吴建伟
- 作品数：146 被引量：434H指数：12
- 供职机构：贵州医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技支撑计划国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学化学工程更多>>
- 人工繁育蝇蛆对鸡免疫应答功能的影响被引量：12
- 2004年
- 目的 :观察在饲料中添加鲜蛆、进口鱼粉、国产鱼粉对鸡免疫应答功能的影响。方法 :选成年罗曼褐壳蛋鸡 ,在基本饲料相同的前提下 ,添加鲜蝇蛆、进口鱼粉、国产鱼粉养鸡 ,每种饲料均设全量和减量两组 ,共 6组 ,每隔一定时间以伤寒沙门菌O抗原免疫 ,测定血清凝集效价和脾脏指数 ,观察鸡的免疫应答情况 ,每组随机设立未免疫对照。结果 :血清凝集效价各全量组之间差别无显著性意义 (P >0 0 5 ) ,减量鲜蝇蛆和减量国产鱼粉差别无显著性意义 (P >0 0 5 ) ,但均高于减量进口鱼粉组 (P <0 0 5 ) ;各饲料减量组凝集效价均明显高于全量组 (P <0 0 5 ) ;脾脏增大以全量和减量鲜蛆组、全量进口鱼粉组、减量国产鱼粉组最为明显 ,增大率达 77 2 8%(P <0 0 0 1 )。结论
- 郎书源国果洪牧王惠群吴建伟
- 关键词：蝇科幼虫
- 家蝇热休克蛋白HSP20基因克隆、表达和序列分析被引量：5
- 2015年
- 目的对家蝇热休克蛋白20(HSP20)基因进行生物信息学分析,并进行克隆、表达研究。方法利用美国国家生物技术信息中心和瑞士生物信息学研究所的蛋白分析专家系统中有关基因和蛋白序列的分析工具,结合其他生物信息学分析软件包,从Gen Bank上家蝇基因组序列识别出编码HSP20的基因,分析预测该蛋白质的结构功能;设计引物PCR扩增HSP20基因,将其克隆到原核表达质粒PEASY-E1中,重组质粒在大肠杆菌Origmi B/DE3中经用异丙硫代-β-D半乳糖苷(IPTG)诱导表达,表达产物用十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDSPAGE)鉴定。结果 HSP20基因序列全长865bp,最大开放阅读框(ORF)为567bp,编码188个氨基酸,理论分子量为21443.2 Da,等电点为5.96;所构建的重组质粒经PCR、双酶切及测序鉴定成功;SDS-PAGE分析结果显示,重组质粒在Origmi B/DE3中表达并纯化,得到的融合蛋白相对分子质量约为21443.2 Da,诱导12 h蛋白表达量最高,SDS-PAGE法得到的蛋白条带与目的蛋白大小相符。结论成功构建PEASY-E1-HSP20重组原核表达质粒并表达出融合HSP20蛋白,为进一步研究该蛋白的功能奠定基础。
- 彭传林王宇吴建伟修江帆魏川川国果
- 关键词：家蝇克隆
- 家蝇核糖体蛋白S18基因的克隆及表达模式研究被引量：5
- 2016年
- 旨为证实核糖体蛋白S18(Ribosomal protein S18,RPS18)基因在家蝇体内的表达稳定性。从构建家蝇幼虫c DNA文库中筛选到核糖体蛋白S18基因,以c DNA为模板,通过PCR扩增,获得RPS18基因完整编码序列(登录号:KT006855),运用生物信息学方法对该基因及其编码蛋白进行预测和分析。构建p ET28a/RPS18重组质粒,转化到大肠杆菌Transetta(DE3)中进行诱导表达及蛋白纯化,制备多克隆抗体并进行抗血清特异性分析。应用RT-PCR、q PCR及Western-blot从转录、翻译水平上分析RPS18基因在家蝇不同发育时期和三龄幼虫不同组织中的表达情况。结果表明,RPS18基因ORF全长459 bp,编码152个氨基酸,理论分子量为17 590.5 Da,等电点为10.48;将构建的重组质粒转入大肠杆菌Transetta(DE3)中,纯化得到RPS18蛋白;将该纯化蛋白免疫大白兔获得多克隆抗体,His单抗鉴定及抗血清特异性分析显示,其均可见单一条带;RT-PCR、q PCR及Westernblot分析表明,RPS18基因在家蝇不同发育时期及幼虫不同组织均能够稳定表达;综合分析表明,该基因在家蝇不同发育时期及幼虫不同组织均保持较好的表达稳定性。
- 胡亚卢诚魏川川修江帆吴建伟
- 关键词：家蝇内参基因原核表达
- 蝇蛆壳聚糖急性毒性实验被引量：8
- 2009年
- 目的观察蝇蛆壳聚糖的急性毒性反应。方法蝇蛆壳聚糖以最大浓度及最大给药体积的药液灌胃连续给药3次。连续观察14 d,记录小鼠毒副反应情况。蝇蛆壳聚糖腹腔注射给药1次,连续观察14 d,记录小鼠毒副反应情况。结果观察14 d,灌胃给药全部动物健存,小鼠体重与空白对照组差异无显著性,未见任何毒性反应。计算蝇蛆壳聚糖最大给药量为2 700 mg/kg体重,相当于成人日用量的67.5倍。腹腔注射给药亦未见任何毒性反应。结论蝇蛆壳聚糖毒性较小。
- 覃容贵吴建伟国果付萍
- 关键词：小鼠急性毒性
- 家蝇幼虫血淋巴抗肿瘤活性蛋白功能分子的筛选及分子鉴定
- 目的:从家蝇幼虫血淋巴中筛选抗肿瘤活性蛋白功能分子。方法:以剪头法提取家蝇三龄幼虫血淋巴,依次收集C18固相萃取柱不同乙腈洗脱梯度洗脱组分,用MTT法测定抗肿瘤活性,并进一步用RP-HPLC纯化活性组分和测定分子特性,实...
- 魏洪吴建伟徐楠国果张勇付萍罗振华刘萍胡蓉张殊
- 关键词：家蝇血淋巴HPLC
- 文献传递
- 家蝇幼虫分泌物抗菌肽的分离及其部分特性被引量：19
- 2007年
- 目的分离家蝇(Musca domestica)幼虫分泌物抗菌肽并研究其部分理化特性。方法用超滤、固相萃取、反相高效液相色谱(RB-HPLC)分离纯化家蝇幼虫分泌物抗菌肽;测定抗菌肽对多株革兰氏阴性菌及革兰氏阳性菌的最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC);比较其在不同pH值(pH 6．0～9．0)、不同阳离子浓度(Mg2+:(0.5×10-3～10．0×10-3)mol／L, Na+、K+:(10×10-3～100×10-3)mol／L)及不同小鼠血清浓度(12．5％～75％)环境中抗菌活性的变化。结果超滤分离获得的活性蛋白相对分子质量为Mr 3000～30000,该蛋白经20％、30％、70％及80％乙腈洗脱,其组分均有活性,其中以70％乙睛洗脱组分活性较强且稳定。进一步用RP-HPLC从70％洗脱组分中纯化出两个抗菌活性肽。抗菌肽对大肠埃希菌、绿脓杆菌、金黄色葡萄球菌及枯草芽孢杆菌的MIC值分别为32．738、16．369、65．475及32．738μg/ml。在培养基pH值为6～9、不同阳离子浓度及不同小鼠血清浓度的环境中,各实验组的A570增加量均小于0．05,而对照组的A570增加量多为0.3以上,各实验组与对照组比较,其差异均具有统计学意义(P值均<0．01)。结论用固相萃取等方法从家蝇幼虫分泌物中可快速分离出具有较强活性的抗菌肽。该抗菌肽在不同条件下均具有较好的抗菌效果。
- 国果吴建伟付萍覃容贵张勇宋智魁
- 关键词：家蝇分泌物抗菌肽纯化
- 利用工程蝇生物转化器建设国酒茅台循环型酿酒生态工业的技术工艺创新及相关理论研究
- 传统酿酒工业粗放的生产与丟糟方式造成了资源的过度浪费与生态环境的日益恶化，严重制约了我国白酒酿造业循环经济的建立以及生态环境的可持续发展。本文以循环经济模式为构建理念，与国酒茅台集团展开合作，利用工程蝇对有机废物的生态转...
- 吴建伟尚小丽罗振华王宇修江帆徐楠
- 关键词：生物转化有机废物生态工业
- 应用iTRAQ标记技术结合2DLC-MS/MS分析家蝇幼虫免疫诱导后血淋巴蛋白质组被引量：1
- 2014年
- 目的分析家蝇幼虫免疫诱导前后血淋巴中的免疫防御相关靶标,探索其先天性免疫机制。方法采用同位素标记及相对定量技术(isobaric tags for relative and absolute quantification,iTRAQ)结合2D LC-MS/MS对家蝇幼虫诱导前后的血淋巴蛋白质组进行研究。结果与对照组比较研究后共获得237个不同肽段,鉴定到13个具有定量信息的差异蛋白。免疫刺激后显著上调的蛋白有9个,下调蛋白4个(P<0.05),对鉴定到的差异蛋白进行理化性质分析和GO(gene ontology)注释分析,发现这些蛋白分别具有抗菌、抗氧化、催化结合等功能,并参与了免疫、代谢、应激、转运等生物学过程,表明对家蝇幼虫经诱导后血淋巴中多种功能蛋白的表达发生了变化。结论 iTRAQ标记技术结合2D LC-MS/MS可以有效地分离鉴定昆虫血淋巴蛋白质组,为深入研究差异蛋白的功能奠定了基础。
- 张勇吴建伟付萍国果
- 关键词：家蝇幼虫蛋白质组血淋巴ITRAQ
- 蝇蛆壳聚糖降血脂作用的实验研究被引量：4
- 2007年
- 目的探讨蝇蛆壳聚糖降血脂的作用。方法预防性给药时,给高脂饲料造模的同时连续给药4w,于第28天测定大鼠血清TC、TG、HDL-C、LDL-C含量,同时观察对大鼠体重、肝重及肝重/体重百分率的影响。治疗性给药时,给高脂饲料造模成功后连续给药4w,测定大鼠血清TC、TG、HDL-C、LDL-C含量,并观察对大鼠体重、肝重及肝重/体重百分率的影响。结果预防性给药时,中、高剂量蝇蛆壳聚糖组能显著降低血清TC、TG、LDL-C含量,显著升高HDL-C,降低大鼠体重、肝重及肝重/体重百分率。治疗性给药时,低、高剂量蝇蛆壳聚糖组能显著降低血清TC、TG、LDL-C含量,显著升高HDL-C,降低大鼠体重、肝重及肝重/体重百分率。结论蝇蛆壳聚糖能调节血脂平衡,预防高脂血症的产生,对已形成的高脂血症有一定的治疗效果。
- 覃容贵付萍吴建伟国果
- 关键词：高脂血症降血脂
- 家蝇幼虫血淋巴蛋白组学研究初探
- 目的研究家蝇幼虫血淋巴的蛋白组学,筛选重要的功能蛋白。方法使用破壁法提取三龄幼虫血淋巴,进行双向电泳分析,另一部分进行沸水浴处理后离心取上清,透析脱盐后进行不同条件的双向电泳,探索合适的分析方法,筛选部分重要功能蛋白点进...
- 张勇吴建伟付萍国果
- 关键词：家蝇幼虫血淋巴蛋白组
- 文献传递
