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毛细胞PMCA2在小鼠内耳Ca^(2+)调节和听觉平衡中的作用被引量：1: 2007年; 目的:研究小鼠内耳毛细胞细胞膜Ca2+-ATP酶2型蛋白(PMCA2)在听觉平衡生理中的作用及意义。方法:利用不同基因型小鼠PMCA2-/-(突变纯合子)、PMCA2+/-(杂合子)和PMCA2+/+(野生型)为实验对象,采用听觉脑干反应(ABR)、畸变产物耳声发射(DPOAE)和耳蜗内电位(EP)检测等方法,分别检测不同基因型小鼠的内耳生理功能。结果:PMCA2+/+野生型鼠的听力正常,ABR的短声(click)阈值为(13.75±11.08)dB SPL;EP均值为(91.3±11.0)mV。PMCA2+/-杂合子小鼠听力低于同窝PMCA2+/+野生型鼠,ABR的短声阈值为(63.89±12.90)dB SPL,与PMCA2+/+小鼠比较差异显著(P<0.01);PMCA2+/-小鼠没有检测出DPOAE的高频区辐值,其EP均值为(80.7±9.0)mV。PMCA2-/-小鼠的ABR在100dB SPL无反应,表现出全聋和平衡功能失调,其EP均值为(56.6±13.0)mV;PMCA2-/-小鼠没有检测出DPOAEs。结论:PMCA2是内耳毛细胞纤毛丛上的重要Ca2+转运通道,对维持内耳的Ca2+代谢和听觉平衡功能有重要作用。; 褚汉启周小琴周良强黄孝文甄宏韬黄红彦崔永华; 关键词：迷路钙通道毛细胞

耳硬化症患者激光镫骨底板开窗术的短期疗效分析被引量：1: 2020年; 目的:评估耳硬化症患者行激光镫骨底板开窗术后的短期疗效。方法:回顾性分析21例(21耳)行激光镫骨底板开窗术的耳硬化症患者的临床资料。比较术前和术后3个月纯音测听0.5、1、2、4 kHz频率的气导(AC)、骨导(BC)阈值和气骨导差(ABG)平均值,并统计手术并发症的发生情况。结果:21耳术前和术后AC阈值分别为(58.2±12.7)dB HL和(43.0±23.1)dB HL,术后AC阈值降低15.2 dB HL(P<0.01);0.5、1、2、4 kHz各频率术后AC阈值较术前均显著降低。术前术后BC阈值分别为(31.4±10.3)dB HL和(33.3±16.6)dB HL,差异无统计学意义;各频率的手术前后BC阈值差异亦无统计学意义。3耳(14.3%)术后BC阈值减低>10 dB HL,出现过度闭合。手术前后ABG平均值分别为(27.0±9.1)dB HL和(9.6±9.9)dB HL,术后ABG缩小17.4 dB HL(P<0.01);各频率ABG平均值均显著缩小。14耳(66.7%)术后ABG≤10 dB HL,18耳(85.7%)术后ABG≤20 dB HL。术后2耳(9.5%)出现感音神经性听力损失;15耳(71.4%)耳鸣和3耳(14.3%)眩晕均于术后第3天缓解。结论:激光辅助下镫骨底板开窗术治疗耳硬化症安全有效,虽然术后骨导阈值稍有提高,但不影响总体听觉康复效果。; 谢立刘爱国Shenoy Imrit T彭利艳周良强; 关键词：耳硬化症激光

耳蜗血管纹钾钠氯化合物协同转运子对年龄相关性听力下降的影响被引量：2: 2007年; 目的观察具有年龄相关性听力下降（age-related hearing loss，AHL）特点的不同周龄C57BL／6J鼠和钾钠氯化合物协同联合转运子-1（Na-K-2Cl cotransporter-1，NKCC1）基因敲除鼠年龄相关性听力改变与耳蜗血管纹NKCC1表达的情况，并检测不同龄的NKCC1^＋/-杂合子小鼠耳蜗NKCC1蛋白表达及耳蜗扫描电镜形态变化，研究血管纹NKCC1在老年性聋发病中的作用。方法应用听性脑于反应（ABR）分别检测4、8、16、32、48、60周龄组C57BL／6J小鼠和两种基因型NKCC1小鼠的听力，采用免疫组化法观察其血管纹NKCC1表达的变化，同时采用免疫印迹杂交（Western Blot）检测不同周龄小鼠耳蜗的NKCC1蛋白的含量，扫描电镜观察不同周龄小鼠的耳蜗基底膜结构。结果 C57BL／6J小鼠随鼠龄增加而出现听力下降，自16周龄时ABR阈值出现显著性增高（P〈0．05）；血管纹NKCC1蛋白表达也呈现随鼠龄增加而逐步减低，其灰度值自16周龄时显著增高（P〈0．01）。NKCC1^＋/-杂合子鼠的听力随鼠龄增长而逐渐下降，老龄小鼠的ABR阈值与其低龄时相比，阈值显著性升高（P〈0．05）。老龄小鼠的耳蜗NKCC1蛋白含量低于低龄小鼠，老龄NKCC1^＋／-小鼠的耳蜗底回外毛细胞（OHC）出现散在性点状缺失。结论 AHL小鼠血管纹NKCC1蛋白表达随年龄增长而减少，显示与AHL相关，老年性聋的发病可能与血管纹NKCC1通道蛋白的遗传特性及功能有关。; 褚汉启熊浩崔永华黄孝文韩方吴振恭周良强孔维佳; 关键词：耳蜗老年性聋

磁力底座手术拉钩: 本实用新型公开了一种磁力底座手术拉钩，包括底座主体，底座主体的底部凹槽中嵌置有永磁铁，底座主体的顶部螺孔中配置有螺杆，螺杆上设置有高度可调节的一对紧固螺母，一对紧固螺母之间夹持固定有手术拉钩。使用时，其底座主体能稳定吸附...; 周良强李宁燕王冀陈金余洋褚汉启崔永华; 文献传递

质膜钙ATP酶异构体1～3在新生大鼠耳蜗基底膜的表达: 2016年; 目的通过Western blot方法检测质膜钙ATP酶异构体1～3（plasma membrane Ca2＋-ATPase isoforms 1～3,PMCA1～3）在新生大鼠耳蜗基底膜（basilar membrane,BM）的表达,并检测PMCA2在单个新生大鼠耳蜗毛细胞纤毛的表达量。方法 1取出生后2天（P2）和8天（P8）健康SD大鼠各4只,断头后分离出BM,提取总蛋白,分别取20μg,通过Western blot法检测BM的PMCA1～3表达。2取P2和P8大鼠BM总蛋白3μg,通过Western blot方法检测BM的PMCA2的表达。3取4只P8大鼠,分离出BM,提取总蛋白,分别取5、10、20μg总蛋白并取100、400和800ng牛血清白蛋白（BSA）作为对照组,跑完电泳后将胶分为2部分,部分泳道用于SYPRO染胶,其余泳道用于Western blot检测PMCA2的表达。结果 1在20μg的P2和P8大鼠BM总蛋白中,PMCA1仅有微弱的表达（分别为0.126±0.024、0.131±0.012）,PMCA2表达水平较高（分别为4.16±0.528、4.25±0.319）,PMCA3几乎没有表达（均为0）,三者间差异有统计学意义（P〈0.05）。2在3μg的P2和P8大鼠BM总蛋白中,P8大鼠PMCA2的表达水平（4.571±0.336）高于P2大鼠（3.622±0.285）,差异有统计学意义（P〈0.05）。3PMCA2在单个P8大鼠BM的含量约为2.5ng。结论 PMCA1～3在新生大鼠耳蜗BM的表达水平不同,PMCA2表达量最大,这可能是由于耳蜗毛细胞对这几种PMCA亚型有不同的Ca2＋调节需求。; 陈请国褚汉启周良强陈金刘云罗蜜陶雁玲; 关键词：基底膜耳蜗

激光共聚焦显微镜和免疫组化染色对比观察KCNQ1在小鼠耳蜗血管纹的表达: 2014年; 目的:采用激光共聚焦显微镜(LSCM)技术和免疫组化染色检测KCNQ1在小鼠耳蜗血管纹中的表达分布特征。方法:以KCNQ1-/-突变纯合子基因型小鼠和CBA/CaJ小鼠为实验对象,采用免疫组化染色、LSCM结合免疫学标记方法对比观察血管纹KCNQ1蛋白表达情况。结果:免疫组化染色显示CBA/CaJ小鼠血管纹边缘细胞顶膜KCNQ1蛋白高表达,呈棕褐色;LSCM观察显示免疫单标KCNQ1绿色荧光蛋白分布于CBA/CaJ小鼠血管纹边缘细胞细胞核,KCNQ1-/-小鼠边缘细胞均未见阳性反应。结论:LSCM技术能准确显示KCNQ1在小鼠耳蜗血管纹中表达及细胞定位。; 吴振恭褚汉启熊俊陈金川刘云陈金周良强熊浩; 关键词：KCNQ1 基因敲除小鼠边缘细胞激光共聚焦显微镜

质膜钙ATP酶异构体1～4的剪接体在新生大鼠前庭器官的表达被引量：1: 2016年; 目的研究质膜钙ATP酶异构体(plasma membrane Ca^(2+)-ATPase isoforms,PMCAs)1~4(PMCA1~4)的A端和C端剪接变异体在新生大鼠前庭器官的表达。方法取出生2天的健康SD大鼠10只,断头后分离出前庭器官(椭圆囊斑和球囊斑),提取总RNA,通过逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法,检测PMCA1~4的A端和C端剪接变异体的表达。结果在新生大鼠的椭圆囊斑和球囊斑PMCA1~4表达的剪接体分别为PMCA1x/b,PMCA2w/(a、b),PMCA3z/(a、b、c)和PMCA4(x、z)/b。结论在新生大鼠前庭器官,PMCA1、PMCA2、PMCA3和PMCA4之间表达的A端和C端剪接变异体类型均不同,这可能是由于椭圆囊斑和球囊斑对这些PMCA亚型有着不同的Ca2+调节需求。; 罗蜜褚汉启陶雁玲周良强陈金刘云潘春晨陈请国; 关键词：剪接体

大鼠嗅球嗅鞘细胞的改良培养及耳蜗内植入的初步研究被引量：1: 2010年; 目的建立并改良大鼠嗅球嗅鞘细胞(olfactory ensheathing cells,OECs)的取材、纯化、培养、鉴定及示踪方法,并初步探讨OECs耳蜗内植入的可行性。方法采用改良法分离新生3 d的SD大鼠嗅球OECs,用差速贴壁加抗有丝分裂法行纯化培养,观察培养细胞的形态特点及生长情况,利用低亲和力神经生长因子受体NGFRp75行免疫组化鉴定并评估细胞纯度。将纯化培养7 d后的OECs与5-溴-2′-脱氧尿嘧啶核苷(5-bromo-2-′deoxyuridine,BrdU)共同孵育48 h,以免疫荧光法观察OECs的增殖活性;同法标记供移植用的OECs。在成年大鼠耳蜗底周钻微孔,注入OECs悬液,24 h后作耳蜗冰冻切片行免疫荧光染色,观察移植的OECs在蜗内存活与分布情况。结果用改良技术体外培养的OECs增殖速度快,于第9天细胞数量最多,且逐渐表现出典型的形态学特征;绝大部分培养的OECs NGFRp75免疫组化呈阳性反应,细胞纯度最高达85%。OECs与BrdU共同孵育48 h后,约90%的培养细胞免疫荧光呈阳性反应。初步建立了内耳OECs移植方法;经耳蜗底周注入OECs后24 h,BrdU阳性细胞主要分布于耳蜗的外淋巴腔,部分细胞附着于鼓阶外侧壁。结论采用改良的嗅球OECs分离培养法可以获得高纯度、增殖活性良好的OECs;OECs耳蜗内植入后短期内可存活,初步提示耳蜗内OECs移植基本可行,值得进一步研究。; 张玉峰黄孝文褚汉启陈金周良强华小阳崔永华张平; 关键词：嗅鞘细胞细胞移植耳蜗

小鼠耳蜗侧壁α_2 Na,K-ATPase在听觉及年龄相关性听力下降中的作用被引量：2: 2006年; 目的探讨耳蜗侧壁α2Na,K-ATPase通道在听觉功能和年龄相关性听力减退中的作用。方法利用半拷贝基因的α2Na,K-ATPase+/-杂合子小鼠作为试验平台,采用听性脑干反应(ABR)和耳蜗内电位(endoco-chlear potential,EP)检测方法,对α2Na,K-ATPase+/-杂合子小鼠和α2Na,K-ATPase+/+野生型小鼠进行ABR和EP检测,并对各个鼠龄段的小鼠进行ABR检测。结果α2Na,K-ATPase+/-杂合子小鼠的听力和EP值均低于α2Na,K-ATPase+/+野生型鼠;α2Na,K-ATPase+/-杂合子小鼠的听力随鼠龄增长而逐渐下降,高龄期小鼠的ABR阈值与其低龄时相比显著性升高(P<0.05)。结论耳蜗侧壁的α2Na,K-ATPase通道对听觉功能具有重要作用;携带半拷贝基因的αNa,K-ATPase+/-杂合子小鼠表现出轻度年龄相关性听力减退。; 褚汉启黄孝文熊浩韩芳吴振恭周良强崔永华; 关键词：耳蜗离子通道老年性聋

L型钙离子通道蛋白α1D亚基与老年性耳聋关系的研究被引量：2: 2014年; 目的研究L型钙离子通道蛋白α1D亚基（Cav1．3）在老年性耳聋小鼠耳蜗组织中的表达和意义。方法应用听性脑干反应（ABR）分别检测4、14、24、48周龄的C57BL／6小鼠的听力，苏木素-伊红（HE）染色观察内耳形态的变化。免疫荧光方法观察Cav 1．3在内耳组织中的分布，同时采用反转录聚合酶链反应（RT—PCR）检测其基因CACNA1D在内耳组织的mRNA表达。结果Cav 1．3主要分布在小鼠耳蜗内外毛细胞、螺旋神经节、螺旋韧带、血管纹、螺旋（板）缘细胞。与4周龄小鼠比较，[短声（27．08±9．19）dBSPL、4KHz（23．79±13．31）dBSPL、8KHz（18．83±12．18）dBSPL3，14、24、48周龄ABR反应阈值提高（F=95．86，P〈0．05）；48周龄小鼠ABR反应阈值[短声（87．81±8．36）dBSPL、4KHz（85．63±9．88）dBSPL、8KHz（79．50±9．83）dBSPL3，较4、14、24周龄大鼠均提高（F=115．97，P％0．01）。随着鼠龄的增长，内耳毛细胞和螺旋神经节细胞逐渐出现缺失；血管纹和螺旋韧带也呈现萎缩；Cav 1．3表达含量逐渐减少，4周218．94±11．29，14周184．67±11．92，24周148．18±8．35与48周98．04±4．52比较，差异有统计学意义（F=119．17，P〈0．01）。结论老年性耳聋小鼠Cav 1．3钙离子通道蛋白表达含量随年龄增长而减少，其功能的异常和缺失可能在老年性耳聋的发病中起一定作用。; 陈金褚汉启周良强余洋陈请国冰丹刘云王少立张平黄孝文崔永华; 关键词：听觉丧失钙通道毛细胞听觉

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周良强

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