黄丛林
- 作品数：178 被引量：1,091H指数：18
- 供职机构：北京市农林科学院更多>>
- 发文基金：北京市科委项目国家自然科学基金国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学轻工技术与工程经济管理更多>>
- 环介导等温扩增技术检测菊花中番茄不孕病毒被引量：15
- 2010年
- 【目的】环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)是一种特异、灵敏、快速的新型基因检测技术。本研究拟用该技术建立菊花中番茄不孕病毒(TAV)的检测方法。【方法】设计能识别TAV CP序列6个特定区域的4种LAMP特异引物,对MgCl2、dNTPs、甜菜碱等LAMP反应条件进行优化,利用新建的LAMP法检测TAV,比较LAMP和RT-PCR2种不同方法的检测灵敏度。【结果】建立了检测番茄不孕病毒的LAMP技术;LAMP比RT-PCR具有灵敏度更高、快速、简便等优点。【结论】建立的LAMP技术能快速、准确、简便地检测出菊花中的番茄不孕病毒。
- 刘佳黄丛林吴忠义张秀海王永勤
- 关键词：菊花番茄不孕病毒反转录聚合酶链式反应
- 利用转基因技术培育耐旱节水的高羊茅草坪草
- 高羊茅(Festuca arundinacea Schreb)又称苇状羊茅,系禾本科(Gramineae)羊茅属(Festuca)植物, 在欧美是一种优良的牧草。由于它具有耐瘠薄、较抗病、适应性广等特点,在城市绿化和运动...
- 李志亮梁蕊芳张秀海黄丛林李春华吴忠义
- 文献传递
- 白三叶转基因研究进展被引量：8
- 2009年
- 综述了白三叶植株再生体系的建立及转抗病毒、抗虫、抗逆、品质改良、植物疫苗、矿质营养吸收、植物激素合成等基因方面的研究进展。此外,还对转基因白三叶的发展前景作了简要展望。
- 李志亮邢浩春杨清吴忠义张秀海黄丛林
- 关键词：白三叶植株再生
- 菊花5种病毒及类病毒多重RT⁃PCR检测方法的建立
- 2023年
- 菊花是世界最重要的园艺作物之一,兼具有茶用、药用、食用及观赏等多种经济价值。我国是栽培菊花的起源地,也是主要种植生产区。病毒病害是菊花生产过程中最主要病害,目前已知的菊花病毒及类病毒有20多种,对菊花产业危害巨大。建立快速、高效的检测方法是病害防控的必要条件。前期调查显示番茄斑萎病毒(Tomato spotted wilt orthotospovirus,TSWV)、番茄不孕病毒(Tomato aspermy virus,TAV)、菊花B病毒(Chrysanthemum virus B,CVB)、菊花矮化类病毒(Chrysanthemum stunt viroid,CSVd)和菊花褪绿斑驳类病毒(Chrysanthemum chlorotic mottle viroid,CChMVd)是北京地区菊花中主要病毒及类病毒种类。自NCBI数据库下载以上病毒/类病毒的基因序列,利用不同病毒保守区域,设计开发出特异性引物,建立了5种病毒/类病毒同时检测的多重RT⁃PCR体系;并对反应体系中引物对的含量配比、退火温度、模板含量等因子进行了优化。试验结果显示,TSWV、TAV、CVB、CChMVd、CSVd的引物对浓度分别为300 nmol/L、50 nmol/L、200 nmol/L、700 nmol/L、600 nmol/L,模板用量0.5 ng/μL,退火温度55.3℃时,可以同时扩增出片段大小为分别485 bp、376 bp、292 bp、220 bp、110 bp的目的条带,特异性良好,结果判读简单清晰。进一步的比较分析显示,其与单一病毒检测的RT⁃PCR体系的检测灵敏性相当。综上,本研究构建的多重RT⁃PCR体系可以高效、快速、灵敏的检测菊花中常见的5种病毒及类病毒,并且检测成本大幅降低,为病毒的快速、低成本检测提供了方法。
- 张利英王森陈东亮喻锌姜宝龙程钰涵李彦慧李彦慧
- 关键词：菊花病毒类病毒
- 通过叶绿体基因工程在烟草中合成中长链羟基脂肪酸聚酯被引量：4
- 2005年
- 中长链羟基脂肪酸聚酯(medium-chain-length-PHAs,mcl-PHAs)属于微生物聚酯.PHA合酶(PHAsynthase,由phaC基因编码)和3-羟酰基-酰基转移蛋白-辅酶A转移酶(3-hydroxyacyl-acylcarrierprotein-coenzymeAtransferase,由phaG基因编码)是mcl-PHAs生物合成途径中的关键酶.以aadA(氨基糖苷-3′-磷酸转移酶)基因做筛选标记,分别构建了含phaC2基因的单价叶绿体转化表达载体pTC2以及同时嵌合phaC和phaG基因的双价叶绿体转化表达载体pTGC.通过PDS1000/He基因枪转化法转化烟草,获得具有壮观霉素抗性的叶绿体型转基因烟草植株,PCR和SouthernBlot结果表明,外源基因确已整合进烟草叶绿体基因组中且基本达到同质化.气相色谱法检测转基因株系中的mcl-PHAs含量最高达4.8mg/g干重,合成的PHAs单体主要成分为3-羟基辛酸(3-hydroxyoctanoate,3-HO)和3-羟基癸酸(3-dydroxydecanoate,3-HD).透射电子显微镜观察到转基因烟草叶片叶绿体中确有PHAs颗粒累积.
- 王玉华张秀海吴忠义杨清陈国强吴琼黄丛林
- 关键词：叶绿体基因工程长链转基因烟草植株叶绿体转化基因枪转化法磷酸转移酶
- 菘蓝组培再生体系的建立被引量：1
- 2016年
- 以菘蓝(Isatis indigotica)无菌苗的叶片和叶柄为外植体,分别接种到添加不同生长调节剂浓度的MS培养基上,研究不同生长调节剂配比对菘蓝愈伤组织诱导与分化的影响,建立菘蓝组培再生体系。结果表明,叶片是菘蓝愈伤组织形成的最佳外植体,菘蓝愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L,愈伤组织分化的最佳培养基为MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA 1.0 mg/L。以1/2MS培养基添加0.1 mg/L NAA可使再生植株的生根率达到92.3%。
- 李志亮叶嘉邢浩春王玉文焦云红胡亚新黄丛林
- 关键词：无菌苗培养基愈伤组织再生植株
- 多重RT-PCR同时检测菊花中3种病毒和2种类病毒的方法
- 本发明公开了一种多重RT‑PCR同时检测菊花中3种病毒和2种类病毒的方法，采用如下引物对组合：CSVd‑F和CSVd‑R，其核苷酸序列如SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2所示；CChMVd‑F和CChMVd‑...
- 陈东亮王森黄丛林罗昌刘华程曦
- 文献传递
- 调控葡萄果实成熟的脱落酸(ABA)信息传递--器官间、果实组织水平上的信息传递和果实中ABA亚细胞定位
- 脱落酸(ABA)是葡萄果实成熟的启动因子.该论文以蛇龙珠、柔丁香和红富士葡萄为试材,重点对调控果实成熟的ABA信号起源、果实组织间和组织内ABA的区隔化,以及亚细胞水平上ABA的免疫化学定位进行了研究.
- 黄丛林
- 关键词：葡萄果实成熟脱落酸信息传递亚细胞定位
- ATHK1基因调节拟南芥渗透胁迫信号转导过程被引量：11
- 2004年
- 以拟南芥ATHK1基因T-DNA插入所产生的缺失突变体和野生型WS(Wassilewskija)生态型为材料,分析了它们在生理和基因表达方面的差异。结果表明突变体的离体叶片失水率明显大于野生型;在30％PEG-6000胁迫后,野生型和ATHK1突变体的细胞膜离子外渗率比胁迫前分别增加了50％和80％。PEG胁迫48 h时突变体的萎蔫程度明显大于野生型WS。以上结果说明ATHK1突变体的抗渗透胁迫能力低于野生型,即ATHK1基因参与了拟南芥适应逆境的调节反应。利用DDRT-PCR技术研究二者在PEG胁迫36 h后的基因表达差异,分离到9个在野生型中被PEG诱导表达而在突变体中未被诱导的参与逆境应答的基因片段,其中包括MAPKKK18和丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶基因,即ATHK1基因失活引起下游基因响应渗透胁迫的能力减弱,进一步说明ATHK1基因参与拟南芥适应逆境的调节反应,并且ATHK1可能在逆境信号转导组分MAPK的上游起作用,很可能是植物体中的渗透感受器。
- 郝岗平吴忠义陈茂盛曹鸣庆Georges Pelletier黄丛林杨清
- 关键词：拟南芥生理差异渗透感受器
- 鉴定菊花霜霉病被引量：1
- 2017年
- 多年来，我们一直有一项任务，就是收集、鉴定菊花的各种病害。从文献中得知菊花病害中，菊花霜霉病是个重要的病害，但是在北京却一直没能见到。
- 李明远黄丛林
- 关键词：霜霉病菊花病害
