官桂范
- 作品数：12 被引量：37H指数：5
- 供职机构：长春生物制品研究所更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学化学工程更多>>
- ISCOMS重组乙型肝炎疫苗的研究被引量：6
- 2004年
- 目的 提高CHO细胞表达的重组乙型肝炎病毒表面抗原 (HBsAg)的免疫原性。方法 采用透析法制备HBsAg免疫刺激复合物 (immunostimulatingcomplexes简称ISCOMS)。用放免法 (RIA)检测免疫小鼠的抗体滴度 ;标记胸腺嘧啶掺入法 (3H TdR)检测小鼠脾淋巴细胞转化率 ;CTLL 细胞株 XTT法检测IL 2活性。结果 经电镜观察ISCOMS颗粒呈蜂窝状 ,直径为 30～ 4 0nm左右。SDS PAGE分析 ,制备的ISCOMS颗粒HBsAg蛋白均由P2 3、GP2 7和GP30组成。用Bradfords法测定ISCOMS蛋白回收率为 4 1 5 0 %。免疫NIH小鼠结果显示ISCOMS重组乙肝疫苗和铝佐剂疫苗的ED50 分别为 10 3 2 2 5 5和 2 5 80 6 4 ;ISCOMS组的相对效力是铝佐剂组的 4倍。刺激指数 (SI)分别为 6 78± 2 32和 3 12± 0 5 4。IL 2水平分别是 10 2IU ml± 2 12IU ml和 4 95IU ml± 0 86IU ml。结论 ISCOMS重组乙型肝炎疫苗稳定性好 ,免疫原性强 ,抗体产生早 ,滴度高 ,并且能激起细胞免疫 ,有可能发展成为新一代疫苗。
- 吴隼郭立君金立杰罗璇官桂范邵华刘大维苗立红
- 关键词：乙型肝炎疫苗免疫刺激复合物免疫原性表面抗原
- 30L生物反应器连续灌注培养重组CHO-C_(28)细胞表达HBsAg的研究被引量：5
- 1999年
- 应用３０ Ｌ生物反应器和微载体悬浮 培养技术，通过电脑全自动控制，连续灌注培养分泌ＨＢｓＡｇ 的重组ＣＨＯ－Ｃ２８细胞。试验了培养方式、连续灌流速度，反应器转速和细胞对葡萄糖消耗等工艺条件。观察培养６０ 天，细胞的生长形态、ＨＢｓＡｇ 分泌动态和染色体数。研究结果表明，连续培养６０ 天，细胞密度可达７．０×１０６ｃｅｌｌｓ／ｍ ｌ，平均维持在（５．０～６．０）×１０６ｃｅｌｌｓ／ｍ ｌ，收液的ＲＰＨＡ 滴度可达１∶５１２，ＨＢｓＡｇ 每天平均产量为３０ ｍ ｇ。
- 官桂范李志强王妍李云富耿星涛陈万革叶世德
- 关键词：CHO-C28细胞表面抗原乙型肝炎生物反应器
- 重组(CHO细胞)乙型肝炎疫苗稳定性的研究被引量：1
- 2003年
- 为了观察 10 μg/ml、2 0 μg/ml的重组中国仓鼠卵巢细胞 (CHO细胞 )乙型肝炎 (乙肝 )疫苗的稳定性 ,将 10 μg/ml、2 0 μg/ml疫苗放置 4℃ 2、3、4年后 ,分别接种NIH(美国国立卫生研究院 )小鼠 ,采用放射免疫试验 (RIA)检测血清中乙肝病毒表面抗体 (抗 HBs)。根据疫苗的ED50 算出相对效力。 10 μg/ml剂量疫苗相对效力平均值分别为 2年 1 83,3年 1 36 ,4年 0 83;2 0 μg/ml剂量疫苗相对效力平均值分别为 2年 1 91,3年 1 75 ,4年 1 75。结果表明 ,2 0 μg/ml疫苗的稳定性相对优于 10 μg/ml疫苗。
- 罗璇蔡岩官桂范魏自力陈万革金立杰
- 关键词：CHO细胞乙型肝炎疫苗稳定性
- 基因工程乙肝病毒表面抗原纯化工艺研究被引量：7
- 1999年
- 基因工程乙肝病毒表面抗原（ｒＨＢｓＡｇ）是由重组哺乳动物细胞ＣＨＯ系分泌表达的，经过纯化制备基因工程乙肝疫苗。目前在国际上，对从ＣＨＯ细胞培养液中分泌的ｒＨＢｓＡｇ，纯化工艺主要采用多步柱层析和超滤技术，而在国内，ＣＨＯ系ｒＨＢｓＡｇ的大规模生...
- 王妍王群罗璇官桂范魏自力阎昆明
- 关键词：基因工程HBSAG纯化工艺小牛血清
- 疏水作用柱层析技术纯化HBsAg条件的筛选被引量：6
- 1998年
- 在应用流水作用柱层析纯化HBsAg中，对流水介质的功能基类型、交联密度、盐的浓度、操作温度等决定疏水性强弱的因素作了比较研究。结果表明，应用以C4为功能基的Butyl—Sepharose（6～8μmol／ml）和以C3为功能基的Propyl－Sepharose（20～22μmol／ml）疏水介质、8％（NH4）2SO4，18～24℃等条件纯化HBsAg时结果较理想。
- 王妍刘大维罗璇王群官桂范魏自力叶世德
- 关键词：乙肝表面抗原功能基
- CHO细胞分泌rHBsAg中氨基酸消耗规律的分析被引量：3
- 1995年
- 用氨基酸测试仪分析重组CHO细胞分泌rHBsAg过程中氨基酸的浓度，发现氨基酸的消耗有一定的规律性，其中以丝氨酸、脯氨酸、组氨酸、谷氨酸、亮氨酸、赖氨酸、异亮氨酸消耗较快。
- 王妍李志强官桂范罗璇叶世德
- 关键词：重组CHO细胞乙型肝炎
- 应用生物反应器连续培养基因重组CHO细胞的研究被引量：5
- 1993年
- 应用5L生物反应器悬浮培养乙肝重组DNA转化的CHO细胞B_(43)株生产HBsAg。试验了细胞接种量、微载体的加入方式、培养方法(半流加培养和连续灌流培养)对细胞生长形态和HBsAg分泌的影响,初步建立了5L生物反应器的生产工艺,在5L生物反应器最适合连续灌流培养的条件是pH 7.30—7.40,DO 25—35%,T 36.5℃,微载体6—8g/L,灌流速度5.5—7.5L/24h细胞连续培养60天,细胞密度维持在5.0×10~6—1.0×10~7/ml之间,收获细胞液的RPHA效价为1:512—1:1024,HBsAg含量为3—5mg/L。
- 李志强官桂范王妍张兴义叶世德张权一
- 关键词：生物反应器乙型肝炎表面抗原
- 冻干甲乙型肝炎联合疫苗组分相容性的研究被引量：3
- 2006年
- 目的研究冻干甲乙型肝炎联合疫苗组分的相容性。方法将所制备的联合疫苗与同批单价甲型肝炎减毒活疫苗及重组乙型肝炎疫苗进行甲肝病毒滴度和乙肝疫苗效力检测,同时分别以联合疫苗与甲型肝炎减毒活疫苗及重组乙型肝炎疫苗接种恒河猴,检测甲肝抗体和HBsAb阳转率。结果该联合疫苗与同批单价疫苗的甲肝病毒滴度和乙肝疫苗效力及诱导猴体的甲肝抗体和HBsAb阳转率差异均无显著意义。结论冻干甲乙型肝炎联合疫苗组分间无拮抗作用,具有相容性。
- 刘令九谢宝生官桂范李淑焱薛勇岳丹刘景晔王鹏富
- 关键词：甲型肝炎乙型肝炎联合疫苗
- 急性粒细胞性白血病相关抗原的研究
- 1984年
- 提要 我们应用梯度离心、低渗氯化钠,超高速离心和超声波粉碎等处理提取了12份经临床及骨髓涂片确诊为急性粒细胞性白血病病人的白血病相关抗原。经紫外分光光度计扫描检查,9份均在257—252nm间出现最高吸收峰。同时用正常人白细胞按同法制备白细胞抗原。
- 艾元洪张贻林潘荆华官桂范张权一
- 关键词：相关抗原抗血清正常人共同抗原急性粒细胞性白血病人白细胞抗原
- 微载体再生的研究被引量：1
- 1994年
- 将使用过的Cytodex1微载体用0．1mol／L醋酸处理后，再用于细胞培养，结果细胞生长速度、形态和抗原分泌量与新微载体相比，无明显差异。经处理的微载体再生率达70％～90％。
- 李志强王妍官桂范李云富张兴义叶世德
- 关键词：微载体
