胡安康
- 作品数：22 被引量：56H指数：3
- 供职机构：徐州医科大学实验动物中心更多>>
- 发文基金：江苏省自然科学基金国家自然科学基金江苏省青年科技基金更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学生物学文化科学更多>>
- 血红素氧合酶-2基因真核表达载体的构建
- 2014年
- 为构建血红素氧合酶-2(HO-2)真核表达载体pEF1α-HO-2-AcGFP,并观察其在小鼠脑血管内皮细胞中的表达情况。试验利用PCR技术从C57BL/6小鼠海马组织中扩增出HO-2基因cDNA序列,用双酶切法将此序列克隆到真核表达载体pEF1α-IRES-AcGFP上,构建HO-2的真核表达载体pEF1α-HO-2-AcGFP,重组载体经EcoRI和BamHI双酶切和测序鉴定。电穿孔法转染小鼠脑血管内皮细胞,48h后,实时定量PCR、Western blot检测HO-2在小鼠脑血管内皮细胞中mRNA和蛋白质水平的表达情况。结果表明,pEF1α-HO-2-AcGFP载体构建正确;重组载体转染小鼠脑血管内皮细胞后HO-2在mRNA水平表达量较空载体转染极显著增高(P<0.01),在蛋白水平表达量较空载体转染显著增高(P<0.05)。表明HO-2基因的真核表达载体pEF1α-HO-2-AcGFP构建成功,为进一步研究其机制和功能奠定了基础。
- 张腾业王珍珍陈仁金袁红花胡安康吴连连朱裕华冀德君朱孝荣
- 关键词：真核表达载体基因表达
- HA蛋白多肽抗体的设计、制备与鉴定
- 2013年
- 利用人工合成的多肽制备HA的特异性多克隆抗体,以期用于HA基因的免疫调控机制研究。根据GenBank中报道的皮蝇素A(Hydermin A,HA)一级结构信息以及HA抗原生物学信息,获得三段序列特异性较高的多肽,采用9一氟甲氧羰基固相合成法获得多肽,采用HPLC和LC·MS测定合成多肽的浓度和分子量,试验表明目的多肽纯度达91.2%、目的多肽分子量为28kD。将多肽与KLH进行偶联,并用其免疫新西兰大白兔以获得抗血清和多克隆抗体。采用ELISA和Western blotting测定其效价和特异性,经ELISA检测表明抗血清可与Pep发生特异性免疫反应,经Western blotting试验表明抗血清和多克隆抗体可识别HA特异性条带,其相对分子量为28kD,与预测分子量相符。该抗体的制备为研究HA免疫调控机制提供了有用工具。
- 袁红花王珍珍陈仁金胡安康张腾业吴连连冀德君朱孝荣
- 关键词：HA多肽多克隆抗体
- N-乙酰L-半胱氨酸预处理对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护机制
- 2014年
- 制备大鼠局灶性脑缺血再灌注实验模型,通过N-乙酰L-半胱氨酸(NAC)预处理对脑缺血再灌注损伤的保护作用,探索脑梗死病理过程及药物治疗途径。NAC预处理21d,利用栓线法建立大鼠大脑中动脉栓塞模型,造模后24h进行神经症状评分,TTC染色,检测血浆MDA、GSH含量,观察大脑皮质细胞凋亡情况及凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax的表达。结果显示,通过神经症状评分和TTC染色判定大鼠局灶性脑缺血实验模型建立成功。与对照组相比,NAC预处理组(100mg·kg-1)大鼠血浆中MDA含量显著降低(P<0.05),GSH含量显著升高(P<0.05);NAC模型组细胞凋亡率及Bax/Bcl-2比值明显低于对照组。结果表明,NAC通过改善氧化应激状态,调控凋亡蛋白Bcl-2、Bax表达,从而对大鼠脑缺血再灌注损伤具有一定的保护作用。
- 胡安康顾建红刘宗平
- 关键词：局灶性脑缺血TTC染色细胞凋亡
- 对存在潜在人畜共患威胁的高致病性家禽病毒病的初步研究
- 2009年
- 本文对存在潜在人畜共患威胁的高致病性家禽病毒病进行了梳理和调查,临床对感染(NDV)的病鹅进行了微生物学检查与鉴定,根据血清学检测、病毒特性初步对病毒进行鉴别诊断,可为临床诊断和实验室诊断提供一定的理论依据和诊断方法。取病鹅肝脏组织处理接种10日龄SPF鸡胚,所接种鸡胚在36～48h之间死亡。收集病毒液进行血凝实验(HA)、血凝抑制实验(HI)。结果:HA为27,HI判断为禽副黏病毒Ⅰ型。结论:此例为典型的鹅源新城疫,但病原体在环境压力和机体免疫压力下,不断发生变异,出现新的变异株和各种血清型,需密切关注,防止类似禽流感的人畜共患疾病的发生。
- 胡安康
- 关键词：人畜共患疾病高致病性病毒病家禽SPF鸡胚
- 浅谈医学研究生实验动物教学被引量：2
- 2016年
- 实验动物学是生命科学研究领域中一门重要的基础课程,是研究生实验动物科研水平的基础保障。由于研究生背景知识的差异,实验动物相关知识水平差异明显,对于实验动物技术相关知识的需求不同,因此教授该课程需要一定的系统性、包容性和实用性。本文从教学内容、教学方法、教学效果评价等几个方面对研究生实验动物教学进行了深入地探讨。
- 朱裕华陈全刚胡安康韩旭峰陈仁金
- 关键词：医学研究生实验动物学教学
- 大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型的建立被引量：1
- 2013年
- 目的:建立大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型(MCAO),改进造模方法,鉴定临床表现,观察模型脑组织中梗死情况。方法:通过改良的大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤动物模型制作方法,建立不同时间再灌注损伤大鼠模型,观察术后大鼠临床表现,取脑组织,TTC染色,观察模型脑组织中梗死情况。结果:模型组大鼠临床表现接近脑卒中临床指证,TTC染色显示大鼠脑组织存在部分梗死区域。结论:成功建立大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤动物模型,临床表现、组织染色观察均已证实。这为进一步研究其发病机理,探讨组织形态的变化与生化指标及临床表现的相互关系,筛选有效药物,阐明疗效机制均有重要作用。
- 胡安康查巍巍张琦朱裕华朱孝荣
- 关键词：TTC染色
- 大鼠SNL神经性疼痛模型的建立被引量：8
- 2014年
- 目的建立大鼠L5和L6脊神经结扎(Spinal nerve ligation,SNL)疼痛模型并进行评价。方法根据大鼠痛阈值测定结果,选择90只符合要求的SD雄性大鼠进行手术操作,术后每隔1 d测定大鼠后足的机械痛阈值,比较术前和术后大鼠对疼痛刺激的反应变化。结果术后大鼠左足的痛阈值逐渐降低,至10 d后趋于稳定,与术前有明显差异(P≤0.01);右足的痛阈值微有升高,保持在稳定的水平内。结论本研究建立的大鼠SNL模型机械痛阈变化明显,稳定性好,可靠性高,可以作为大鼠一种神经病理性疼痛的模型。
- 任士飞张林吉汪鹏旭彭长凌胡安康
- 关键词：神经病理性疼痛脊神经结扎痛阈值
- 低硒对小鼠心肌影响机制的研究被引量：1
- 2012年
- 目的建立硒缺乏小鼠动物模型,观察低硒对小鼠心肌的影响机制。方法利用酵母配制低硒饲料,喂养昆明幼鼠,经过4个月的喂养,测定血清、肝脏、心肌细胞的硒含量,观察心肌超微结构的变化,测定血清心肌酶的变化。结果利用酵母配制的低硒饲料,硒含量为0.016mg/kg,符合低硒标准。昆明鼠用该饲料喂养4个月,心肌、肝脏、血清硒含量分别为0.187mg/kg、0.219mg/kg、0.241mg/kg,符合低硒诊断标准。观察低硒鼠心肌超微结构,可见心肌细胞线粒体肿胀,细胞核出现了异型性,血清心肌酶水平升高。结论经过低硒饲料饲养可建立低硒鼠动物模型。低硒主要引起昆明鼠心肌细胞线粒体的损伤。
- 张琦胡安康庄明朱孝荣
- 关键词：硒缺乏心肌细胞
- 慢性肾功能衰竭大鼠模型的建立与评价被引量：2
- 2010年
- 建立两种慢性肾功能衰竭CRF动物模型:(1)大鼠肾大部分切除诱发肾衰(Platt法);(2)腺嘌呤诱发大鼠慢性肾功能衰竭的动物模型(Yokozawa法)。分别测定血清中血尿素氮(BUN),血肌酐(Scr)Ca2+、P5+等含量。取肾脏组织,HE染色,观察两种慢性肾功能衰竭大鼠模型肾脏组织的损伤情况。结果模型组大鼠血清中血尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)等含量明显升高,HE染色显示两种模型大鼠肾脏组织不同程度的损伤。通过对两种制备方法的可行性和操作性、制备原理、病变特点以及模型应用范围的对比,寻找建立接近临床实际,适用广泛,统一、简便、稳定的CRF动物模型。制作符合人类CRF的动物模型,对研究CRF的发病机理,探讨组织形态的变化与生化指标及临床表现的相互关系,筛选有效药物,阐明疗效机制均有重要作用。
- 胡安康朱孝荣袁红花
- 关键词：HE染色
- 乙酰基亚硝基脲对C57BL/6J雄鼠毒性作用的研究
- 2011年
- 目的 观察乙酰基亚硝基脲（ENU）对C57BL/6J雄鼠的毒性作用及对睾丸等组织器官的影响,分析引起小鼠死亡的原因,探索ENU处理雄鼠的最佳处理浓度.方法 将8～10周龄的C57BL/6J 雄鼠分为实验组和对照组.实验组又分为A、B、C、D 4组,分别腹腔注射ENU 150、100、75、50 mg/kg,每周1次,共3次.对照组腹腔注射生理盐水.首次注射ENU后的第1周至12周,每周分别取实验组和对照组小鼠2 只进行剖检并行组织病理学观察,取其睾丸、附睾称重,记录死亡小鼠数量.结果 实验组小鼠剖检发现胸腔纵隔内有巨大肿块,明显压迫心脏;组织切片观察发现睾丸和肝、肾有不同程度的病理改变.结论 ENU为小鼠的一种强诱变剂,纵隔肿瘤是导致雄鼠死亡的主要原因,ENU对睾丸的毒性作用最强,主要表现为曲精小管组织结构破坏,生精细胞减少.ENU处理雄鼠的最佳浓度为150 mg/kg.
- 张琦胡安康庄明朱孝荣
- 关键词：睾丸
