董虎
- 作品数:77 被引量:33H指数:5
- 供职机构:中国农业科学院兰州兽医研究所更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金中央级公益性科研院所基本科研业务费专项国际科技合作与交流专项项目更多>>
- 相关领域:农业科学一般工业技术政治法律医药卫生更多>>
- O型口蹄疫病毒中和抗体液相阻断ELISA检测试剂盒及其应用
- 本发明公开了一种O型口蹄疫病毒中和抗体液相阻断ELISA检测试剂盒及其应用。所述的液相阻断ELISA试剂盒中包含用作包被抗体的O型口蹄疫病毒中和抗体Ab1、用作反应抗原的O型口蹄疫病毒样颗粒抗原以及用作检测抗体的生物素标...
- 孙世琪张韵郭慧琛董虎李昊洲白满元尹双辉滕志东谭书桢吴金恩周静静魏甜丁耀忠
- 口蹄疫-塞内卡二联病毒样颗粒疫苗及其制备方法和应用
- 本发明公开了一种口蹄疫‑塞内卡二联病毒样颗粒疫苗及其制备方法和应用,属于动物疫苗与兽用生物制品技术领域。本发明以口蹄疫(O型和A型)病毒样颗粒和塞内卡A型病毒样颗粒为抗原,制备新型二联病毒样颗粒疫苗,并通过确定配苗工艺、...
- 郭慧琛孙世琪宋河涛白满元丁耀忠尹双辉张韵董虎滕志东周静静吴金恩
- 猪细小病毒VLPs抗体检测试剂盒及其制备方法、应用
- 本发明公开了猪细小病毒VLPs抗体检测试剂盒及其制备方法、应用,其检测试剂盒包括预包被猪细小病毒VLPs的酶标板、封闭液、样品稀释液、酶结合物、浓缩洗涤液、酶底物溶液和终止液。本发明是首次采用猪细小病毒的病毒样颗粒作为包...
- 郭慧琛孙世琪白满元韩世充董虎宋品魏衍全张韵殷宏
- 文献传递
- 猪细小病毒病毒样颗粒的体外组装被引量:6
- 2017年
- 为了研制猪细小病毒(PPV)病毒样颗粒(VLPs)疫苗,将合成的PPV VP2全长基因克隆到带有His标签和小分子泛素相关修饰物(SUMO)标签的p SMK表达载体中,在大肠杆菌中表达可溶性PPV VP2蛋白。对表达的重组融合蛋白,用特异性蛋白酶切除其SUMO标签,结果显示PPV VP2蛋白可自我组装成VLPs。进一步研究发现,VLPs的组装效率与pH值、离子强度关系密切。本研究通过大肠杆菌表达系统获得的具有良好反应原性的PPV VLPs,为研制PPV VLPs疫苗奠定了良好的基础。
- 宋品孙世琪董虎滕志东曹随忠郭慧琛余树民
- 关键词:猪细小病毒病毒样颗粒原核表达VP2基因
- 塞内卡病毒A的T细胞抗原表位筛选和应用
- 本发明属于兽医生物制品领域,具体的涉及动物疾病预防,更具体涉及塞内卡病毒A保守免疫抗原优势表位的筛选。本发明通过筛选塞内卡病毒A(Senecavirus A,SVA)两种保守的非结构蛋白2C、3AB的T细胞免疫抗原表位,...
- 郭慧琛穆素雨孙世琪商绍彬陈凌波白满元张韵吴金恩尹双辉滕志东周静静董虎
- A型塞内卡病毒衣壳蛋白的原核表达及其五聚体的组装被引量:6
- 2019年
- 为实现A型塞内卡病毒(SVA)衣壳蛋白在大肠杆菌中的可溶性表达并组装为五聚体,本试验以带His标签和SUMO(小泛素样修饰系统)标签的pSMK及pSMA为载体,将塞内卡病毒衣壳蛋白基因VP0、VP1和VP3构建为重组质粒pSMA-VP0、pSMK-VP1、pSMK-VP3,在大肠杆菌原核表达系统中对其进行共表达并优化诱导表达条件,包括诱导温度、诱导剂IPTG浓度、诱导前细菌D600值以及诱导时间,纯化后获得SVA衣壳蛋白后进行免疫印迹分析,之后利用His-SUMO蛋白酶切除标签蛋白,在体外进行组装和鉴定。结果,A型塞内卡病毒衣壳蛋白VP0、VP1、VP3在20℃下、D600值为1.1、 IPTG浓度为0.4 mmol/L、诱导12 h后蛋白表达效果最好。经超声破碎、镍柱纯化后获得VP0、VP1、VP3蛋白,免疫印迹结果表明,目的蛋白能与SVA阳性血清发生特异性反应,证实该蛋白具有良好的反应原性。动态光散射和扫描电镜检测结果显示,去除His-MUMO后还原天然构象的目的蛋白可组装成五聚体。上述研究结果为制备SVA病毒样颗粒奠定了物质基础。
- 莫亚霞宋品穆素雨董虎曹随忠郭慧琛姚学萍孙世琪
- 关键词:重组质粒原核表达
- 一种SVA中和抗体液相阻断ELISA检测试剂盒
- 本发明属于生物技术领域,涉及兽用诊断技术领域,具体的公开了一种猪塞内卡病毒中和抗体液相阻断ELISA试剂盒,所述试剂盒含猪塞内卡病毒单域抗体以及配套的检测试剂,所述猪塞内卡病毒单域抗体还可以是单域抗体的抗原结合片段,所述...
- 郭慧琛穆素雨孙世琪潘颂佳张韵尹双辉白满元吴金恩滕志东周静静丁耀忠董虎
- AO双价口蹄疫病毒表位嵌合纳米颗粒及其制备方法和用途
- 本发明公开了一种AO双价口蹄疫病毒表位嵌合纳米颗粒的制备方法及应用。本发明的AO双价口蹄疫病毒表位嵌合纳米颗粒由A型及O型口蹄疫病毒的表位串联两种骨架蛋白组成。本发明通过选择A型及O型口蹄疫病毒结构蛋白及非机构蛋白的T细...
- 郭慧琛任玫孙世琪董虎裴辰辰滕志东吴金恩白满元张韵尹双辉丁耀忠
- 分子排阻色谱(SEC)分离纯化口蹄疫病毒及其病毒样颗粒的比较被引量:5
- 2019年
- 口蹄疫(FMD)是一种世界范围内的烈性偶蹄动物传染病。传统口蹄疫灭活疫苗可以降低疾病发病率,是目前预防口蹄疫的重要手段之一,但灭活疫苗存在病毒逃逸等生物安全问题,已经不适应我国重大疫病逐步净化的方针政策。口蹄疫病毒样颗粒(virus-like particles,VLPs)仅由病毒结构蛋白组成,不含遗传物质,是一种与天然病毒形态最为接近的抗原,其免疫原性与天然病毒相似,被视为安全性更高的疫苗。因此,FMDV-VLPs疫苗的纯化尤为重要。本文通过分子排阻色谱(size exclusion chromatography,SEC)系统对大肠杆菌组装的FMDV-VLPs进行纯化条件摸索。以FMDV为对照,对纯化后的FMDV-VLPs进行表征,结果显示,大肠杆菌组装的FMDV-VLPs与对照样品出峰位置基本一致,且粒径均在20~30 nm,同时初步计算出大肠杆菌组装效率大概为31.4%。该纯化过程具有操作简单、易于放大并且能够检测粒子大小等优点,可以使FMDV-VLPs疫苗更适合产业化生产以及更接近临床应用。
- 卢渊录董虎李璐莹郭慧琛顾玉芳孙世琪杨玉莹
- 关键词:口蹄疫口蹄疫病毒病毒样颗粒纯化
- 一种猪圆环病毒3型病毒样颗粒及其构建方法和应用
- 本发明涉及一种猪圆环病毒3型病毒样颗粒及其构建方法和应用,属于病毒样颗粒制备技术领域。本发明提供了一种重组质粒,所述重组质粒以pSMA质粒作为基础载体,插入优化好的Cap全长基因,所述优化好的Cap全长基因的核苷酸序列如...
- 孙世琪白满元郭慧琛裴辰辰董虎张韵丁耀忠尹双辉吴金恩郭建宏何继军靳野
- 文献传递