单振菊 作品数:11 被引量:25 H指数:3 供职机构: 华南农业大学资源环境学院 更多>> 发文基金: 广东省自然科学基金 广东省科技攻关计划 广东省科技计划工业攻关项目 更多>> 相关领域: 农业科学 更多>>
柑桔黄龙病病原β-操纵子DNA片段的克隆与序列分析 单振菊 邓晓玲 郭恒 冯旭祥关键词:柑桔黄龙病 分子水平 克隆与序列分析 操纵子 文献传递 沙田柚黄龙病病原16S rDNA片段的克隆与序列分析 被引量:10 2006年 采集田间表现斑驳症状的沙田柚叶脉,用CTAB法提取总DNA。根据柑橘黄龙病病原16S rDNA的核苷酸序列设计引物P1/P2,进行PCR扩增,获得1条大小为1 167 bp的片段。酶切分析显示,该片段可被切成大小分别约为640 bp和520 bp的2个片段。扩增产物经纯化,与pM D 18-T V ector连接,转化大肠杆菌(E scherich ia coli)DH 5α,筛选克隆重组子。对PCR产物进行测序及序列分析,结果表明,与柑橘黄龙病病原亚洲种16S rDNA的同源性为99%,与非洲种的同源性为97%,与美洲种的同源性为96%。认为,沙田柚的斑驳症状是由黄龙病病原引致的,称之为沙田柚黄龙病。该沙田柚黄龙病病原属于柑橘黄龙病病原亚洲种(L iberobacter as iaticus)中的一个成员。系统进化树分析显示,沙田柚黄龙病病原与中国柑橘黄龙病病原亲缘关系最近,推测是直接来自中国柑橘黄龙病病原。 冯震 单振菊 周根 邓晓玲关键词:沙田柚 黄龙病 RDNA 柑桔黄龙病的分子检测技术与应用研究 邓晓玲 单振菊 李菁 冯震文献传递 沙田柚黄龙病病原DNA片段的克隆与序列分析 冯震 单振菊 周根 邓晓玲关键词:黄龙病 沙田柚 克隆与序列分析 DNA 文献传递 南方5省区柑橘黄龙病病原16S rDNA片段的克隆与序列分析 被引量:18 2008年 采集了广东、广西、贵州、福建、云南5省区的8个柑橘黄龙病样品,利用黄龙病病原的特异引物对其16SrD—NA片段进行PCR扩增,将其扩增产物纯化、回收,并与pMD18-TVector连接,转化大肠杆菌(Esherichia coli)DH5α,筛选含有黄龙病病原16SrDNA片段的阳性克隆,进行序列测定。利用生物信息学软件对所克隆的序列进行同源性分析和聚类分析.结果表明:来自我国南方5省区的柑橘黄龙病病原16SrDNA的序列与亚洲种(L22532)的同源性为96.9%~98.6%,与非洲种(L22533)的同源性为94.5%~97.1%,与美洲种(AY742824)的同源性为92.5%-94.2%.表明我国南方5省区柑橘黄龙病均属于亚洲种,但在亚洲种内部不同地区的黄龙病病原也发生了微小的变异,其中福建厦门和云南个旧的2个菌株变异较大. 单振菊 冯震 周根 邓晓玲关键词:柑橘黄龙病 RDNA 黄龙病PCR检测试剂盒的应用 李菁 邓晓玲 周佳暖 单振菊关键词:黄龙病 PCR 检测试剂盒 文献传递 沙田柚黄龙病病原β-操纵子DNA片段的克隆与序列分析 被引量:5 2005年 采集表现斑驳症状的沙田柚叶片,根据柑桔黄龙病特异保守区域β-操纵子序列设计引物,通过对其病叶脉总DNA进行PCR扩增、扩增产物纯化、与pMD18-T Vector连接、转化大肠杆菌(Escherichia coli)DH 5a菌株、筛选阳性克隆重组子、重组子测序,并将测序结果与柑桔黄龙病病原β-操纵子部分DNA相应序列进行比较.结果表明,引起沙田柚斑驳症状的病原与亚洲柑桔黄龙病原(Liberobacter asiaticum)相应序列的同源率为99%,而与非洲柑桔黄龙病病原的同源率仅为79.9%.因此,从分子水平上证明沙田柚斑驳症状是由黄龙病病原侵染所致,该病原属于亚洲种中的一个成员. 单振菊 郭恒 冯震 邓晓玲关键词:沙田柚 黄龙病 多聚酶链式反应 柑桔黄龙病的分子检测技术与应用研究 柑桔黄龙病是一种世界性的毁灭性病害,主要发生于东南亚和非洲的40多个国家,严重阻碍了这些国家和地区柑桔产业的生产和发展.本文介绍了不同地区样品的检测、不同品种样品的检测、不同症状样品的检测以及未显症状样品的检测。 邓晓玲 单振菊 李菁 冯震关键词:柑桔黄龙病 分子检测 检测试剂盒 文献传递 南方五省柑桔黄龙病病原DNA的克隆与序列分析 本论文以从广东连山、广东中山、广东廉江、广西北海、贵州从江、福建厦门、云南建水、云南个旧等地采集的表现典型症状的柑桔黄龙病病株为材料,对其抽提柑桔叶脉总DNA,利用柑桔黄龙病病原特异引物01I/012c和A2/J5两对引... 单振菊关键词:柑桔 黄龙病 基因克隆 文献传递 柑桔黄龙病的分子检测技术与应用研究 邓晓玲 单振菊 李菁 冯震文献传递