尚西亮
- 作品数：6 被引量：52H指数：4
- 供职机构：南昌大学第二附属医院更多>>
- 发文基金：江西省卫生厅中医药科研基金江西省科技厅科研基金江西省教育厅科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 三七总皂甙对大鼠肝卵圆细胞增殖肝脏CX/GJIC的影响被引量：6
- 2006年
- 目的研究三七总皂甙(Panax notoginoside,PNS)对大鼠肝卵圆细胞增殖模型肝脏缝隙连接蛋白(con-nexin,CX)表达及其介导的缝隙连接细胞间通讯(gap junction intercellular communication,GJIC)的影响。方法选择体重150 g左右的雄性Wistar大鼠,随机分为对照组、模型组和PNS组。采用2-AAF/PH方法(2-acetylamin-ofluorene+two thirds partial hepatectomy)建立肝卵圆细胞增殖模型,切开标记/染料示踪技术(incision loading/dye transfer,IL/DT)检测肝脏GJIC,免疫组织化学法检测CX32、43的表达和计数肝卵圆细胞,并观察PNS腹内注射后的表达变化。结果(1)对照组未见肝卵圆细胞,PNS组、模型组肝卵圆细胞增殖明显;PNS组与模型组相比,卵圆细胞增殖高峰低、持续时间长。(2)各组CX32和GJIC的表达:模型组与PNS组均低于对照组,表达峰呈先下调后逐渐恢复趋势,PNS组高于模型组。(3)各组CX43的表达:模型组与PNS组均高于对照组,表达峰呈先升高后逐渐恢复与肝卵圆细胞的增殖趋势一致,PNS组与模型组相比表达高峰滞后。结论2-AAF/PH是理想的肝卵圆细胞增殖模型;CX32和GJIC的下调可动员肝卵圆细胞,CX43可促进其增殖,CX/GJIC对肝卵圆细胞增殖有重要的调控作用;PNS可通过影响CX/GJIC的表达,调节肝卵圆细胞的增殖过程。
- 李学东尚西亮傅华群黄长文
- 关键词：三七总皂甙肝卵圆细胞缝隙连接蛋白缝隙连接细胞间通讯
- 缝隙连接细胞间通讯在炎症、损伤修复和疾病中的作用被引量：8
- 2006年
- 缝隙连接是相邻细胞间的通道结构,其主要功能是细胞通讯,又称缝隙连接细胞间通讯。缝隙连接细胞间通讯是细胞间最重要的信息交流形式,可调节组织细胞的生长、分化,在组织保持内稳态中处于核心地位。本文就缝隙连接细胞间通讯在炎症、损伤修复和疾病中的作用等方面作一综述。
- 尚西亮李学东傅华群
- 关键词：连接蛋白炎症疾病细胞间通讯缝隙连接细胞间通讯
- 大鼠肝卵圆细胞增殖模型肝脏的GJIC功能和意义被引量：1
- 2007年
- 目的:研究大鼠肝卵圆细胞(HOC)增殖模型肝脏缝隙连接蛋白32,43(CX)的表达及缝隙连接细胞间通讯(GJIC)的功能,探讨HOC增殖的可能机制.方法:健康(?)Wistar大鼠,随机分成正常对照组(n=6),模型组.模型组大鼠按每天20 mg/kg剂量灌喂2-AFF,连续4 d,第5天不灌喂行2/3肝切除,术后次日按每天20 mg/kg剂量继续灌喂5 d(2-AFF/PH).模型组在术后4h,4,8,12和16d随机取6只大鼠检测.采用组织病理技术观察肝组织的形态学变化;免疫组化和细胞形态学方法计数HOC;切开标记/染料示踪技术(incision loading/dye transfer,IL/DT)技术确定GJIC;免疫组化及RT-PCR技术检测CX32蛋白及mRNA表达;免疫组化、Western blot及RT-PCR技术分析CX43蛋白及mRNA水平.结果:对照组及模型组4 h未见HOC增殖.模型组4d汇管区有HOC增殖反应,8d HOC增殖达峰值,12d HOC从汇管区向肝实质内浸润,16d HOC增殖减少较12 d减少;IL/DT检测结果显示,模型组各时点(4h,4,8,12和16d)染料扩散距离低于对照组(84.5±3.4,60.6±3.3,108.6±4.2,150.6±2.6,199.6±3.7μm vs 250.0±5.0 um,P<0.01),GJIC功能降低.模型组各时点CX32表达均低于对照组(P<0.05),在4 h下调,4d达低峰(2.85±0.39),8d后逐渐恢复;RT-PCR显示模型组CX32 mRNA在4h开始下降,4d达低峰(0.33±0.11),8 d后逐渐恢复,16 d高于对照组,但无显著差异(P>0.05).Western blot结果显示模型组CX43蛋白表达在4 h上调(P>0.05)、4-16 d明显升高;RT-PCR显示模型组4h CX43 mRNA上调(P>0.05),4 d表达明显升高,12 d达高峰(5.46±0.58),16 d低于对照组,但无显著差异(P>0.05).结论:采用Solt-Farber方法成功建立了HOC增殖动物模型;大鼠2-AAF/PH肝脏CX表达呈时空特异性变化,使肝脏GJIC功能抑制.肝脏的GJIC抑制可能启动了HOC增殖.
- 李学东傅华群李少华尚西亮邢宏松胡鹏
- 关键词：肝卵圆细胞缝隙连接蛋白缝隙连接细胞间通讯逆转录-聚合酶链反应
- 三七总皂甙对人肝癌细胞缝隙连接细胞间通讯的调节机制被引量：6
- 2007年
- 目的:观察三七总皂甙对人肝癌细胞SMMC-7721缝隙连接细胞间通讯、以及缝隙连接蛋白32mRNA和磷酸化细胞外信号调节激酶1/2表达的影响。方法:实验于2005-08/2006-03在江西省分子医学重点实验室完成。①实验操作:SMMC-7721细胞用含100mg/L,200mg/L,400mg/L三七总皂甙的培养液预处理,对照组SMMC-7721细胞不加三七总皂甙。②实验评估:采用划痕标记/染料示踪技术检测缝隙连接细胞间通讯的变化;采用反转录-聚合酶链反应检测缝隙连接蛋白32mRNA水平;采用流式细胞仪检测磷酸化细胞外信号调节激酶1/2的表达。结果:①对照组染料局限于划痕两侧的细胞内,无明显的荧光染料传输,GJIC阴性;三七总皂甙可上调染料传输范围,且随三七总皂甙剂量增高,染料传输范围逐渐增大,最远可达三四层细胞。②反转录-聚合酶链反应结果显示,各组细胞缝隙连接蛋白32mRNA水平差异无显著性意义(P>0.05)。③流式细胞仪结果显示,对照组SMMC-7721细胞磷酸化细胞外信号调节激酶1/2表达的阳性率较高,伴随三七总皂甙剂量增加磷酸化细胞外信号调节激酶1/2表达的阳性率逐渐下降,呈一定的剂量依赖效应。结论:三七总皂甙可能通过抑制SMMC-7721细胞磷酸化细胞外信号调节激酶1/2的活化减少缝隙连接蛋白32的磷酸化,进而上调SMMC-7721细胞的缝隙连接细胞间通讯功能。
- 李学东尚西亮刘锡文黄长文傅华群
- 关键词：肝肿瘤三七皂甙蛋白激酶类
- 肝脏GJIC对大鼠体内肝卵圆细胞增殖的影响
- 2007年
- 目的:研究肝脏缝隙连接细胞间通讯(GJIC)对大鼠体内肝卵圆细胞(HOC)增殖的影响.方法:健康♂Wistar大鼠,随机分成对照组(n=6)、模型组、苯巴比妥(Phenobarbital,PB)组.模型组大鼠按每天20 mg/kg剂量灌喂2-AFF,连续4 d,第5天不灌喂行2/3肝切除,术后次日按每天20 mg/kg剂量继续灌喂5 d (2-AFF/PH);PB组予以0.8 g/L PB饮水7 d,第8天按模型组处理,0.8 g/L PB饮水持续至实验结束.模型组、PB组在术后4 h,4,8,12和16 d随机取6只大鼠检测.采用组织病理技术观察肝组织的形态学变化;免疫组化和细胞形态学方法计数HOC;切开标记/染料示踪技术(incision loading/dye transfer,IL/DT)技术确定GJIC:免疫组化及RT-PCR技术检测CX32蛋白及mRNA表达:免疫组化、Western blot及RT-PCR技术分析CX43蛋白及mRNA水平.结果:对照组及模型组和PB组4 h未见HOC增殖.模型组4 d汇管区有HOC增殖反应,8 d HOC增殖达峰值,12 d HOC从汇管区向肝实质内浸润,16 d HOC增殖较12 d减少.与模型组比较PB组4-16 d各时点HOC明显增加(P<0.01);IL/DT显示各时点模型组大鼠肝脏GJIC均低于对照组(P<0.01),与模型组比较PB组各时点GJIC进一步降低(P>0.01):模型组、PB组各时点CX32的表达低于对照组(P<0.05),与模型组比较PB组CX32表达在4 h,12,16 d时点减少(P<0.05),在4,8 d时点表达增多(P<0.05):模型组4 h-16 d时点CX32 mRNA水平分别为对照组的0.82±0.13,0.33±0.11,0.51±0.13,0.68±0.14,1.12±0.18倍,与模型组比较PB组4 h时点无显著差异(P>0.05),4-16 d时点明显升高(P<0.05).模型组4 h-16 d各时点CX43蛋白表达分别为对照组的1.14±0.17,3.87±0.35,5.28±0.48,2.96±0.33,2.12±0.19倍,与模型组比较PB组CX43蛋白4 h上调(P>0.05),4-16 d明显减少(P<0.05).模型组4 h-16 d各时点CX43 mRNA水平分别为对照组的1.09±0.16,2.82±0.23,5.46±0.58,3.34±0.64.0.91±0.11倍.与模型组比较PB组各时点CX43 mRNA表达上调(P<0.05).结论:改变大鼠2-AAF/PH模型肝脏CX32、CX43的时空表达模�
- 李学东傅华群李少华尚西亮邢宏松胡鹏
- 关键词：肝卵圆细胞缝隙连接蛋白缝隙连接细胞间通讯逆转录-聚合酶链反应
- 三七总皂甙对人肝癌细胞的抑制作用被引量：39
- 2006年
- 目的:观察三七总皂甙对人肝癌细胞SMMC-7721增殖、凋亡及缝隙连接细胞间通讯的影响。方法:实验于2005-08/2006-02在江西省分子医学重点实验室完成。①人肝癌细胞株SMMC-7721由江西省医学科学研究所提供,三七总皂甙注射剂(从五加科人参属多年生草本植物三七中提取的有效成分,昆明制药集团股份有限公司)。②以二苯基四氮唑溴盐比色法观察三七总皂甙对SMMC-7721细胞增殖的影响,分为三七总皂甙25,50,100,200,400,800mg/L组,设不加三七总皂甙为空白对照。③用流式细胞仪检测细胞周期时相分布及细胞凋亡率,并采用划痕标记/染料示踪技术观察三七总皂甙对SMMC-7721细胞的缝隙连接细胞间通讯功能的影响。结果:①三七总皂甙对SMMC-7721细胞增殖的抑制作用:随着三七总皂甙浓度增大、作用时间延长,其对SMMC-7721细胞增殖的抑制作用逐渐增强,呈明显的浓度-时间依赖关系,至800mg/L则有细胞毒性。②三七总皂甙对SMMC-7721细胞周期时相分布和细胞凋亡率的影响:不同浓度的三七总皂甙处理细胞72h后,与空白对照组相比,G0/G1期细胞明显增多,S期和G2/M期细胞减少,且三七总皂甙浓度越高,该作用越强,其中三七总皂甙400mg/L组72h后G0/G1期细胞高达87.42%;同时三七总皂甙还能诱导SMMC-7721细胞凋亡,并呈明显的剂量效应正比关系。③三七总皂甙对SMMC-7721细胞的缝隙连接细胞间通讯功能的影响:三七总皂甙可上调或恢复SMMC-7721细胞的缝隙连接细胞间通讯的作用,400mg/L三七总皂甙处理72h后,荧光染料传输的范围可达4～5层细胞。结论:三七总皂甙可抑制SMMC-7721细胞增殖、促进细胞凋亡,使细胞生长阻滞于G0/G1期,同时上调或恢复细胞的缝隙连接细胞间通讯功能,其抗肿瘤作用可能与此有关。
- 尚西亮傅华群刘佳李学东
- 关键词：三七皂甙肝肿瘤细胞增殖细胞凋亡
