丛海峰
- 作品数:10 被引量:18H指数:2
- 供职机构:苏州大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划国家高技术研究发展计划更多>>
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- 家蚕TIME-EA4:起源于Cu/Zn SOD的新型酯酶
- 家蚕滞育发育生物钟蛋白时间间隔测定酶EA4(Esterase A4)与家蚕滞育卵的活化密切相关,它具备Cu/Zn SOD活性和酯酶瞬时ATPase活性。作者所在研究室已经克隆了野桑蚕和棉铃虫的TIME-EA4同源蛋白,本...
- 王文栋徐丽王玉军丛海峰司马杨虎徐世清
- 关键词:家蚕滞育同源蛋白酯酶活性
- 野桑蚕铜锌超氧化物歧化酶基因的克隆分析与原核表达被引量:9
- 2007年
- 超氧化物歧化酶是野桑蚕保护酶体系的重要酶类。利用RT-PCR方法克隆出野桑蚕铜锌超氧化物歧化酶(Cu/Zn-SOD)cDNA(EMB I登陆号:AM410997),其开放阅读框ORF长465 bp,编码154个氨基酸。同源性及系统进化分析表明,推导出的氨基酸序列与3种果蝇的同源性平均为69.3%,与线虫为57%,各物种中与Cu/Zn结合的残基高度保守。利用ExPASy的ScanProsite以及PSort和TMpred对此编码的蛋白质结构和功能域分析,预测出其具有2段Cu/Zn-SOD特异序列,且该蛋白不存在信号肽以及跨膜区。将Cu/Zn-SOD cDNA克隆到pET-28 a(+)表达载体,测序鉴定后以IPTG诱导表达,SDS-PAGE电泳鉴定其表达的融合蛋白质分子量为19.4 kD。
- 丛海峰徐世清司马杨虎张升祥王更先董航刘莹柳学广
- 关键词:野桑蚕铜锌超氧化物歧化酶原核表达
- 家蚕滞育生物钟蛋白质基因ea4的cDNA序列分析
- 家蚕滞育生物钟是依赖卵内酯酶A4(EA4)的倒计时型生物钟。EA4是具时间间隔测定酶(Time Interval Measuring Enzyme,TIME)功能的蛋白质。根据家蚕EA4测定的氨基酸序列,以3d龄雌蛹脂肪...
- 柳学广徐世清司马杨虎吴阳春刘莹丛海峰王玉军
- 关键词:家蚕CDNA序列
- 文献传递
- 鳞翅目昆虫测时蛋白质EA4的基因结构和功能研究
- 鳞翅目昆虫模式昆虫家蚕滞育卵内酯酶A4 (EA4)的瞬时ATPase活性具有滞育生物钟的作用。我们用基因克隆、RACE (RapidAmplification of cDNA End, RACE)和序列拼接等方法,研究了...
- 徐世清王英丛海峰司马杨虎王玉军张升祥朱晓苏宋艳
- 关键词:家蚕基因克隆鳞翅目昆虫
- 文献传递
- 家蚕滞育生物钟蛋白质基因ea4结构分析
- EA4是具时间间隔测定酶(Time Interval Measuring Enzyme,TIME)功能的蛋白质。根据获得的家蚕ea4 基因完整的cDNA序列,利用生物信息学方法和家蚕基因组数据,预测了ea4基因的内含子基...
- 刘莹徐世清司马杨虎吴阳春王玉军柳学广丛海峰
- 关键词:家蚕内含子
- 文献传递
- 家蚕TIME-EA4:起源于Cu/Zn SOD的新型酯酶(英文)
- 家蚕滞育发育生物钟蛋白时间间隔测定酶EA4(Esterase A4)与家蚕滞育卵的活化密切相关,它具备Cu/Zn SOD活性和酯酶瞬时ATPase活性。我们研究室已经克隆了野桑蚕和棉铃虫的TIME-EA4同源蛋白,本文又...
- 王文栋徐丽王玉军丛海峰司马杨虎徐世清
- 文献传递
- 环境激素2,4—二氯苯酚对家蚕生殖发育的影响
- 2,4—二氯苯酚(2,4-DCP)是重要的化工原料,广泛应用于生产和生活,同时是一种被确认的境激素,能通过多种途径排放到自然环境,己被列入中国环境优先污染物名单。为了探讨环境激素对鳞翅目昆虫的影响,用添加2,4-DCP ...
- 丛海峰裔洪根徐世清戴璇颖陈息林王玉军杨仙兰
- 关键词:家蚕生长发育
- 文献传递
- 家蚕滞育生物钟蛋白质EA4基因的结构以及时空表达研究
- 家蚕是卵滞育昆虫,蚕业生产上通过低温冷藏和盐酸处理等方法解除蚕卵滞育。酯酶A4/(Esterase A4,EA4/)是一种能够感受蚕卵活化所需低温时间或酸刺激而发生蛋白质空间结构变化,获得瞬时ATPase活性的时间间隔测...
- 丛海峰
- 关键词:家蚕滞育生物钟
- 文献传递
- 家蚕滞育生物钟基因ea4的原核表达
- EA4是具时间间隔测定酶(Time Interval Measuring Enzyme,TIME)功能的蛋白质。家蚕ea4基因cDNA 全长519bp,本研究从家蚕脂防体组织总RNA中通过PT-PCR克隆ea4基因的完整...
- 丛海峰徐世清司马杨虎吴阳春王玉军柳学广刘莹
- 关键词:家蚕原核表达
- 文献传递
- 家蚕滞育生物钟蛋白质EA4基因的cDNA克隆和序列分析被引量:12
- 2007年
- 家蚕滞育生物钟是依赖卵内酯酶A4(EA4)的倒计时型生物钟。EA4是具时间间隔测定酶(time interval measuring enzyme,TIME)功能的蛋白质。根据家蚕EA4测定的氨基酸序列,以第3天龄雌蛹脂肪体和卵巢总RNA为模板,利用简并引物RT-PCR方法,得到308 bp的部分ea4序列,其1-144 nt和145-308 nt分别与家蚕全基因组鸟枪序列(whole genome shotgun sequence,WGS)AADK01019126.1的5595-5738 nt及WGS AADK01014467.1的8636-8473 nt有95%和98%的一致性。根据获得的ea4基因片段序列,利用生物信息学方法和家蚕基因组数据预测了ea4基因的完整cDNA序列,设计特异引物,以雌蛹脂肪体和卵巢RNA为模板,进行RT-PCR得到完整的cDNA。ea4基因的cDNA全长519 bp,其中1-48 bp为信号肽序列,49-519 bp编码的氨基酸与蛋白质纯化后测序EA4部分的一致性为98%,C末端存在3个氨基酸的差异,其中第156位为新确定氨基酸。
- 王玉军徐世清司马杨虎吴阳春刘莹柳学广丛海峰
- 关键词:家蚕滞育CDNA序列