蒋瑞彬 作品数:10 被引量:74 H指数:5 供职机构: 浙江中医药大学 更多>> 发文基金: 中国博士后科学基金 国家自然科学基金 浙江省中医药优秀青年人才基金计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 农业科学 更多>>
山核桃叶总黄酮对H9C2心肌细胞缺氧复氧损伤的保护作用 被引量:6 2016年 目的:研究山核桃叶总黄酮对H9C2心肌细胞缺氧复氧损伤的保护作用。方法:体外培养大鼠H9C2心肌细胞,用不同浓度氯化钴并优化不同缺氧及复氧时间建立缺氧复氧损伤模型。缺氧复氧前加入终浓度为2.5、5、10μg/m L的山核桃叶总黄酮预处理,通过检测细胞上清液中LDH释放量,细胞内MDA含量和SOD活性;并采用MTS检测缺氧复氧损伤后细胞的成活率以及Hoechst-PI双染和流式细胞术观察细胞凋亡情况,蛋白免疫印迹检测细胞内HIF-1α蛋白表达,来考察山核桃叶总黄酮保护心肌细胞缺氧复氧损伤的作用。结果:利用1 200μmol/L氯化钴缺氧18 h,复氧2 h可建立缺氧损伤心肌细胞模型。与模型组比较,山核桃叶总黄酮能降低H9C2细胞缺氧复氧损伤后LDH释放量及细胞内MDA含量,提高SOD活性,减少细胞凋亡,并使细胞HIF-1α蛋白表达恢复正常水平。结论:山核桃叶总黄酮对心肌细胞缺氧复氧损伤具有一定的保护作用,其机制可能与抗氧化、增强细胞清除自由基能力、减少脂质过氧化物产生及抑制细胞凋亡有关。 蒋瑞彬 朱学鑫 邢丽婉 丁志山 吕圭源 金波关键词:缺氧复氧 H9C2心肌细胞 HIF-1Α 抗氧化 细胞凋亡 白芨组培快速繁殖体系研究 被引量:27 2015年 [目的]建立白芨液体快速繁殖体系,并通过诱导愈伤组织建立白芨再生体系。[方法]以白芨种子为材料,在不同液体培养基中进行无菌播种,通过调节光照时长和pH来筛选白芨种子萌发的最佳条件。利用组织培养方法对白芨进行愈伤组织诱导,并对愈伤组织进行抗褐化和再分化研究。[结果]白芨最佳液体快速繁殖条件为MS液体培养基,12h光照时长,pH值5.8~6.5;诱导培养基为MS+1.0 mg·L-16-BA+1.5 mg·L-12.4-D,增殖培养基为MS+1.0 mg·L-16-BA+1.5 mg·L-12.4-D+15 mg·L-1抗坏血酸,分化培养基为MS+0.1 mg·L-1 NAA+0.5 mg·L-16-BA,生根培养基为MS+0.8 mg·L-1 NAA+1.0 mg·L-16-BA,有机添加物对白芨有促进作用。[结论]白芨快速繁殖体系能高效快速繁殖白芨,为白芨产业化发展提供技术支持。本研究对白芨的利用和保护具有重要意义,值得进一步研究开发。 鲁光耀 杨仙 蒋瑞彬 蒋福升 钱朝东 丁志山关键词:白芨 愈伤组织 增殖 再分化 铁皮石斛SCoT-PCR反应体系的优化 被引量:9 2012年 目的对铁皮石斛的目标起始密码子(start condon targeted polymorphism,SCoT)多态性反应体系进行优化,为进一步对铁皮石斛遗传多样性的SCoT分析奠定基础。方法以铁皮石斛的新鲜叶片为试验材料,采用控制单一变量的方法分别研究模板DNA用量、引物浓度、TaqDNA聚合酶用量、dNTPs浓度、及退火温度共5个因素对SCoT-PCR扩增结果的影响。结果铁皮石斛SCoT标记的20μL优化反应体系为:DNA模板20 ng、引物浓度为30μmol/L、Taq DNA聚合酶用量为1.0 U、dNTP浓度为100μmol/L。适宜的PCR扩增程序为95℃预变性4 min;95℃变性50 s,56.1℃复性退火40 s,72℃延伸2 min,循环36次;72℃延伸5 min,4℃保存。1.5%琼脂糖凝胶电泳显示扩增产物在600~2 000 bp。结论该体系的建立为铁皮石斛种质遗传多样性分析、分子标记辅助育种等研究奠定了基础。 徐旭栋 蒋瑞彬 蓝小明 颜美秋 丁志山 吕圭源 金波关键词:铁皮石斛 遗传多样性分析 分子标记辅助育种 野生白及SRAP-PCR反应体系的优化 被引量:7 2013年 采用浓度梯度设计法研究适合白及的SRAP-PCR反应体系。对影响SRAP-PCR的DNA模板、引物、dNTP、Mg2+、Taq酶、退火温度等6个因素进行优化。最终确定白及的SRAP-PCR优化体系:在20μL体系中,DNA模板30 ng、Mg2+2.5 mmol/L、dNTPs 0.25μmol/L、引物20μmol/L、Taq酶2.0U,扩增体系为:94℃预变性5 min;5个循环的94℃变性1 min,36℃退火1 min,72℃延伸1 min;之后35个循环:94℃变性1 min,48℃退火1 min,72℃延伸1 min;72℃最后延伸5 min。该体系的建立为野生白及种质资源遗传多样性的进一步相关遗传分析奠定了基础。 蒋瑞彬 徐旭栋 蓝小明 王鸯妮 丁志山 金波关键词:白及 miR-21在山核桃叶总黄酮抗心肌缺血再灌注损伤作用研究 目的:缺血再灌注损伤是缺血性心脏病治疗的一个难题,至今没有有效的解决方案。研究表明在缺血再灌注损伤过程中,细胞凋亡发挥着重要的作用,抑制细胞凋亡可以减少I/R的损伤,而miR-21参与调控了心肌细胞凋亡过程。我们前期研究... 蒋瑞彬关键词:MIR-21 心肌细胞 缺血再灌注损伤 细胞凋亡 文献传递 白及须根醇提物诱导肺腺癌细胞A549凋亡研究 被引量:5 2015年 目的研究白及须根醇提物(Alcohol extract of fibrous root part of Bletilla striata,AEFB)诱导肺腺癌细胞A549凋亡及相关作用机制。方法运用MTs、hoechst-PI双染及流式细胞术检测白及须根醇提物对A549细胞的增殖及凋亡影响;二维水平的细胞迁移检测白及须根醇提物对A549细胞转移的影响;RT-PCR法检测白及须根醇提物对肺腺癌细胞凋亡和转移相关基因bcl-2、bax、ICAM-1 m RNA的影响。结果白及须根醇提物能够抑制肺腺癌细胞的增殖,并且有浓度效应,随着药物浓度的提高,bcl-2、ICAM-1 m RNA表达下调,bax m RNA表达上调。结论白及须根醇提物能够明显的抑制肺腺癌细胞的生长作用,具有明显的促进肿瘤细胞凋亡作用和抑制肿瘤细胞的转移作用,其机制可能是通过下调bcl-2、ICAM-1及上调bax的表达相关。 蒋瑞彬 黄晶晶 李浩宇 潘平 蒋福升 钱朝东 丁志山关键词:肿瘤细胞 人工栽培铁皮石斛种质资源遗传多样性的SCoT分析 被引量:20 2013年 目的:将目标起始密码子多态性分子标记(SCoT)技术应用于铁皮石斛的遗传多样性研究。方法:采用SCoT分子标记技术和非加权平均距离法(UPGMA)对20份不同来源的人工栽培铁皮石斛样品进行遗传多样性分析。结果:从备选的56个引物中筛选出20个SCoT引物,对共扩增共获得226个条带,平均每个引物产生11.3个条带,其中多态性条带204条,多态性比率达到90.3%。结论:本实验发现不同来源的铁皮石斛人工栽培种存在较大的遗传差异,目前药材市场中的人工栽培铁皮石斛遗传多样性丰富,SCoT技术可有效应用于铁皮石斛的遗传多样性研究。 徐旭栋 蒋瑞彬 蓝小明 颜美秋 丁志山 金波 吕圭源关键词:铁皮石斛 山核桃叶总黄酮对人脐静脉内皮细胞衰老的干预作用 被引量:1 2017年 目的观察山核桃叶总黄酮对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)衰老的保护作用,以探讨其抗衰老作用。方法体外培养HUVECs细胞株以AngⅡ诱导48 h复制衰老细胞模型。细胞分为空白对照组、模型组、山核桃叶总黄酮不同剂量(1、2.5、5μg/m L)组;采用MTS法检测细胞存活率,β-半乳糖苷酶检测内皮细胞衰老程度,流式细胞术分析细胞周期,硝酸还原酶法检测NO含有量。结果与空白对照组比较,模型组细胞存活率明显下降,β-半乳糖苷酶染色阳性细胞率明显增加,细胞周期多停滞在G0/G1期,S期细胞比例减小,表明成功诱导了衰老模型;而给与山核桃叶总黄酮预处理后明显改善了细胞衰老状态,β-半乳糖苷酶阳性细胞率明显减少,G0/G1期细胞比例明显减少,S期细胞比例增加,NO浓度增加。结论山核桃叶总黄酮对AngⅡ诱导的HUVECs细胞衰老有明显的保护作用,具有抑制内皮细胞衰老,保护内皮功能的作用。 邢丽婉 蒋瑞彬 郭艳 丁志山 金波关键词:人脐静脉内皮细胞 衰老 浙江不同产地山核桃叶主要黄酮苷元含量的比较研究 被引量:3 2015年 目的:测定和比较浙江不同产地山核桃叶中的主要黄酮苷元含量,为寻找黄酮苷元含量较高的山核桃叶提供了方向,将有利于山核桃叶的进一步开发利用。方法:采用反相高效液相色谱法(HPLC),以相应化合物最大吸收波长为检测波长,对不同产地山核桃叶中白杨素、小豆蔻明、球松素查尔酮和球松素的含量进行测定,并比较各个产地山核桃叶中白杨素、小豆蔻明、球松素查尔酮和球松素含量的差异。结果:白杨素、小豆蔻明、球松素查尔酮和球松素浓度分别在0.0025~0.025、0.0025—0.025、0.025~0.600和0.0125—0.250mg/mL范围内具有良好的线性关系。白杨素和球松素查尔酮以淳安县威坪镇汪川村山核桃叶最高,而小豆蔻明和球松素以浙江中医药大学滨江校区山核桃叶最高,临安市湍口镇凉溪村山核桃叶中白杨素、小豆蔻明、球松素查尔酮和球松素均最低。结论:浙江不同产地山核桃叶中主要黄酮苷元白杨素、小豆蔻明、球松素查尔酮和球松素含量具有较大的差异,根据需要选择不同产地的山核桃叶进行开发利用。 朱学鑫 蒋瑞彬 黄晶晶 蒋福升 金波 钱朝东 丁志山关键词:高效液相色谱法 大孔吸附树脂法富集山核桃叶球松素查尔酮工艺的研究 被引量:2 2016年 目的:考察10种大孔吸附树脂对山核桃叶球松素查尔酮(pinostrobin chalcone)富集的影响,筛选出富集球松素查尔酮的最佳大孔吸附树脂,并确定富集球松素查尔酮的工艺条件及参数。方法:以球松素查尔酮作为检测指标,进行反相HPLC法进行测定,利用静态吸附方法筛选出最佳大孔吸附树脂为SD200,并利用动态实验优化SD200型大孔吸附树脂富集球松素查尔酮的各种工艺参数。结果:由于SD200型大孔吸附树脂对球松素查尔酮具有较好的吸附力和解吸附力,因此SD200型大孔吸附树脂被选于后续的实验研究。SD200型大孔吸附树脂富集球松素查尔酮的最佳工艺如下:吸附时间为150 min,吸附温度为25℃,样品溶液中球松素查尔酮的浓度为3.58 mg/m L,上样体积为6.5 BV,上样速度为2.0 BV/h,选择70%乙醇溶液进行洗脱,洗脱体积为10.0 BV,洗脱速度为4.0 BV/h。在此条件下,产物中球松素查尔酮的含量从样品溶液中的7.02%提高到26.06%,将近提高了4倍,其回收率为82.81%。结论:SD200型大孔吸附树脂在所确定的工艺条件下,富集球松素查尔酮效果良好,此工艺简单、高效,为球松素查尔酮的大规模制备奠定一定的基础。 朱学鑫 蒋瑞彬 黄晶晶 蒋福升 金波 钱朝东 丁志山关键词:山核桃 大孔吸附树脂