唐玉钗
- 作品数:45 被引量:100H指数:7
- 供职机构:南京军区福州总医院更多>>
- 发文基金:福建省农科院青年科技人才创新基金卫生部科学研究基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 亲和层析法纯化人绒毛膜促性腺激素被引量:1
- 1991年
- 本文介绍了一种应用抗hCG β亚单位单克隆抗体亲和层析提纯hCG的方法。结果表明,该法具有简便、快速、经济、产品活性高等优点。hCG回收率为96%,免疫学活性17000IU/mg蛋白,生物学活性(小鼠子宫称重法)达到10 000U/mg蛋白以上。
- 王顺友戚少然唐玉钗朱忠勇
- 关键词:HCG提纯
- 一种新的NADH-细胞色素b5还原酶基因点突变的发现和基因诊断
- 1999年
- 为了查明中国人遗传性高铁血红蛋白血症(RaVl)患者的NADH-细胞色素b5还原酶(b5R)基因突变类型,探讨RCM发生的分子机制,从已报道的1例RCM I型患者的外周血白细胞中提取RNA.应用反转录PCR法扩增了b5R cDNA,分析了b5R cDNA的全部编码序列的921bp片段.结果显示,b5RcDNA基因的第203位密码子存在(TGC→TAC)Cys→Try的错义突变.经基因组PCR-RFLP分析证实该突变并非PCR反应过程中的错配,而是一种新的基因突变类型.由于此突变减少了一个对酶功能至关重要的带巯基的半胱氨酸,而引入了一个带酚侧链的氨基酸,致使酶的稳定性及活性下降.
- 王瑶吴玉水郑培蒸兰风华朱忠勇唐玉钗杨文西方国安
- 关键词:基因突变类型基因诊断点突变细胞色素B5错义突变
- 血清甲状腺球蛋白抗体的斑点免疫金渗滤法被引量:2
- 1996年
- 血清甲状腺球蛋白抗体的斑点免疫金渗滤法冯修高唐玉钗朱忠勇叶大付杨丽珠①李珍儿*兰小鹏黄俏佳(南京军区福州总医院全军医学检验中心,福州350001)关键词斑点免疫金渗滤法抗体甲状腺球蛋白血清甲状腺球蛋白抗体(TgAb)的检测,对自身免疫性甲状腺疾病的诊...
- 冯修高唐玉钗朱忠勇叶大付杨丽珠李珍儿兰小鹏黄俏佳
- 关键词:斑点免疫金渗滤法抗体甲状腺球蛋白血清
- 间接免疫荧光法检测人红细胞NADH-细胞色素b5还原酶
- 2000年
- 吴玉水唐玉钗朱忠勇
- 关键词:血红蛋白血症红细胞NADHHM
- 膜渗滤亲和层析法的建立及在纯化尿HCG中的初步应用被引量:1
- 1997年
- 作者报道一种亲和层析法并将其用于纯化人尿绒毛膜促性腺激素(HCG)。该方法是采用硝酸纤维素膜(NCM)作固相支持物吸附的抗体,用负压使待提液渗滤 NCM,在滤过的同时待提液中的相应抗原不断结合于 NCM上预吸附的抗体,再将抗原从NCM上解离,从而得到高纯度的抗原。结果表明用以提纯的HCG纯度达PAGE电泳单条带,免疫活性为9000IU/mg。故认为该法简便有效,可用于亲和层析纯化蛋白质。
- 徐兵朱忠勇唐玉钗兰小鹏
- 关键词:硝酸纤维素膜渗滤尿HCG
- 一种新的NADH-细胞色素b5还原酶基因点突变被引量:6
- 1999年
- 目的 为了查明中国人遗传性高铁血红蛋白血症(RCM) 患者的NADH细胞色素b5 还原酶(b5R) 基因突变类型,探讨RCM 发生的分子机制。方法 从已报道的1 例RCMⅠ型患者的外周血白细胞中提取RNA,应用逆转录聚合酶链反应法(RTPCR) 扩增了b5RcDNA(921 bp),测定其b5RcDNA的全部编码序列。结果 b5RcDNA基因的第203 位密码子存在(TGC→TAC)Cys→Tyr 的错义突变。经基因组PCR限制性片段长度多态性(RFLP) 分析证实该突变并非PCR过程中的错配。结论 Cys203 →Tyr 是RCM
- 王瑶吴玉水杨文西方国安郑培蒸兰风华朱忠勇唐玉钗
- 关键词:高铁血红蛋白血症基因点突变
- 中国人遗传性b5R缺陷的分子遗传学、免疫学和酶学研究
- 朱忠勇王瑶吴玉水黄长晖兰风华唐玉钗何菊英谢毅俞秀玲
- (项目所属科学技术领域、主要内容、特点及应用推广情况) 项目名称:中国遗传性b5R缺陷的分子遗传学、免疫学和酶学研究 NADH-细胞色素b5还原酶(简称b5R)是一种广泛分布于人体各组织细 胞、具有重要生理功能的氧化还原...
- 关键词:
- 关键词:分子遗传学免疫学酶学遗传性高铁血红蛋白血症
- NADH-细胞色素b5还原酶在大肠杆菌中的表达及其产物的纯化被引量:4
- 2000年
- 为了探讨 NADH-细胞色素 b5还原酶基因突变引起遗传性高铁血红蛋白血症的分子病理机制 ,研究突变型 ( b5R)蛋白结构和功能的关系 ,用基因重组技术将野生型和突变型 ( C2 0 3Y) b5Rc DNA克隆于 p GEX- 2 T载体 ,在大肠杆菌 BL2 1中诱导表达 .Western印迹鉴定所表达的蛋白为GST- b5R融合蛋白 .应用谷胱甘肽 - Sepharose 4B亲和层析 ,还原型谷胱甘肽洗脱得到纯化的GST- b5R和 GST- b5RC2 0 3Y融合蛋白 .比较 GST- b5R和 GST- b5RC2 0 3Y酶活性及稳定性 ,发现野生型和突变型的酶活性基本相同 .但与野生型酶相比 ,突变型酶对热的稳定性较差 ,对胰蛋白酶更加敏感 .结果提示 ,C2 0 3Y突变可引起蛋白质二级结构改变而导致酶的稳定性下降 .
- 王瑶吴玉水兰风华唐玉钗朱忠勇
- 关键词:分子病理基因突变纯化RCM
- 用快速斑点免疫金渗滤法检测抗双链DNA抗体被引量:3
- 1996年
- 目的为了提供一种简便、快速、可靠的检测抗双链DNA(ds-DNA)抗体的新方法。方法将生物素化的质粒ds-DNA结合于包被了亲和素的硝酸纤维素(NC)膜上,以胶体金标记的葡萄球菌蛋白A(SPA)作为显示剂,建立了一种检测抗ds-DNA抗体的快速斑点免疫金渗滤法(DIGFA)。结果DIGFA对未经选择的系统性红斑狼疮(SLE)和活动性SLE的阳性率分别为67.2%和95.9%;对非SLE的自身免疫病患者的阳性率仅为2.9%;正常人未见假阳性。与短膜虫免疫荧光法(CL.IFA)、放射免疫法(Far)、酶联免疫吸附法(ELISA)和斑点免疫结合法(DIBA)四种方法比较,DIGFA的敏感性优于CL.IFA、ELISA和DIBA,特异性优于Far和ELISA。结论DIGFA快速、简便,整个检测过程只需2分钟,不需特殊设备,是一种值得推广的检测抗ds-DNA抗体的常规方法。
- 兰小鹏黄俏佳叶小芬冯修高唐玉钗朱忠勇
- 关键词:红斑狼疮全身性抗双链DNA抗体斑点免疫金渗滤法
- 全文增补中
- 膜渗滤亲和层析法纯化腹水单克隆抗体被引量:1
- 1997年
- 用膜渗滤亲和层析法纯化腹水单克隆抗体 (McAb) .采用硝酸纤维素膜 (NCM)作固相支持物吸附抗原 ,用负压使小鼠腹水渗滤NCM ,在滤过的同时腹水中的McAb不断结合于NCM上吸附的抗原 ,再将McAb从NCM上解离 ,从而得到高纯度的McAb .用此法纯化抗白蛋白 (Alb)McAb .结果提纯的AlbMcAb纯度达PAGE电泳单条带 ,将此McAb点样NCM用于斑点免疫渗滤法 (DIFA)检测Alb ,其灵敏度比用腹水点样时高 2 0倍 .该法快速简便 ,可代替亲和层析柱用于纯化McAb .
- 徐兵朱忠勇唐玉钗兰小鹏
- 关键词:单克隆抗体腹水纯化