许涛
- 作品数：8 被引量：8H指数：2
- 供职机构：辽宁医学院更多>>
- 发文基金：辽宁省教育厅高等学校科学研究项目辽宁省博士科研启动基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- α-硫辛酸对顺铂致小鼠耳蜗毛细胞损伤的保护作用的体外研究
- 2012年
- 目的:研究α-硫辛酸(LA)对顺铂致离体小鼠耳蜗毛细胞损伤的保护作用。方法:分离3～5d的新生昆明种小鼠耳蜗基底膜,在含有1%牛血清白蛋白培养基中培养24h,分为对照组、模型组(顺铂16μg.mL-1)、药物对照(LA0.5mmol.L-1)组和低、高浓度LA(顺铂16μg.mL-1+LA0.2、0.5mmol.L-1)组(n=10),分别加入含相应药物的新鲜培养基2mL,培养24h,观察各组耳蜗毛细胞组织形态变化,计算内、外毛细胞缺失百分率,检测Bax、Bcl-2的表达情况。结果:与对照组比较,模型组小鼠耳蜗毛细胞出现纤毛倒伏、排列紊乱,内、外毛细胞缺失百分率、Bax表达水平明显增加(P<0.01),Bcl-2表达明显减弱(P<0.01);与模型组比较,低、高浓度LA组小鼠耳蜗毛细胞的形态改变明显减轻,内、外毛细胞缺失百分率、Bax表达明显减弱(P<0.05或P<0.01),Bcl-2表达明显增强(P<0.05),且高浓度组改善效果明显优于低浓度组(P<0.05);对照组与药物对照组比较无明显差异(P>0.05)。结论:LA对离体培养的顺铂致小鼠耳蜗毛细胞损伤具有保护作用。
- 许涛刘双月
- 关键词：Α-硫辛酸顺铂小鼠耳蜗毛细胞
- 新生小鼠耳蜗Corti器的体外培养与观察
- 2009年
- 目的建立新生昆明小鼠耳蜗Corti器体外培养的简便方法并观察耳蜗毛细胞的组织学形态。方法取生后3～5 d昆明小鼠耳蜗基底膜,平铺在胶原凝胶表面,然后在含有1%牛血清白蛋白的DMEM/F12培养基中进行培养。采用异硫氰酸四甲基罗丹明标记的鬼笔环肽荧光染色方法观察耳蜗毛细胞的生长情况。结果耳蜗基底膜经24、48 h和72 h培养后,内、外毛细胞均生长良好,其结构完整,纤毛束排列有序,无任何缺失。结论本培养方法简便有效,可用于耳蜗Corti器体外培养实验研究。
- 许涛孟秀清王爱梅刘双月牟华
- 关键词：小鼠耳蜗体外培养CORTI器
- α-硫辛酸对卡那霉素致离体小鼠耳蜗毛细胞损伤的防护作用被引量：2
- 2013年
- 目的研究α-硫辛酸(LA)对卡那霉素(KM)所致离体小鼠耳蜗毛细胞损伤的防护作用。方法分离生后3 d的昆明小鼠耳蜗基底膜,培养24 h后分别加入含有0.3 mmol/L KM以及不同浓度LA的培养液继续培养24 h。采用异硫氰酸四甲基罗丹明标记的鬼笔环肽荧光染色方法,观察离体小鼠耳蜗毛细胞的形态改变,耳蜗毛细胞计数检测毛细胞缺失情况,同时测定耳蜗组织中超氧化物歧化酶(SOD)活力和丙二醛(MDA)含量。结果给予KM 24 h后,小鼠耳蜗毛细胞出现纤毛倒伏、排列紊乱等形态改变,同时伴有毛细胞的大量缺失,并且耳蜗组织中SOD活力明显下降,MDA含量则显著增加;而同时给予KM和LA 24 h后,小鼠耳蜗毛细胞的形态改变明显减轻,同时毛细胞的缺失亦显著减少(P<0.05),并且随着LA浓度的逐渐增大,耳蜗组织中SOD活力明显升高,MDA含量则明显减少(P<0.05)。结论 KM可通过引发脂质过氧化而对小鼠耳蜗毛细胞造成损伤,LA明显提高小鼠耳蜗组织中SOD活力,防止脂质过氧化,有效防护KM对耳蜗毛细胞的损伤。
- 王爱梅许涛刘双月牟华
- 关键词：Α-硫辛酸卡那霉素耳蜗毛细胞
- 顺铂对离体培养小鼠耳蜗毛细胞的损伤及凋亡作用被引量：3
- 2010年
- 目的建立新生昆明小鼠离体顺铂耳毒性模型,研究顺铂对离体培养小鼠耳蜗毛细胞的损伤及凋亡作用。方法分离生后3d的昆明小鼠耳蜗基底膜,在含有1%牛血清白蛋白的DMEM/F12培养基中进行培养。采用异硫氰酸四甲基罗丹明标记的鬼笔环肽荧光染色方法观察不同浓度顺铂对小鼠耳蜗毛细胞的损伤,同时应用Hoechst 33258染色技术检测耳蜗毛细胞的凋亡。结果不同浓度顺铂均可使小鼠耳蜗毛细胞发生凋亡的形态学变化。顺铂浓度为4mg·L-1时,耳蜗毛细胞缺失率和凋亡率明显增大,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01)。随着顺铂浓度的增高(8～64mg·L-1),耳蜗毛细胞缺失率和凋亡率亦显著增大,呈现明显的量效关系(P<0.01)。结论应用新生昆明小鼠能建立可靠的离体顺铂耳毒性模型;顺铂可导致耳蜗毛细胞凋亡,提示凋亡可能是顺铂耳毒性机制之一。
- 刘芳芳王爱梅许涛林宇涵
- 关键词：顺铂耳蜗毛细胞器官培养
- 阿米卡星对豚鼠耳蜗毛细胞磷酸化JNK表达的影响被引量：2
- 2011年
- 目的探讨阿米卡星(AMK)对豚鼠耳蜗毛细胞磷酸化c-Jun氨基末端激酶(JNK)表达的影响及耳毒性机制。方法豚鼠随机分为对照组、AMK 3 d组、AMK 7 d组和AMK 11 d组,AMK组分别连续肌肉注射AMK(400 mg/kg)3、7 d和11 d,对照组肌肉注射等量生理盐水。应用免疫组织化学(SABC)法和显微图像分析技术观察磷酸化JNK(p-JNK)在豚鼠耳蜗毛细胞中的表达,同时结合听觉脑干反应(ABR)测试观察用药前后豚鼠听力的变化。结果对照组豚鼠耳蜗毛细胞中无p-JNK的表达,而注射AMK后,在豚鼠耳蜗中可见p-JNK表达,并且随着给药时间的延长,p-JNK的表达亦明显增强,同时ABR阈移显著增大,与对照组比较均有显著性差异(P<0.01)。结论 p-JNK可在AMK致毒豚鼠耳蜗毛细胞中表达,且其表达与听力变化高度相关,提示JNK信号通路可能参与了AMK的耳毒性损伤。
- 刘双月王爱梅许涛
- 关键词：C-JUN氨基末端激酶阿米卡星耳蜗
- 阿米卡星致毒豚鼠耳蜗中p-JNK表达增强
- 2011年
- 目的研究阿米卡星(AMK)对豚鼠耳蜗磷酸化C-JUN氨基末端激酶(JNK)表达的影响及其耳毒性机制。方法将豚鼠分为对照组、AMK 3、7和11 d组。AMK组分别每日肌肉注射AMK(400 mg/kg),对照组肌肉注射等量0.9%氯化钠注射液。用听脑干反应(ABR)测试和耳蜗铺片异硫氰酸四甲基罗丹明(TRITC)标记的鬼笔环肽荧光染色,观察豚鼠听觉功能及耳蜗毛细胞形态;用免疫组织化学法和显微图像技术以及蛋白质印迹技术检测p-JNK在耳蜗中的表达。结果 AMK对豚鼠耳蜗毛细胞的损伤由底转向顶转发展。AMK 3、7和11 d组耳蜗外毛细胞p-JNK阳性反应的平均吸光度值分别为169.40±1.18、153.87±2.05和145.23±2.98,AMK组p-JNK表达明显增强(P<0.01)。在4、12和24 kHz刺激频率下,AMK 7和11 d组ABR阈移(dBSPL)分别为6.25±1.96、10.58±2.90、16.13±3.80和49.19±7.48、58.42±7.56、63.54±8.72,比对照组显著增大(P<0.01)。结论 JNK信号通路可能参与了AMK的耳毒性损伤。
- 刘双月王爱梅许涛
- 关键词：C-JUN氨基末端激酶阿米卡星耳蜗
- 阿米卡星对豚鼠耳蜗毛细胞的损伤作用
- 2010年
- 目的研究阿米卡星(amikacin,AMK)在不同给药时间内对豚鼠耳蜗毛细胞的损伤作用,探讨AMK的耳毒性。方法豚鼠随机分为对照组、AMK3 d组、AMK7 d组和AMK11 d组。采用异硫氰酸四甲基罗丹明标记的鬼笔环肽荧光染色方法,并结合听脑干反应(auditory brainstem response,ABR)测试,观察用药前后耳蜗毛细胞形态及听功能的改变。结果AMK首先损伤耳蜗底回的外毛细胞,并且随着给药时间延长,损伤逐渐向顶回发展,外毛细胞缺失明显增多,而AMK对内毛细胞的损伤要轻于外毛细胞。听功能改变与形态学变化基本一致。结论AMK可损伤豚鼠耳蜗毛细胞,导致听功能下降。
- 刘双月王爱梅许涛牟华
- 关键词：阿米卡星耳蜗听脑干反应
- 卡那霉素对体外培养小鼠耳蜗毛细胞的损伤作用被引量：2
- 2009年
- 目的建立新生昆明小鼠耳蜗Corti器体外培养模型,研究卡那霉素(kanamycin,KM)对体外培养小鼠耳蜗毛细胞的损伤作用。方法分离生后3d的小鼠耳蜗基底膜,平铺在胶原凝胶表面,然后在含有1%牛血清白蛋白的DMEM/F12培养基中进行培养。采用异硫氰酸四甲基罗丹明标记的鬼笔环肽荧光染色方法观察不同浓度(0.05、0.1、0.2、0.3mmol/L)KM对小鼠耳蜗毛细胞的影响,耳蜗毛细胞计数检测毛细胞缺失情况。结果不同浓度KM均可使小鼠耳蜗外毛细胞出现纤毛倒伏、排列紊乱等形态变化。KM浓度为0.05mmol/L时,耳蜗外毛细胞缺失率明显增大,与对照组比较有显著性差异(P<0.05),而耳蜗内毛细胞缺失率无明显变化(P>0.05)。随着KM浓度的逐渐增高(0.1～0.3mmol/L),耳蜗内、外毛细胞缺失率亦显著增大,呈现明显的量效关系(P<0.05或P<0.01)。结论KM可对体外培养的小鼠耳蜗毛细胞产生损伤作用,内耳器官培养是研究药物耳毒性的有效方法。
- 许涛王爱梅刘双月牟华
- 关键词：卡那霉素耳蜗毛细胞体外培养动物小鼠
