断ELISA和正向间接血凝相关性分别为y=1.142x+0.7421,y=1.1845x+0.8623;相关系数(r)分别为0.9221和0.9033。结果显示,O型口蹄疫抗体金标检测试纸条的判定标准的确立和比色卡的绘制,实现半定量分析,更加迅速、准确,适于实验室、基层兽医站和养殖场使用。
- 智晓莹任维维祁光宇吕建亮梁仲蒋韬
- 两种方法制备胶体金及其免疫标记的比较研究
- :寻找一种适合口蹄疫Asia Ⅰ抗体标记的胶体金。方法:采用柠檬酸三钠和柠檬酸三钠-鞣酸法分别还原成氯金酸溶液,制备纳米胶体金,并分别对制得的胶体金粒子大小、粒径分布情况、稳定性及微观形貌进行了分析,同时进行口蹄疫抗体标...
- 祁光宇智晓莹任维维黄银军牟克斌刘学荣王宇蒋韬
- O型口蹄疫抗体水平检测试纸及制备方法
- 本发明涉及一种用于对偶蹄类动物O型口蹄疫抗体水平进行快速检测的胶体金试纸条,这种试纸条的制备,以及其具体检测的方法。试纸条的底板上固定有多孔纤维材料构成的加样吸收垫、位于加样吸收垫尾端并与加样吸收垫相连的免疫金标层、和由...
- 蒋韬梁仲王超英杨亚民刘西兰陈涓张军翟国元才学鹏卫广森刘湘涛刘在新任维维智晓莹祁光宇
- 文献传递
- 两种方法制备胶体金及其免疫标记的比较研究
- 2013年
- 为寻找-种适合口蹄疫Asia I抗体标记的胶体金,本研究采用柠檬酸三钠和柠檬酸三钠-鞣酸法分别还原氯金酸溶液,制备纳米胶体金,并分别对制得的胶体金粒子大小、粒径分布情况、稳定性及微观形貌进行了分析,同时进行口蹄疫抗体标记。结果显示,柠檬酸三钠-鞣酸法制备纳米胶体金适合口蹄疫AsiaI抗体的标记,柠檬酸三钠-鞣酸法制备胶体金较稳定.标记的试纸条灵敏度耍高于柠檬酸三钠法。
- 张晓慈杨孝朴祁光宇
- 关键词:胶体金免疫层析
- Asia 1型口蹄疫病毒免疫胶体金快速检测方法的建立
- 一种灵敏度高、特异性好的能够快速检测猪、牛等偶蹄动物Asia 1型口蹄疫病毒的免疫胶体金侧向层析方法(GICA)。制备胶体金,标记纯化的Asia 1型口蹄疫抗体,喷于玻璃纤维膜上制备成金标垫;将纯化的Asia 1型口蹄疫...
- 智晓莹祁光宇任维维刘学荣牟克斌黄银君蒋韬
- 文献传递
- 猪流行性腹泻病毒HB2015分离株N基因表达及单克隆抗体的制备被引量:5
- 2018年
- 根据已经发表的猪流行性腹泻病毒N基因序列(GenBank:KX016034.1),设计1对特异性引物(上、下游分别插入Bam HⅠ和XhoⅠ酶切位点),通过RT-PCR技术扩增N基因,在测序鉴定正确后经Bam HⅠ和XhoⅠ双酶切,将其克隆至原核表达载体pET-32a上,获得重组表达质粒pET32a-N。表达的蛋白质经纯化后进行Western blotting鉴定分析。以表达的PEDV-N蛋白作为抗原,免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,经间接ELISA筛选及亚克隆,获2株PEDV-N特异性单克隆抗体。对获得的单抗进行Western blotting鉴定和间接免疫荧光试验(IFA)分析,结果显示2株单抗均能与PEDV-N蛋白特异性结合和识别。以上结果表明PEDV-N蛋白在大肠杆菌中成功表达,且成功制备了2株具有生物学活性的特异单抗,为建立PEDV金标试纸诊断方法奠定了基础。
- 祁光宇刘斌刘斌
- 关键词:猪流行性腹泻病毒N基因原核表达单克隆抗体