目的探讨四君子汤对抗PD-1免疫治疗小鼠三阴性乳腺癌(triple negative breast cancer,TNBC)的疗效及作用机制。方法建立TNBC移植瘤小鼠模型,将小鼠随机分为4T1组(模型组)、四君子汤组、抗PD-1治疗组、四君子汤联合抗PD-1治疗组,每组6只。四君子汤组小鼠按实验动物与人体表面积比换算给予4.85 g/(kg·d)四君子汤灌胃(每周5次),抗PD-1治疗组给予80μg/只抗PD-1抗体腹腔注射(每周2次),四君子汤联合抗PD-1治疗组则分别给予上述治疗,4T1组则灌胃等体积的0.9%氯化钠溶液(每周5次);连续干预3周。比较各组肿瘤体积大小,通过生存分析比较各组小鼠生存时间。采用C11-BODIPY染色法进行脂质过氧化评估各组小鼠肿瘤细胞脂质过氧化水平,并通过测量丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量确认;采用7-氨基放线菌素D(7-aminoactinomycin D,7-AAD)染色法检测细胞死亡比例;采用实时定量PCR检测铁死亡相关基因表达。并进一步通过体外实验分析四君子汤有效成分(人参皂苷Rb1)对4T1癌细胞脂质过氧化和铁死亡的影响。结果与抗PD-1治疗组相比,四君子汤联合抗PD-1治疗组小鼠肿瘤体积明显缩小(P<0.01),四君子汤联合抗PD-1治疗组中位生存期明显延长(34 d vs.25 d,P<0.05)。与抗PD-1治疗组相比,四君子汤联合抗PD-1治疗组脂质过氧化平均荧光强度明显升高(P<0.05),肿瘤细胞中的MDA含量、癌细胞死亡率均明显升高(P均<0.01)。四君子汤组(与4T1组相比)和四君子汤联合抗PD-1治疗组(与抗PD-1治疗组相比)铁死亡抑制基因NRF2、GPX4、SLC7A11表达水平显著降低(P均<0.05),但铁死亡促进基因TFRC组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。细胞实验结果显示:与4T1细胞空白对照组相比,人参皂苷Rb1单体对乳腺癌细胞脂质过氧化平均荧光强度的作用差异无统计学意义(P>0.05)。人参皂苷Rb1单体联合IFN-γ对乳腺癌细胞脂质过氧化平均荧光强度的作用明显高于单
