余淦
- 作品数：8 被引量：14H指数：3
- 供职机构：华中科技大学同济医学院附属同济医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技重大专项江西省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 连接桥粒斑珠蛋白通过调节HIF2α并降低其稳定性抑制肾细胞癌的肿瘤发生
- 2022年
- 背景与目的低氧诱导因子(hypoxia-inducible factor 2α,HIF2α)活性增高常见于肾透明细胞癌(clear cell renal cell carcinoma,ccRCC)的进展过程。HIF2α在ccRCC中的功能和作用机制仍不清楚。本研究阐释了连结桥粒斑珠蛋白(junction plakoglobin,JUP)和HIF2α在ccRCC中的作用。方法采用亲和纯化联合质谱(affinity purification and mass spectrometry,AP-MS)、谷胱甘肽-S-转移酶(glutathione-s-transferase,GST)沉降和免疫共沉淀(co-immunoprecipitation,Co-IP)法筛选和鉴定出可与HIF2α相互作用的蛋白质。采用实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)和Western blotting法检测人ccRCC样本中JUP的表达情况。采用荧光素酶报告基因、染色质免疫沉淀(chromatin immunoprecipitation,ChIP)、环己酰亚胺追踪实验、泛素化检测研究JUP对HIF2α活性的调节。采用细胞计数试剂盒-8(Cell Counting Kit-8,CCK-8)检测、集落形成实验、transwell迁移实验、异种移植瘤模型研究JUP敲减或过表达对肾癌细胞致瘤活性的影响。结果我们的研究发现,JUP是一种新的HIF2α结合蛋白,通过将VHL(von Hippel-Lindau,VHL)和组蛋白去乙酰化酶1/2(histone deacetylases 1/2,HDAC1/2)招募到HIF2α并调节其稳定性和转录活性来发挥重要作用。在体内和体外实验中,敲减JUP可促进肾细胞癌的致瘤活性;相反,JUP过表达则可抑制肾细胞癌的致瘤活性。另外,在ccRCC临床样本中JUP低表达,而且其低表达与低氧评分升高及预后更差相关。结论本研究表明JUP在ccRCC进展过程中通过调节HIF2α信号通路发挥重要作用,JUP可作为一个潜在的治疗靶点。
- 陈科曾瑾孙旖欧阳为余淦余淦张杨军周辉肖巍胡峻珲姚炜敏肖克峰肖巍陈志强叶章群邢金春
- 关键词：肾细胞癌转录活性
- “一杯法”：一种前列腺按摩液收集方法被引量：1
- 2017年
- 目的建立一种简便、快速、可靠的收集前列腺按摩液（EPS）的新方法。方法35条Beagle犬，随机分为7组，每组5条。构建尿路感染模型，收集尿液、EPS和前列腺组织进行细菌培养和白细胞镜检，同时取尿道和前列腺组织进行组织病理和电镜检查及尿道黏膜刺激性评估。结果细菌学检查：EPS结果表明第3组阳性，其余4组均阴性；尿液结果第1～2组均为阴性，第3～5组均为阳性。EPS白细胞镜检，第6组白细胞计数[（3.60±0.55）个/高倍镜视野]与第7组[（3.33±0.41）个/高倍镜视野]比较差异无统计学意义（t=0.871，P=0.409）。组织病理和电镜检查证实上述结果。尿道黏膜刺激性评分结果显示，洁悠神（JUC）对黏膜具有极轻微刺激性。结论经JUC尿道膜收集的EPS可以排除被尿道污染（假阳性）以及被尿道膜干扰（假阴性）的可能性，＂一杯法＂具有可行性。
- 何玮李路袁红方陈志强徐华蓝儒竹余淦叶章群
- 关键词：前列腺按摩液前列腺炎
- Fibulin-5基因慢病毒表达载体的构建与鉴定
- 2012年
- 目的构建Fibulin-5基因的慢病毒表达载体。方法从pBluescript-Fibulin5质粒中克隆出Fibulin-5基因,将其连同慢病毒载体质粒pCDH-CMV-MCS-EF1双酶切,使目的基因连接到载体质粒中,构建成重组慢病毒载体质粒pCDH-F5。对重组慢病毒载体质粒pCDH-F5进行酶切鉴定和测序鉴定后,制备包装病毒并感染膀胱癌细胞系5637,检测细胞中Fibulin-5基因的表达水平。结果构建的重组慢病毒载体质粒pCDH-F5进行PCR及酶切鉴定,获得的克隆和酶切产物与预计的基因片段大小一致。所获得的Fibulin-5基因经测序后与报道序列对比仅有1处突变,且属同义突变,说明pCDH-F5中携带正确的Fibulin-5基因。通过感染5637细胞,发现构建的慢病毒转染效率达95%以上,且能有效表达Fibulin-5基因。结论实验成功构建了Fibulin-5基因的慢病毒表达载体。
- 李恒肖巍余淦杨洋徐华叶章群
- 关键词：FIBULIN-5慢病毒表达载体
- 沙芭特在非细菌性前列腺炎症中的抗炎、抗纤维化及促进上皮细胞凋亡作用的研究被引量：5
- 2017年
- 目的探讨锯叶棕果实提取物沙芭特在非细菌性前列腺炎中的效应及其机制。方法前列腺上皮细胞RWPE-1经M1表型的单核巨噬细胞THP-1细胞上清液共培养,治疗组加用沙芭特(10μg/ml)培养,MTS检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,RT-PCR、ELISA及Western blot检测炎症、纤维化及凋亡相关的蛋白分子(IL-1β、IL-17、TNF-α、Fas、COX2、Bax、TGF-β、DDR1、α-SMA及CollagenⅠ)的表达。消痔灵前列腺注射诱导大鼠非细菌性前列腺炎模型,用von Frey纤维检测沙芭特治疗前后各组大鼠的痛觉敏感性,然后麻醉SD大鼠,腔静脉取血后摘取前列腺组织并称重,免疫组化及ELISA检测炎症因子的表达,masson染色检测纤维化。结果沙芭特抑制RWPE-1的增殖并促进其凋亡。M1表型THP-1条件培养液能促进上皮细胞表达IL-1β、TNF-α及COX-2,沙芭特处理能抑制炎症刺激所致的炎症因子表达,Western blot检测表明沙芭特处理能抑制COX-2、DDR1、SMA及CollagenⅠ的表达,增加Fas及Cleaved-caspase 3的表达。消痔灵100μl每侧叶注射可以成功诱导前列腺炎症模型,沙芭特60mg/kg能减少大鼠前列腺组织炎症因子的表达,缩小前列腺体积,降低大鼠痛觉敏感性。结论沙芭特能抑制前列腺上皮细胞RWPE-1的增殖并促进其凋亡,减小前列腺体积,抑制炎症因子及纤维化相关分子的表达,减轻前列腺炎症及纤维化从而起到治疗作用。
- 杨涛吴柏霖周辉刘培军姚炜敏曾瑾余淦徐华叶章群
- 人KLF4基因克隆及重组KLF4慢病毒表达载体的构建被引量：1
- 2013年
- 背景:KLF4基因在细胞分化过程中有重要作用。目的:构建KLF4基因慢病毒过表达载体。方法:聚合酶链反应扩增(PCR)目的基因KLF4后插入慢病毒表达载体pCDH中,构建重组载体pCDH-KLF4。通过PCR、双酶切和DNA测序方法对其鉴定,共同转染293NT细胞包装病毒,荧光显微镜观察报告基因的表达情况,收集病毒上清,测定病毒的滴度。将重组的慢病毒感染5637细胞,RT-PCR检测KLF4mRNA的表达。结果与结论:重组慢病毒表达载体质粒经限制性酶切和DNA测序分析证实重组慢病毒载体pCDH-KLF4的插入序列完全正确,重组慢病毒载体感染5637细胞后,细胞内KLF4mRNA高表达。结果证实,实验成功构建KLF4基因慢病毒过表达载体。
- 王博涵余虓余淦李恒肖巍徐华叶章群
- 关键词：慢病毒载体DNA测序泌尿系肿瘤
- 微小RNA-34a通过靶向CD44调节膀胱癌细胞J82周期被引量：4
- 2015年
- 目的观察微小RNA-34a(miR-34a)对膀胱癌细胞J82周期的影响,并探索其中的机制。方法于J82中转染miR-34a前体或miR-34a抑制物并验证转染效率,结合此前研究报道和生物信息学预测miR-34a的靶点,后通过荧光素酶报告实验验证miR-34a靶标基因CD44,通过Western blot和实时定量PCR方法检测CD44及其周期相关蛋白及信使RNA表达水平的变化,利用流式细胞仪检测膀胱癌细胞J82周期的变化。结果 miR-34a在膀胱癌细胞J82和组织中表达下调,转染miR-34a前体和抑制物后,获得满意的转染效果;双荧光素酶报告实验证实miR-34a对CD44的3'UTR活性显著调节,并伴随相关周期相关因子表达水平变化,同时观测到其对膀胱癌细胞J82周期的影响。miR-34a mimics明显降低膀胱癌细胞J82中CD44的表达,miR-34a inhibitor明显上调膀胱癌细胞J82中CD44的表达;CD44可以部分回复mir-34a对膀胱癌细胞J82周期的影响。结论微小RNA-34a通过直接靶向CD44调节膀胱癌细胞J82周期的变化。
- 余淦许凯许世安张晓岚黄倩华郎斌
- 关键词：CD44细胞周期膀胱癌
- 尿道膜法分型诊断前列腺炎临床分析被引量：4
- 2017年
- 目的采用尿道膜"一杯法"对慢性前列腺炎进行分型诊断,探讨其诊断准确性,安全性及费用。方法慢性前列腺炎患者180例,随机选择其中60例进行"四杯法"检查;另外120例随机分入"一杯法"试验组(60例)和安慰剂组(60例)进行双盲研究;采集受试者的尿液和前列腺按摩液进行镜检和细菌学检查;同时对患者进行疼痛评分,收集受试者处理前后血液样本行血常规和肝肾功能检查,进行安全性评估;收集"四杯法"和"一杯法"的操作步骤和费用数据;结果 "一杯法"试验组Ⅱ型、ⅢA型和ⅢB型检出率分别为7.14%、48.22%和44.64%,"四杯法"组Ⅱ型、ⅢA型和ⅢB型分别为15.00%、46.67%和38.33%,两组数据比较差异无统计学意义(P>0.05)。"一杯法"安慰剂组Ⅱ型、ⅢA型和ⅢB型诊断准确率分别为43.33%、36.67%和20.00%。"一杯法"试验组、"四杯法"组与"一杯法"安慰剂组Ⅱ型和ⅢB型比较,差异有统计学意义(P<0.05)。"一杯法"两组受试者血常规、肝肾功能均在正常范围内,疼痛评分分别为(2.90±1.29)分和(3.00±1.05)分,差异无统计学意义(P>0.05)。"一杯法"法操作步骤和费用明显少于"四杯法"。结论尿道膜"一杯法"能更准确对慢性前列腺炎进行分型诊断,减少因假阳性而导致的误诊,且操作简化,费用低。
- 李路何玮袁红方陈志强徐华蓝儒竹余淦叶章群
- 关键词：慢性前列腺炎分型诊断前列腺按摩液
- 家族遗传性结节硬化症合并肾血管平滑肌脂肪瘤3例报告
- 2017年
- 系统性结节硬化症（tuberous sclerosis,TSC）又称为Bournerille病,是一种常染色体显性遗传性疾病,其发病率约为1/6 000~1/10 000,是一组侵犯皮肤、神经、心脏、肺脏和肾等多器官、多系统的综合征[1]。本文回顾性分析了我院收治的3例临床新发患者的临床资料,对TSC的流行病学、诊断、鉴别诊断及治疗进行了总结。
- 徐楠吴官清马学友葛悦萍余淦王蒙杨春光王志华叶章群
- 关键词：结节硬化症ANGIOMYOLIPOMA肾错构瘤保留肾单位手术
