罗琴芳
- 作品数:35 被引量:138H指数:8
- 供职机构:华南农业大学兽医学院更多>>
- 发文基金:国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域:农业科学医药卫生生物学更多>>
- H9N2亚型禽流感病毒细胞适应株细胞致病性和HA、NA基因序列分析被引量:2
- 2005年
- 对分离自中国南方的H9N2亚型禽流感病毒A/Chicken/Guangxi/KMⅢ/99(H9N2)进行了MDCK细胞的连续传代和NA基因序列的初步分析.研究发现,病毒接种细胞36 h左右出现细胞病变(CPE),细胞肿胀变圆,聚集,脱落.流感病毒经MDCK细胞连续传代19代后,HA效价与亲代病毒相当.将传代获得的第19代病毒进行基因克隆,与亲代病毒进行序列比较,发现经传代后其HA1羧基端的分子特征是:R-S-S-R,仍属于非低致病力毒株.
- 牛学锋罗琴芳郭霄峰
- 关键词:禽流感病毒MDCK细胞HA基因NA基因
- 遗传工程小鼠资源库技术平台建设-质量监测分题.
- 黄韧张钰刘忠华王静张谱华闵凡贵潘金春刘香梅赵维波吴玉娥袁文魏社林罗琴芳
- “遗传工程小鼠资源库技术平台建设-质量监测分题”项目建立了遗传工程小鼠研究用实验小鼠的质量检测技术,包括遗传检测用的同工酶电泳技术、皮肤移植技术;微生物控制检测技术包括病毒、细菌、真菌、寄生虫检测技术;病理解剖、病理切片...
- 关键词:
- 关键词:小鼠
- 新城疫病毒对肿瘤细胞生物学行为的影响被引量:6
- 2003年
- 目的:研究新城疫病毒(NDV)对肿瘤细胞的作用。方法:采用空斑试验观察NDV对鸡胚成纤维细胞(CEF)的作用,通过细胞抑制试验、琼脂糖凝胶电泳、TUNEL染色、细胞骨架染色及细胞唾液酸含量测定等,观察NDV对肿瘤细胞的影响。结果:NDV对CEF、HeLa及Hep-2等肿瘤细胞可产生明显的病变,而对人的羊膜细胞(Wish细胞)无明显影响;对Hela细 胞和Hep-2细胞能产生明显的生长抑制作用,但无量效依赖关系。NDV还可导致以凋亡为主的细胞死亡,引起Hela细胞和Hep-2细胞的细胞骨架发生改变,以及去除肿瘤细胞表面唾液酸的作用。结论:NDV能选择性地作用于人肿瘤细胞,抑制肿瘤细胞的生长,导致肿瘤细胞发生凋亡,有望成为一种有效的抗肿瘤生物制剂。
- 薛立娟金宁一龚伟王宏伟孙大辉罗琴芳葛涛李萍
- 关键词:新城疫病毒肿瘤细胞生物学行为
- 小鼠诺如病毒的分离和鉴定
- 目的:从自然感染小鼠诺如病毒的小鼠中分离小鼠诺如病毒并进行鉴定。
方法:采用RAW264.7细胞从感染小鼠的盲肠内容物中分离病毒。电镜观察病毒形态。设计一对扩增小鼠诺如病毒核衣壳蛋白基因(VP1)特异性引物,...
- 袁文张钰罗琴芳王静吴玉娥刘香梅黄韧
- 关键词:逆转录聚合酶链式反应
- 文献传递
- 禽流感病毒HA基因在狂犬病毒中的表达被引量:6
- 2008年
- 为了研究狂犬病毒作为载体表达外源基因的特性,将禽流感病毒HA基因插入狂犬病毒全基因组cDNA感染性克隆pHEP-3.0G基因与L基因的假基因位点,再通过反向遗传技术,获得了携带流感病毒HA基因的嵌合狂犬病毒(HepFHA),并进行了病毒传代与HA基因表达的研究.结果显示,重组病毒经BHK-21细胞传代10次,病毒表达稳定,但各代次常规红细胞凝集试验均为阴性;Western-blotting检测到病毒表达产物中存在部分HA蛋白的表达,其相对分子质量为39 540,与HA裂解的HA1蛋白相对分子质量相吻合.
- 艾军金晓芹孙京臣罗琴芳黄文科郭霄峰
- 关键词:狂犬病毒反向遗传技术HA基因
- 遗传工程小鼠资源库技术平台建设-质量监测分题
- 黄韧张钰刘忠华王静张谱华闵凡贵潘金春刘香梅赵维波吴玉娥袁文魏社林罗琴芳
- “遗传工程小鼠资源库技术平台建设”是2001年广东省科技厅科技计划项目,由中山大学实验动物中心与广东省实验动物监测所、广州中医药大学、广州空军医院共同承担,其中的“遗传工程小鼠资源库技术平台建设-质量监测分题”由广东省实...
- 关键词:
- 遗传工程小鼠质量检测技术研究
- 黄韧罗琴芳王静张钰潘金春袁文吴玉娥
- 该项目建立了遗传工程小鼠DNA水平、Mrna水平、蛋白质水平和临床表征水平的PCR、克隆测序鉴定、Mrna的RT-PCR检测、生物素标记的Southern-blotting检测、蛋白质印记、以及病理表征的多层次的系统检测...
- 关键词:
- 结核分支杆菌ESAT-6基因蛋白的表达
- 2008年
- 目的构建致病性结核分枝杆菌早期分泌性抗原靶(Early secretary antigenic target,ESAT-6)基因的pET原核表达载体,诱导表达并初步鉴定该蛋白。方法设计特异性引物,用PCR方法从结核分枝杆菌标准株H37Rv基因组中扩增ESAT-6基因,产物通过双酶切克隆入pET-32a(+)质粒,经PCR、酶切、测序等方法鉴定后,转入大肠杆菌BL21菌体中IPTG诱导表达,并经镍柱纯化、Western-blotting鉴定。结果所获得ESAT-6基因序列与GenBank公布的完全一致;表达融合蛋白相对分子质量约2.5×104,并能与特异性单抗结合,具有一定免疫学活性。结论成功表达纯化并鉴定构建了ESAT-6融合蛋白。
- 王敏罗琴芳黄韧
- 关键词:结核分枝杆菌
- 用干扰素诱导蛋白ESAT6修饰禽流感病毒的方法
- 本发明涉及一种用干扰素诱导蛋白ESAT6修饰禽流感病毒的方法。它是采用结核分枝杆菌早期分泌性抗原靶ESAT6基因对禽流感病毒进行修饰,是在建立禽流感病毒反向遗传操作系统基础上,拼接入外源DNA的方法。所选用的ESAT6蛋...
- 罗琴芳郭霄峰黄韧
- 文献传递
- H9N2亚型禽流感病毒反向遗传操作系统的构建
- 根据国内外已公布的AIV H9N2亚型全基因组序列设计了8对引物,分别对低致病力禽流感病毒H9N2亚型毒株A/Chicken/Guangxi/KMⅢ/99(简称KMⅢ)进行了全基因组RT-PCR、测序及序列分析.将获得的...
- 罗琴芳毛三英牛学锋辛朝安郭霄峰
- 关键词:A型禽流感病毒H9N2亚型反向遗传技术病毒拯救
- 文献传递