目的探讨藏雪莲水提取物能否减轻中波红斑效应紫外线(UVB)辐射后人角质形成细胞(Ha Ca T细胞)的氧化损伤。方法体外培养Ha Ca T细胞,分为低剂量辐射组(30 m J/cm2,辐射1 h)、高剂量辐射组(60 m J/cm2,辐射1 h),低剂量辐射组进一步分为对照组、L-UVB组、L-UVB+低剂量臧雪莲组(臧雪莲1 g/L)、L-UVB+高剂量臧雪莲组(臧雪莲5 g/L),高剂量辐射组进一步分为对照组、H-UVB组、H-UVB+低剂量臧雪莲组(臧雪莲1 g/L)、H-UVB+高剂量臧雪莲组(臧雪莲5 g/L)。藏雪莲水提取物于UVB辐射前1 h加入细胞培养基中,照射后18 h,收集细胞。通过台盼蓝染色观察细胞形态及死亡情况,MTS比色法检测细胞增殖情况,选出氧化损伤较轻组行酶标法检测超氧化物歧化酶(SOD)活力、谷胱甘肽(GSH)含量、丙二醛(MDA)含量、过氧化氢酶(CAT)活力。结果 L-UVB组吸光度(A)值较对照组降低(P<0.05),L-UVB+低剂量臧雪莲组、L-UVB+高剂量臧雪莲组A值较L-UVB组升高(P<0.05);H-UVB组A值较对照组降低(P<0.05),H-UVB+低剂量臧雪莲组、H-UVB+高剂量臧雪莲组A值较H-UVB组升高(P<0.05)。L-UVB组SOD活力、GSH含量、CAT活力较对照组降低,MDA含量较对照组升高(P<0.05);L-UVB+低剂量臧雪莲组GSH含量较L-UVB组降低、MDA含量较L-UVB组升高(P<0.05);L-UVB+高剂量臧雪莲组SOD活力、GSH含量、CAT活力较L-UVB组和L-UVB+低剂量臧雪莲组升高,MDA含量较L-UVB组和L-UVB+低剂量臧雪莲组降低(P<0.05)。结论低剂量藏雪莲水提取物对UVB辐射后Ha Ca T细胞无抗氧化损伤作用,高剂量藏雪莲水提取物对UVB辐射后Ha Ca T细胞有抗氧化损伤作用。
目的:研究藏雪莲水提取物减轻中波紫外线(UVB)照射人永生化角质形成细胞(Ha Ca T)后细胞凋亡的机制。方法:MTS法检测细胞增殖活性,台盼蓝染色观察细胞形态及死亡情况,酶标法测定超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活力、细胞丙二醛(MDA)及谷胱甘肽(GSH)含量,Western Blot及免疫荧光法检测细胞凋亡相关蛋白的表达,流式细胞仪检测细胞凋亡率、线粒体膜电位及细胞内钙离子(Ca2+)含量。结果:藏雪莲水提取物可以促进Ha Ca T增殖,降低细胞蓝染数量,降低SOD、CAT活性及GSH含量,增加MDA含量(P<0.05),升高B细胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)蛋白,降低Bcl-2相关x(Bax)蛋白及半胱氨酸蛋白酶3(Caspase-3)的表达(P<0.05),降低UVB辐射后Ha Ca T细胞凋亡及细胞内Ca2+浓度,升高线粒体膜电位。结论:藏雪莲水提取物能够降低Ha Ca T细胞凋亡来减轻UVB辐射后Ha Ca T细胞的凋亡。
