蔡洪敏
- 作品数：2 被引量：2H指数：1
- 供职机构：广东药学院生命科学与生物制药学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 腹水型抗EGFR单克隆抗体纯化方法的研究
- 2016年
- 目的:研究腹水型抗EGFR单克隆抗体的纯化方法。方法:抗EGFR杂交瘤细胞诱生的腹水,经离心预处理,上清先用PEG6000沉淀,沉淀物溶解再用Protein-A柱亲和纯化,SDS-PAGE鉴定纯化效果。结果:经两步纯化,抗EGFR单抗纯度达到了98%以上,收率达到90%以上。结论:PEG6000沉淀和Protein-A柱亲和层析相结合,是纯化腹水型单抗体的一种高效方法。
- 蔡洪敏王业胜许国凤李黄金赵林
- 关键词：腹水EGFR单克隆抗体纯化
- 昆明鼠肠激酶轻链的原核表达、复性与纯化被引量：2
- 2014年
- 目的:构建昆明小鼠十二指肠肠激酶轻链(mEKL)大肠杆菌高效表达系统,并建立复性与纯化方法。方法:RT-PCR法扩增mEKL全长cDNA,以融合表达载体pET32a克隆于大肠杆菌BL21(DE3)和Origami(DE3),采用阴离子交换层析纯化复性表达产物,经牛肠激酶消化回收mEKL。结果:扩增得到723bp的mEKL全长cDNA,经序列分析发现,昆明鼠来源的mEKLcDNA序列的Ser131密码子中存在1个同义点突变。mEKL在2种宿主菌中的表达产物均为包涵体蛋白,经稀释复性、阴离子交换层析纯化和肠激酶切割可得高纯度mEKL。结论:成功构建昆明鼠源mEKL高效表达工程菌,并建立相应的纯化方法。
- 陈展歌陈锡贤杨梦琳蔡洪敏李黄金
- 关键词：复性纯化
