吕娅歆
- 作品数：18 被引量：63H指数：6
- 供职机构：军事医学科学院生物工程研究所更多>>
- 发文基金：国家杰出青年科学基金国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 基于Cre/LoxP系统的Smad2条件基因剔除小鼠的建立
- Smads家族是最新发现的TGF-β信号转导途径中一个重要的新基因家族,它们可以直接将TGF-β信号从细胞膜转移到细胞核内。TGF-β信号分子通过跨膜苏氨酸、丝氨酸激酶受体复合体进行信号转导。SMAD2属于受体激活的SM...
- 周江程萱孙彦洵吕娅歆程静黄培堂黄翠芬杨晓
- 文献传递
- 软骨细胞特异性Smad4基因剔除导致小鼠长骨发育异常
- 骨骼的形成方式包括:膜内成骨和软骨内成骨。软骨内成骨是一个软骨组织被骨组织代替的过程,即在将要形成骨骼的部位先形成软骨组织,然后,软骨组织中央的软骨细胞发生肥大分化、凋亡,随之成骨细胞、破骨细胞、血管内皮细胞和间充质细胞...
- 张继帅郝振明谭晓红王友亮毛春明吕娅歆程萱杨晓
- 关键词：基因剔除小鼠SMAD4软骨细胞生长板
- 文献传递
- 角质细胞特异性表达Cre重组酶转基因小鼠的建立被引量：17
- 2003年
- 构建了含有角质细胞特异性角质素 5启动子、Cre重组酶基因和人生长激素基因polyA的转基因载体pK5 Cre hGH。以显微注射的方法将 4 2kb的转基因片段K5 Cre hGH引入小鼠基因组 ,共注射 72 0枚受精卵 ,其中 6 95枚移植至 2 9只假孕母鼠的输卵管中发育 ,获得子代小鼠 48只 ,经基因型鉴定有 12只小鼠在其基因组上整合有Cre基因 ,整合率为 2 5 %。将带有Cre重组酶基因的小鼠与基因组上携带loxP位点的Smad4条件基因打靶小鼠杂交以检测Cre重组酶组织特异性表达情况以及介导重组的功能。结果表明 ,K5 Cre转基因小鼠只在皮肤组织中表达Cre重组酶并能在体内成功地介导loxP位点的重组。
- 毛春明杨晓程萱吕娅歆周江黄翠芬
- 关键词：CRE转基因小鼠组织特异性
- 构建动物模型的方法、由该方法获得的非人转基因动物的体细胞及其用途
- 本发明提供了一种肝细胞癌小鼠模型，以及构建该小鼠模型的方法，它包括以下步骤：1.将外源目的基因插入携带靶位点同源序列的适宜载体中，构建出重组的打靶载体；2.将步骤1的打靶载体转化所研究动物的ES细胞，从中获得外源基因定位...
- 杨晓王友亮崔芳吕娅歆黄翠芬
- 文献传递
- 胰腺组织表达Cre重组酶转基因小鼠的建立及鉴定(英文)被引量：21
- 2002年
- 组织特异性表达Cre重组酶的转基因小鼠是进行组织特异性基因剔除研究的重要工具。为了建立胰腺组织特异性Cre转基因小鼠 ,我们通过PCR克隆了大鼠胰岛素基因启动子 ,并用它指导Cre基因在胰岛细胞中的特异性表达。在Cre重组酶基因 5′端添加了真核核糖体结合序列和核定位序列以使Cre重组酶能穿越核膜在细胞核中发挥功能 ;同时 ,在Cre基因 3′端添加了含内含子的 3′端人生长激素基因。表达载体经显微注射导入小鼠受精卵以建立转基因小鼠。PCR检测显示共获得 7只Cre整合阳性的转基因首建者小鼠 ;RT PCR结果表明其中 1只首建者小鼠的子代鼠在胰腺中转录了外源基因 ,进一步的Southern杂交结果表明 。
- 周江程萱吕娅歆黄翠芬杨晓
- 关键词：胰腺组织CRE重组酶转基因小鼠
- 小鼠胚胎干细胞分化形成拟胚体过程中的细胞程序性死亡被引量：2
- 2004年
- 为了检测小鼠胚胎干细胞 (embryonicstemcell ,ES细胞 )体外分化的拟胚体 (embryoidbodies ,EBs)形成过程中细胞程序性死亡 (programmedcelldeath ,PCD)的发生 ,通过悬滴、悬浮培养技术定向诱导未分化的ES细胞分化为拟胚体 ,并用RT PCR检测原始内胚层、原始外胚层、中胚层、内脏内胚层 4种分子标记物在EBs中的表达 .通过TUNEL染色、电镜、激光共聚焦显微镜及Western印迹以确定凋亡发生 .结果表明 :ES细胞体外分化为拟胚体并且表达各胚层相应的分子标记物 ;在拟胚体的发育过程中出现明显的空腔化过程 ,TUNEL染色及电镜观察到凋亡生成 ,同时线粒体膜电位 (ΔΨm)在拟胚体发育过程中降低 ,通过Western印迹检测到caspase3、caspase8的激活 .表明小鼠ES细胞所分化的拟胚体可以作为研究早期胚胎发育的实验模型 ,线粒体在拟胚体的细胞程序性死亡过程中发挥重要的作用 .
- 孙彦洵侯宁吕娅歆杨晓
- 关键词：胚胎干细胞拟胚体体外分化细胞程序性死亡
- 肝细胞特异性表达Cre重组酶转基因小鼠的建立被引量：17
- 2004年
- 目的 构建在小鼠肝细胞中特异表达Cre重组酶的转基因小鼠。 方法 利用聚合酶链反应(PCR)获得小鼠肝细胞特异性启动子——白蛋白启动子,指导Cre重组酶在肝细胞中特异表达。通过受精卵显微注射的方法,将转基因载体导入小鼠受精卵中,获得转基因小鼠。利用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测转基因小鼠中Cre重组酶转录的组织特异性,并将转基因小鼠与Smad4条件基因打靶小鼠进行杂交,利用PCR和Southern Blot进一步检测Cre重组酶在小鼠体内表达的组织特异性及其介导lox P位点之间发生重组的活性。 结果 获得了白蛋白启动子,构建了转基因载体pAlb-Cre。将转基因载体进行显微注射,共注射了837枚小鼠受精卵。PCR检测显示53只子代小鼠中有7只整合了Cre重组酶基因,Southern杂交结果证实共获得6只基因组上整合Cre重组酶基因的首建者小鼠。RT-PCR结果表明其中3只阳性小鼠的子代鼠在肝脏和睾丸中正确转录了外源基因。将在肝脏和睾丸中正确转录了外源基因的两只阳性鼠与Smad4条件基因打靶的小鼠杂交,通过PCR检测发现Cre转基因与Smad4条件基因打靶双阳性的子代鼠在肝脏中特异表达Cre重组酶,并能介导基因组中loxP序列间的基因重组,此结果通过Southern杂交得到了进一步证实。 结论 成功构建了在小鼠肝细胞中特异表达Cre重组酶?
- 王友亮程萱崔芳程竞吕娅歆杨晓
- 关键词：肝细胞CRE重组酶转基因小鼠聚合酶链反应
- Smad3基因缺失加快的小鼠皮肤创面收缩速度机制研究被引量：7
- 2004年
- 目的:研究Smad3基因剔除小鼠皮肤创伤愈合速度加快的机制。方法:利用不同基因型的Smad3基因剔除小鼠及对照小鼠进行皮肤缺失型创伤试验,观察组织病理变化;分离不同基因型小鼠胚胎成纤维细胞,观察其胶原收缩能力的变化。结果:Smad3基因剔除小鼠在皮肤创伤愈合时表现出重上皮化进度快;成纤维细胞胶原收缩试验中,Smad3缺失的细胞在有血清的培养条件下胶原收缩速度快于野生型细胞,而在无血清培养条件下,有无转化生长因子β1(TGF-β1)两者变化不显著。有血清培养时Smad3缺失的成纤维细胞表达α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)增加。结论:SMAD3通过抑制α平滑肌肌动蛋白在成纤维细胞中的表达调节成纤维细胞的收缩能力,以致Smad3缺失小鼠皮肤创面收缩速度加快。
- 毛春明杨晓张莉孙彦洵侯宁吕娅歆黄翠芬
- 关键词：SMAD3基因基因缺失小鼠皮肤创伤愈合
- 一种新的体外研究减轻瘢痕愈合的方法
- 本发明提供了一种利用抑制Smad3基因增强基质金属蛋白酶－2(MMP－2)的活性以减轻创伤后瘢痕愈合的方法。包括步骤：1)获得不同Smad3基因型的成纤维细胞并进行基因型鉴定；2)构建Smad3显性负效表达载体；3)通过...
- 杨晓黄翠芬毛春明吕娅歆周江
- 文献传递
- 骨关节炎患者血清中基质金属蛋白酶-2、-9的明胶酶谱分析被引量：12
- 2003年
- 为探讨基质金属蛋白酶-2、-9在骨关节炎发病中的作用,应用明胶酶谱分析方法研究其在骨关节炎患者血清中的表达水平。实验对象为27例膝骨关节炎患者,对照组为7例外伤骨折患者。结果发现病例组血清中基质金属蛋白酶-2和-9的表达水平均明显高于对照组(P<0.05)。该结果显示基质金属蛋白酶-2和-9可能在骨关节炎的发病过程中均起着重要的作用。
- 姚俊岩安靓王岩吕娅歆侯宁万海峰毛春明黄敏杨晓
- 关键词：骨关节炎血清基质金属蛋白酶明胶酶
