贺慧为
- 作品数：3 被引量：3H指数：1
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- RNA干扰技术在肿瘤基因治疗中的应用价值
- 2005年
- RNA干扰(RNAi)是一种在动植物中广泛存在的序列特异性转录后水平的基因沉默过程.它由双链DNA经核酸酶降解成21～23 nt的小片段后,特定位点、特定序列的降解与之序列相应的mRNA.利用RNAi技术可作为一种基因敲除工具应用于多种疾病的治疗,尤其在肿瘤的基因治疗中有着广泛的应用前景和价值.
- 贺慧为马琳
- 关键词：RNA干扰小干扰RNA肿瘤基因治疗
- EGFR靶向shRNA真核表达载体的构建与鉴定
- 2007年
- 目的构建干扰表皮生长因子受体(EGFR)的pSilencerTM-EGFR表达质粒,转染入非小细胞肺癌(NSCLC)A549细胞株,为观察对EGFR的沉默效应奠定基础。方法①根据人类EGFR的mRNA序列,设计4条干扰片段,以pSilencerTM2.1-U6-hygro质粒为载体,构建shRNA重组体,转化入DH5α大肠杆菌,提取质粒,进行酶切和测序鉴定;②采用脂质体2000分别转染人类非小细胞肺癌细胞株A549,用潮霉素(Hygromycin B)筛选阳性克隆。结果①经酶切及测序鉴定,成功构建了针对EGFR的4种重组干扰质粒,分别命名为pSilencerTM-EGFRⅠ、pSi-lencerTM-EGFRⅡ、pSilencerTM-EGFRⅢ和pSilencerTM-EGFRⅣ;②成功转染A549细胞,经筛选后得到稳定表达的细胞克隆。结论利用RNAi技术原理成功构建针对EGFR的shRNA重组质粒,并转染入A549细胞。
- 潘泽政杨小红贺慧为张晓春李金生
- 关键词：表皮生长因子受体RNA干扰转染
- RNA干扰单独及联合p53基因对肺癌细胞增殖的抑制作用被引量：3
- 2006年
- 目的观察RNA干扰技术单独及联合p53基因对肺癌细胞增殖的影响。方法用阳离子脂质体Lipo-fectamine2000分5组介导RNA干扰质粒和p53基因单独或共转染到非小细胞肺腺癌细胞系A549细胞,观察转染后第1、3、5、7天该细胞的增殖活力,采用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT法)测定吸光度(A),以检测细胞增殖活力。结果各组A均值分别为:空白对照组:1.406,脂质体组:1.238,RNA干扰质粒组:0.168,p53组:0.22,干扰质粒+p53组:0.109,实验组与对照组比较差异显著(P<0.05),以共转染干扰质粒+p53组最强。结论RNA干扰技术可成为有效抑制非小细胞肺腺癌的治疗新方法,联合抑癌基因p53可增强其对肺癌细胞的抑制作用。
- 杨晓红万福生潘泽政余波贺慧为艾春红张晓春卢小澍
- 关键词：RNA干扰P53基因肺肿瘤基因治疗
