魏彩霞
- 作品数：9 被引量：17H指数：3
- 供职机构：扬州大学动物科学与技术学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划江苏省普通高校研究生科研创新计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 同源物种不同饲养层对鸡精原干细胞体外培养的影响被引量：2
- 2007年
- 分别以鸡胚来源的不同细胞为饲养层培养精原干细胞,比较3种不同的饲养层对精原干细胞体外培养的影响。结果显示:精原干细胞在鸡胚成纤维细胞饲养层和鸡睾丸支持细胞饲养层上存活时间较长、生长增殖状况良好。在鸡胚成纤维饲养层上传至四代,每代的AKP阳性克隆率分别为45%、40%、36%和21%。在以睾丸支持细胞为饲养层进行培养时传至三代,每代的AKP阳性克隆率分别是40%、32%、和22%。而以鸡肝细胞作为饲养层,精原干细胞未见有克隆形成,不能进行传代培养,表明鸡胚肝细胞饲养层不适合培养精原干细胞。
- 魏彩霞孙国波余飞李碧春
- 关键词：饲养层精原干细胞体外培养
- 不同培养方法对鸡精原干细胞体外培养效果的影响被引量：1
- 2008年
- 本研究从孵化至16 d的鸡胚睾丸中分离获取精原干细胞(Spermatogonial stem cells,SSCs),比较3种培养液、2种处理(有无饲养层)对SSCs生长的影响,并对SSCs保持特性进行鉴定。结果表明:在无饲养层细胞存在的条件下,DMEM、TCM199和RPMI1640培养液中,SSCs的存活时间分别为6.5、6.0和3.5 d,DMEM和TCM199培养液之间差异不显著(P>0.05),但两者与RPMI1640之间均存在极显著差异(P<0.01)。在有饲养层细胞存在的条件下,在DMEM、TCM199和RPMI1640培养液中,SSCs的存活时间分别为45.5、38.0和14.0 d,三者相互之间存在着极显著的差异(P<0.01)。在6种培养体系中,SSCs在培养体系Ⅳ中的存活时间和AKP阳性克隆率分别为(45.5±3.20)d和0.31±0.46,极显著地高于其他5种培养体系(P<0.01)。SSCs在培养体系Ⅳ中传代至1、2和3代时,AKP阳性克隆率分别为31.6%、20%和18%。SSCs形成的克隆,经AKP活性检测和SSEA-1免疫染色,均呈阳性。传代至第3代的SSCs,其染色体组型保持不变,为2n=78。这些结果表明,SSCs在以DMEM为基础培养基的培养体系Ⅳ中培养至第3代时,仍保持干细胞未分化特性。
- 吴信生孙思宇吴洪魏彩霞孙国波余飞赵文明徐琪陈国宏李碧春
- 关键词：体外培养传代
- 鸡精原干细胞的体外培养被引量：5
- 2008年
- 本试验旨在探索不同基础培养基对鸡精原干细胞(spermatogonial stem cells,SSCs)体外培养的影响,以期选出最佳的培养体系,并用其进行传代培养,以观察精原干细胞继代培养的特性。结果表明:在高糖DMEM培养体系和TCM199培养体系中,SSCs均能正常生长和增殖,在以DMEM和TC199为基础培养基的培养体系中,在SSCs的活率、克隆形成率上显著不差异,但SSCs在以DMEM为基础培养基的培养体系中生长情况较好,为最佳培养体系。在RPMI1640培养体系中,SSCs克隆形成率、活率较低,比前2种培养体系的效果差异显著。在添加细胞因子的培养基中精原干细胞在体外传至第3代。
- 孙思宇李碧春魏彩霞秦洁吴洪周冠月陈国宏
- 关键词：体外培养继代培养
- 鸡胚原始生殖细胞定向诱导分化成骨细胞的研究
- 2007年
- 探讨体外培养的鸡胚胎原始生殖细胞(EPGCs)的多向分化潜能。分别从发育至19期和28期的鸡胚胎性腺中获取EPGCs,体外培养传代。通过地塞米松、β-甘油磷酸钠和维生素C诱导EPGCs向成骨细胞分化,分别进行碱性磷酸酶改良钙钴法染色鉴定、钙结节Von Kossa's染色鉴定和免疫组化鉴定。结果表明:EPGCs被诱导21 d后,定向分化成成骨细胞,诱导率达到80%,碱性磷酸酶改良钙钴法染色、钙结节Von Kossa's染色和免疫组化鉴定均呈阳性,阳性率为75%-85%。由此可得出在诱导条件下,EPGCs体外可定向诱导分化为成骨细胞。
- 葛剑辉孙国波魏彩霞孙鹏翔李碧春
- 关键词：成骨细胞分化
- 鸡精原干细胞定向诱导分化特性的研究被引量：3
- 2008年
- 取孵化18～20d的鸡胚睾丸，分离精原干细胞（SSCs），培养传代3次后，用特异性化学物质定向诱导分化，以研究鸡培养传代后SSCs保持多向分化的潜能。①用特异的化学物质地塞米松、β-磷酸甘油钠、维生素C诱导鸡SSCs向成骨细胞分化，用Von Kossa＇s法、改良的钙钴法及免疫组化法进行成骨细胞鉴定；②用维甲酸（RA）、3-异丁基-1-甲基黄嘌呤（IBMX）诱导SSCs向神经元样细胞分化，甲苯胺蓝特异染色和组织化学鉴定。③用地塞米松、胰岛素、3-异丁基-1-甲基黄嘌呤（IBMX）诱导SSCs向脂肪细胞分化，特异性的油红O染色和脂肪细胞标志基因PPAR7检测。结果显示，SSCs被诱导15～21d后分化为成骨细胞，诱导形成率为80％；Von Kossa＇s染色细胞间布满黑色颗粒，具有矿化基质沉积；改良钙钴法碱性磷酸酶染色胞浆呈深棕色或深黑色，免疫组化染色细胞呈阳性。SSCs被诱导3～7d后分化为神经元样细胞，甲苯胺蓝染色阳性率为85％。SSCs被诱导7～21d后，分化成脂肪细胞，分化率为85％。诱导的脂肪细胞经特异性的油红O染色为阳性，并高表达脂肪细胞标志基因PPARγ。结论：在不同的诱导条件下，SSCs可被定向诱导分化为3种成体细胞，证明其培养传代后仍具有多向分化能力。
- 李碧春魏彩霞余飞何先红倪黎纲陈强王宵燕肖小君徐琪刘铁铮
- 关键词：精原干细胞成骨细胞神经元样细胞脂肪细胞分化
- 诱导鸡胚精原干细胞向成骨细胞分化的研究被引量：2
- 2007年
- 为了探讨体外培养的鸡胚精原干细胞（SSCs）的多向分化潜能，取孵化18～20d的鸡胚睾丸，无菌获取SSCs，体外培养传代，通过地塞米松、B一甘油磷酸钠、维生素C诱导鸡胚SSCs向成骨细胞分化，钙结节Von Kossa’s法、改良的钙钴法及免疫组化法进行成骨细胞鉴定。结果显示SSCs被诱导15～21d后分化为成骨细胞，诱导形成率为75％～80％；诱导后的细胞Von Kossa＇s染色可见细胞间布满黑色颗粒，提示有矿化基质沉积；改良钙钴法碱性磷酸酶染色胞浆呈深棕色或深黑色，免疫组化法染色细胞呈阳性。因此可以得出在不同的诱导条件下，SSCs体外可被定向诱导分化为成骨细胞，证明其具有多向分化潜能。
- 魏彩霞孙国波葛剑辉李碧春
- 关键词：成骨细胞分化
- mLIF、bFGF和SCF对鸡精原干细胞体外增殖的影响被引量：3
- 2007年
- 采用MTT法分别检测mLIF、bFGF和SCF 3种细胞因子在单独添加和联合使用时对体外培养条件下的SSCs增殖的影响。结果表明:①3种细胞因子分别单独添加时,各实验组增殖效应与对照组比较差异显著(P<0.05);②3种因子联合使用时,低剂量组合共同促进SSCs的增殖,高剂量组合则抑制SSCs的增殖;③SCF、bFGF和mLIF的适宜剂量分别为10～20、10～20和10～15 ng/mL。
- 魏彩霞孙思宇孙国波赵文明李碧春
- 关键词：精原干细胞MTT细胞因子
- 精原干细胞体外培养及影响因素被引量：3
- 2007年
- 影响精原干细胞体外培养的主要因素有温度、饲养层细胞、细胞因子包括分化抑制因子(LIF)和生长因子(SCF和bFGF)等。本文拟对其研究进展和精原干细胞体外培养所涉及到的精原干细胞的鉴定和分离纯化技术的研究进展进行综述。
- 孙思宇魏彩霞李碧春
- 关键词：精原干细胞体外培养细胞因子分离纯化
- 鸡胚精原干细胞定向诱导分化为成骨细胞的初探被引量：1
- 2007年
- 研究体外定向诱导鸡胚精原干细胞(Spermatogonial stem cells,SSCs)向成骨细胞分化的能力。采用地塞米松+β-磷酸甘油钠+维生素C组成的诱导液对鸡胚精原干细胞进行诱导,利用Von Kossa’s法、改良的钙钴法及免疫组化I型胶原(CollagenⅠ)进行成骨细胞特性鉴定。结果表明:诱导后成骨细胞形成率达到82%,诱导后的细胞经Von Kossa’s染色可见细胞间布满黑色颗粒,提示有矿化基质沉积;改良钙钴法碱性磷酸酶染色胞浆呈深棕色或深黑色,免疫组化法染色细胞呈阳性。因此可以得出:鸡精原干细胞(SSCs)具有向成骨细胞分化的能力。
- 孙国波葛剑辉魏彩霞孙鹏翔戴建明李碧春
- 关键词：精原干细胞成骨细胞分化
