邢丛丛 作品数:9 被引量:7 H指数:2 供职机构: 河北医科大学第二医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家高技术研究发展计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
空肠弯曲菌Penner O:19 galE基因真核表达质粒的构建 2012年 目的构建空肠弯曲菌Penner O:19 galE基因真核表达质粒。方法 PCR扩增空肠弯曲菌Penner O:19 galE基因,构建pGEM-T-galE克隆质粒及构建pEGFP-N1-galE真核表达质粒,并检测真核表达质粒在293T细胞中的表达。结果构建了真核表达质粒pEGFP-N1-galE,检测到其在293T细胞表达。结论 pEGFP-N1可作为Penner O:19 galE基因的真核表达载体。 邢丛丛 李震中 白欣立 徐飞 付金生 马海阳 李文倩 卢小卫关键词:空肠弯曲菌 重组质粒 O 吉兰-巴雷综合征相关空肠弯曲菌cstⅡ基因序列对比研究 被引量:1 2011年 目的研究华北地区3株吉兰-巴雷综合征(Guillain-Barre syndrome,GBS)相关空肠弯曲菌(Campylobacter jejuni,C.jejuni)的cstⅡ基因序列并寻找GBS相关及GBS无关的两类空肠弯曲菌菌株间可能与GBS致病性相关的基因突变位点和蛋白高级结构变化,分析菌株间遗传进化关系。方法选取分离自GBS患者粪便并经动物模型证实为致GBS的3株空肠弯曲菌菌株进行培养并提取基因组DNA测序,与GenBank中GBS无关空肠弯曲菌基因序列进行配对对比,寻找两类菌株间可能导致空肠弯曲菌致病能力差异的cstⅡ基因碱基突变位点及蛋白高级结构改变,观察这种变化是否为GBS相关菌株的共性,并构建遗传进化树。结果与GBS无关菌株相比,3株致GBS菌株cstⅡ基因的氨基酸序列二级结构的第7个0L螺旋的165—180区段均被打开形成了折叠或转角,该变化在其他GBS相关菌株的二级结构变化中同样得到体现。实验中75%的GBS相关菌株cstⅡ基因为双功能,25%GBS相关菌株及所有GBS无关菌株cstⅡ基因为单功能。LL株与实验中涉及的GBS相关菌株在进化上高度类聚。结论双功能cstⅡ可能与空肠弯曲菌的致GBS特性相关。LL株cstⅡ基因在一定程度上反映了亚洲地区的GBS相关菌株cstⅡ基因的序列特征,为进一步探索GBS发病的地域性特点并对GBS菌株进行监测提供了资料。 孙世超 白欣立 陈娟 王莹 邢丛丛 付金生 李震中关键词:吉兰-巴雷综合征 空肠弯曲菌 吉兰-巴雷综合征空肠弯曲菌感染诱导巴马小型猪致周围神经病动物模型的建立 被引量:3 2012年 目的使用致吉兰-巴雷综合征的空肠弯曲菌活菌诱导的巴马小型猪建立周围神经病动物模型。方法使用吉兰-巴雷综合征病人粪便中分离的空肠弯曲菌,微需氧培养后口服攻毒30只巴马小型猪,建立周围神经病动物模型。结果实验组在攻毒后14~16天出现临床症状,两周内解剖。临床症状周围神经病重症的占40.9%(9/22),出现周围神经病症状的占81.8%(18/22)。病理学检查锇酸染色可见卵圆体结构,镀银坚固蓝染色见轴索断裂,未见脱髓鞘。结论本实验通过致吉兰-巴雷综合征的空肠弯曲菌活菌构建了巴马小型猪周围神经病动物模型,模拟了自然条件下侵染致病的过程,为研究周围神经病的发病机理提供了大型动物模型。 徐飞 邢丛丛 陈扬 李震中 白欣立关键词:吉兰-巴雷综合征 动物模型 空肠弯曲菌 巴马小型猪 空肠弯曲菌Lulei株WaaF基因克隆与序列分析 2012年 目的克隆空肠弯曲菌Lulei株WaaF基因,并分析其遗传进化关系。方法聚合酶链反应扩增空肠弯曲菌Lulei株WaaF基因,构建pGEM-T-WaaF质粒,选择正确克隆质粒测序。自美国国家生物技术信息中心Nucleotide数据库下载5株吉兰-巴雷综合征相关菌株WaaF序列,1株非吉兰-巴雷综合征相关菌株WaaF序列,利用DNAstar v7.1软件建立进化树,分析不同菌株间WaaF基因遗传关系。结果完成了空肠弯曲菌Lulei株WaaF基因的克隆,发现WaaF基因在吉兰-巴雷综合征相关菌株间存在聚类现象。结论空肠弯曲菌Lulei株WaaF基因是807bp的片段,与Lichang株遗传进化关系最近。 邢丛丛 徐飞 白欣立 付金生 李文倩 卢晓卫 马海阳 李震中关键词:进化 遗传学 吉兰-巴雷综合征相关空肠弯曲菌waaF基因序列对比研究 被引量:1 2011年 目的了解吉兰-巴雷综合征(GBS)相关空肠弯曲菌(C.jejuni)waaF基因核酸及氨基酸序列特征,分析其遗传进化关系。方法选取3株致GBS C.jejuni菌株,提取其基因组测序。应用生物信息学软件,以NCTC11168序列为参照进行比对,分析waaF基因碱基及相应氨基酸突变、二级结构变化,计算遗传距离。结果 3株致GBS C.jejuni waaF基因均由960个碱基构成,相同碱基突变位点有5个,1081462位zhanxingT→A,lulei、qiaoyuntaoT→G导致相同氨基酸改变:185位D→E,该位点导致α螺旋结构的改变。3株致GBS C.jejuni waaF基因遗传距离较小。结论 GBS相关C.jejuni菌株waaF基因序列存在相同碱基及氨基酸突变及二级结构变化,这可能与C.jejuni致GBS能力的改变相关。河北地区致GBS的C.jejuni在进化上存在聚类现象。 陈娟 李震中 白欣立 刘慧 李鑫 赵子春 刘卫卫 郭医杰 邢丛丛 李春岩关键词:吉兰-巴雷综合征 空肠弯曲菌 空肠弯曲菌致急性周围神经病巴马香猪模型妆步建立 邢丛丛文献传递 网络资源链接 空肠弯曲菌Cj1136、Cj1138、Cj1139基因对比研究 被引量:2 2009年 目的了解吉兰-巴雷综合征(GBS)相关空肠弯曲菌(C.jejuni)的Cj1136、Cj1138、Cj1139基因序列特征,并同GenBank中的非GBS相关C.jejuni菌株对应序列进行比较,找出可能使C.jejuni菌株具有致GBS能力的碱基突变。方法选取分离自GBS患者粪便并经动物模型证实为致GBS的AMAN型C.jejuni 3株进行培养并提取基因组DNA测序。将基因测序结果与NCTC11168菌株进行对照比较,寻找此3株C.jejuni的Cj1136、Cj1138、Cj1139基因突变位点,并计算此3株致GBS C. jejuni的Cj1136、Cj1138、Cj1139基因序列间的遗传距离。结果3株致GBS C.jejuni菌株的Cj1136基因由1173个碱基构成;Cj1138基因由1170个碱基构成;Cj1139基因由912个碱基构成,与NCTC11168的Cj1136、Cj1138、Cj1139基因序列相比,此3株致GBS C. jejuni中只有Cj1138存在2个相同的碱基突变。遗传距离计算,3株致GBS C.jejuni的Cj1136、Cj1138、Cj1139基因之间最大遗传距离为2.1%。结论与NCTC11168相比GBS相关C.jejuni中Cj1138基因序列存在相同碱基突变,这些碱基突变可能与C.jejuni致GBS能力的改变相关。该3株致GBS C.jejuni的Cj1136、Cj1138、Cj1139基因遗传距离较小,反映河北地区致GBS的C.jejuni在进化上存在聚类现象,具有一定的区域特征。 李鑫 李震中 白欣立 刘慧 赵子春 刘卫卫 高爱民 邢丛丛 李春岩关键词:吉兰-巴雷综合征 空肠弯曲菌 基因 空肠弯曲菌penner o:19 cjaA基因的克隆表达 2011年 目的克隆空肠弯曲菌penner o:19 cjaA基因,构建其原核表达载体,诱导表达及纯化蛋白,为基因工程疫苗的研制打下基础。方法扩增空肠弯曲菌penner o:19 cjaA基因,构建pGEM-T-cjaA克隆载体,以EcoRI和XhoI为酶切位点构建pGEX-4T-1-cjaA原核表达载体。表达载体转化E.coli BL21后诱导表达,SDS-PAGE鉴定表达产物,用Glutathione Sepharose4B纯化重组蛋白。结果成功构建pGEX-4T-1-cjaA表达载体,并获得浓度为10μg/μl的rGST-CjaA重组蛋白。结论成功构建pGEM-T-cjaA克隆载体及pGEX-4T-1-cjaA表达载体,获得重组蛋白rGST-CjaA,为研究空肠弯曲菌疫苗打下基础。 邢丛丛 李震中 白欣立 徐飞 简朔 李鑫 赵子春 高爱民 薛峰关键词:空肠弯曲菌 原核表达 蛋白纯化 空肠弯曲菌致急性周围神经病巴马香猪模型初步建立 目的:建立空肠弯曲菌(Campylobacter jejuni,Cj)感染致急性周围神经病巴马香猪模型,初步探讨以空肠弯曲菌为感染源引起继发免疫相关疾病的发病模式,为研究急性运动感觉性轴索性神经病(acutemotor ... 邢丛丛关键词:空肠弯曲菌 动物模型 发病机制 病理生理 文献传递