孟晓静
- 作品数：5 被引量：8H指数：2
- 供职机构：中国人民解放军第一军医大学分子免疫学研究所更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划广东省医学科学技术研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 抗HLA-A~*0201重链卵黄抗体的制备及初步鉴定被引量：1
- 2003年
- 目的制备高效价特异性鸡卵黄免疫球蛋白(Yolk immunoglobulin,IgY)抗体。方法用纯化HLA-A*0201重链抗原加完全福氏佐剂免疫岭南黄鸡,经水稀释法初步纯化浓缩后,用ELISA鉴定其免疫学活性,测定纯化后蛋白含量,并用SDS-PAGE进行分析鉴定。结果获得ELISA效价为1×106的抗重链IgY抗体,蛋白含量为9.77 mg/ml。经SDS-PAGE分析,出现2条蛋白带,纯度达90%以上。结论用重链抗原加福氏佐剂免疫种鸡制备的IgY抗体产量多、效价高,为结合HLA-A*0201复合体诱导特异性细胞毒性T淋巴细胞活化奠定了基础。
- 孟晓静孟民杰林来兴妹周明乾王小宁
- 关键词：IGY
- 角质细胞生长因子2的优化表达及纯化研究被引量：3
- 2001年
- 目的优化工程菌的表达,比较肝素亲和层析、离子交换层析两种方法的角质细胞生长因子2（keratinocyte growthfactor,KGF-2）的纯化产量及纯度,以获取高效的提纯工艺。方法工程菌分别进行生长密度和诱导时间的实验,并将细茵裂解液上两种层析柱进行分步洗脱,收集目标蛋白,进行电泳分析。结果获得高表达KGF-2工程菌,表达率为29％;用两种层析方法获得电泳纯KGF-2。结论 离子交换层析在纯化过程中具有一定优势。
- 林来兴妹孟晓静王小宁吉程程罗林亦伟龙滨张钧
- 关键词：纯化
- 白细胞介素4-绿脓杆菌外毒素冻干保护剂的筛选被引量：1
- 2001年
- 目的筛选白细胞介素4-绿脓杆菌外毒素最佳冻干保护剂配方。方法设计12组不同的保护剂配方,用U251细胞为靶细胞测定冻干品的活性,并对外观、溶解性进行比较。结果使用5％甘露醇+0.004％吐温80组保护剂,冻干品的活性与冻干前没有降低,冻干品外观、溶解性均优于其它配方。结论5％甘露醇0.004％吐温80组保护剂为最佳侯选保护剂配方。
- 胡志明陈泽洪孟晓静李宏增林来兴妹王小宁
- 关键词：保护剂冻干
- 角质细胞生长因子-2的发酵及纯化工艺研究被引量：4
- 2002年
- 目的研究重组人角质细胞生长因子 2 (rhKGF 2 )工程菌的高密度发酵和提纯工艺。方法通过增加培养基营养成分 ,发酵过程补加葡萄糖 ,获得高产率菌体。细菌裂解液经硫酸铵沉淀、分子筛、肝素亲和色谱和离子交换色谱等方法进行纯化 ,电泳分析结果。结果每 1L发酵液可获得菌体 12 .2g ,表达率达 2 8.7%。纯化后rhKGF 2纯度达 97%。结论rhKGF 2工程菌可获得高密度发酵。纯化工艺适用于rhKGF
- 林来兴妹胡志明孟晓静黄树琪王小宁
- 关键词：重组人角质细胞生长因子-2发酵纯化化学诱导可溶性表达
- 可溶性HLA-A2-肽组装复合物的研制及初步鉴定
- 2003年
- 目的:诱导表达HLA-A2的两个亚基-重链(HC)和轻链β2m,并将其纯化产物和特异性肽段结合为HLA-A2-肽复合体。方法:将HC工程菌和β2m工程菌经0.5 mmol/L IPTG诱导5 h。经超声破菌及专利技术处理获得精制包涵体,再复性、 超滤浓缩后,用DEAE Sepharose Fast Flow阴离子交换层析进行纯化。然后,将HC、β2m与两条特异性肽段分别结合,用Superdex 75凝胶过滤纯化,并用其天然结构的单克隆抗体(mAb)W6/32进行初步鉴定。结果:HC工程菌和β2m工程菌诱导表达的水平分别为43％和47％,HC和β2m纯化后的纯度均达到95％。两条特异性肽段与HC和β2m可组装成HLA-A2-肽复合体,纯化的HLA-A2-肽复合物在4℃可保存2个月左右,并可与mAb W6/32特异性结合。结论:HLA-A2的HC工程菌和轻链β2m工程菌均具有较高的表达水平,与相应的特异性肽段可形成稳定的可溶性HLA-A2-肽复合物,为进一步研究细胞毒性T淋巴细胞(CTL)的识别和应答奠定了基础。
- 孟晓静林来兴妹孟民杰胡志明王小宁
- 关键词：Β2微球蛋白
