覃宗华 作品数:106 被引量:358 H指数:11 供职机构: 华南农业大学 更多>> 发文基金: 广东省自然科学基金 国家高技术研究发展计划 广东省科技攻关计划 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 环境科学与工程 医药卫生 更多>>
接种鸡IBD弱毒疫苗后鸡脾脏TLR7基因表达的动态变化 被引量:2 2009年 给11日龄雏鸡分别口服接种鸡传染性腔上囊炎(IBD)弱毒疫苗(法贝灵,IBD-Blen)1头份和3头份后,于不同时间采集脾脏组织分离纯化淋巴细胞,用常规法抽提总RNA,以鸡B-aetin基因为内参,采用半定量RT-PCR法检测脾脏组织中鸡Toll样受体7(chTLR7)基因的表达动态。结果表明:接种IBD弱毒疫苗前,试验鸡脾组织中chTLR7有微量表达;疫苗接种后,脾脏中chTLR7mRNA的表达开始显著上升;接种后12小时达峰值,此后迅速下降;130小时降至疫苗接种前的基础水平。说明chTLR7可能参与了IBDV感染早期的天然免疫反应过程。 弓莉 王元占 蔡建平 覃宗华 余劲述关键词:半定量RT-PCR 柔嫩艾美耳球虫表面抗原SAG2基因的克隆与表达 被引量:6 2006年 根据生物信息学预测的基因序列设计引物,应用RT-PCR方法从柔嫩艾美耳球虫第二代裂殖子总RNA扩增获得了鸡柔嫩艾美耳球虫表面抗原2(surface antigen 2,SAG2)基因序列,将其与pGEM-T easy载体连接后转化E.coliDH5α,筛选阳性克隆,以带有限制酶切位点的特异性引物用PCR方法扩增不含SAG2 N端信号肽序列的ORF序列后克隆至表达载体pET-32 a(+),构建了重组表达质粒pET-32 a(+)-SAG2,并将其转化至E.coliBL21(DE3)。经IPTG诱导,获得了SAG2重组抗原在大肠杆菌的高效表达,重组蛋白的表达量约占菌体总蛋白的35%,融合蛋白的分子量约为47 ku。菌体经超声处理后进行SDS-PAGE分析表明,表达蛋白以包涵体的形式存在。 简永利 蔡建平 于三科 覃宗华 林青 叶秀华 陈闻 党海斌关键词:柔嫩艾美耳球虫 基因克隆 鸡B淋巴细胞激活因子(ChBAFF)基因的克隆表达 2007年 根据GenBank中收录的鸡B淋巴细胞激活因子(chicken B cell activator factor,ChBAFF)基因序列,设计特异引物,以3周龄鸡法氏囊总RNA为模板,经RT-PCR扩增出ChBAFF的ORF序列,测序后,插入质粒pMAL-c2X,构建重组表达载体,转染到大肠杆菌Rosset(DE3),并以IPTG诱导表达,SDS-PAGE分析表明,重组蛋白的表达量约占菌体总蛋白的25/,融合蛋白的分子量约为75ku,所表达重组蛋白主要存在于菌体裂解物上清液中,为可溶性表达。以淀粉树脂柱亲和层析纯化重组蛋白后进行SDS-PAGE,用BandScan软件分析,提纯重组蛋白的含量可达97.5/。MTT比色法分析证明,纯化的重组蛋白可显著刺激鸡脾脏淋巴细胞的活化。 王步高 曾德年 覃宗华 余劲术 吴彩艳 吕敏娜 蔡建平关键词:基因克隆 鸡球虫病的肠道免疫反应 被引量:2 2001年 覃宗华 谢明权关键词:球虫病 肠道免疫 免疫机制 毒害艾美耳球虫微线蛋白-2基因在减毒沙门氏菌的表达及免疫保护效果研究 本研究成功构建了表达鸡毒害艾美耳球虫(Eimerianecatrix)广东株(GD)微线蛋白-2基因(EnMIC2)的重组减毒鼠伤寒沙门氏菌,在IPTG诱导下获得了EnMIC2的高效表达,SDS-PAGE分析表明,表达产... 谢明权 覃宗华 蔡建平 艾哈迈德 彭新宇 魏文康 吴惠贤关键词:艾美耳球虫 减毒沙门氏菌 免疫保护 鸡球虫病 文献传递 鸭疫里默氏杆菌基因组文库的构建 鸭疫里默氏杆菌病是危害养鸭业的重要疫病.本研究提取鸭疫里默氏杆菌的基因组DNA后,用Sau3AⅠ酶切,并回收大小为0.07-4kb的片段;酶切片段与质粒载体PUC18连接后,电转化大肠杆菌JM109,成功构建了Ⅰ型鸭疫里... 齐冬梅 覃宗华 谢明权 林旭埜 蔡建平 叶秀华 王星关键词:鸭疫里默氏杆菌 基因组文库 抗原基因 基因克隆 文献传递 毒害艾美耳球虫微线蛋白-2基因在减毒沙门氏菌的表达及免疫保护效果研究 本研究成功构建了表达鸡毒害艾美耳球虫(Eimeria necatrix)广东株(GD)微线蛋白-2基因(EnMIC2)的重组减毒鼠伤寒沙门氏菌,在IPTG 诱导下获得了EnMIC2的高效表达,SDS-PAGE分析表明,表... 谢明权 覃宗华 蔡建平 艾哈迈德 彭新宇 魏文康 吴惠贤关键词:毒害艾美耳球虫 减毒沙门氏菌 免疫保护 文献传递 纳豆芽胞杆菌对黄羽肉鸡生产性能和免疫功能的影响 为评价纳豆芽胞杆菌对黄羽肉鸡生产性能及免疫功能的影响.270只1日龄肉公雏分别给予不同剂的纳豆芽胞杆菌,并观察饲养周期内生产性能及对新城疫疫苗免疫的抗体水变化.研究结果显示,添加不同浓度的纳豆芽胞杆菌对黄鸡的总增重有不同... 王星 覃宗华 蔡建平 谢明权 李国清 叶秀华 余劲术 吕敏娜 吴彩艳关键词:肉鸡 免疫功能 文献传递 抗蠕虫药物作用机理研究进展 被引量:3 2002年 覃宗华 谢明权关键词:抗蠕虫药 苯并咪唑类药物 吡喹酮 鸡艾美耳球虫抗原基因在减毒沙门氏菌的共表达及免疫效果研究 本研究以孢子化卵囊的总RNA为模板,用RT-PCR方法克隆获得了毒害艾美耳球虫(Eimeria necatrix)广东株子孢子微线蛋白-2基因(EnMIC2)和堆型艾美耳球虫(E.acervulina)广东珠子孢子表面抗... 覃宗华 蔡建平 谢明权 叶秀华 王佩瑶 陈闻关键词:毒害艾美耳球虫 堆型艾美耳球虫 减毒鼠伤寒沙门氏菌 共表达 抗原基因 文献传递