庞岚
- 作品数:2 被引量:15H指数:2
- 供职机构:电子科技大学更多>>
- 发文基金:国家科技部专项基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域:生物学更多>>
- 性逆转石斑鱼性腺差异表达基因的克隆和筛选被引量:13
- 2004年
- 以 17α 甲基睾丸酮 (17α MT)饲喂 2~ 4龄赤点石斑鱼 (Epinephelusakaara) ,成功地促使其性转变为具有生殖功能的雄鱼 .应用抑制性差减杂交 (SSH)技术构建了石斑鱼性反转前后性腺组织的SMARTcDNA文库及其cDNA差减文库 ,从中随机挑取 12 0 0个克隆进行了PCR和斑点杂交筛选 ,得到 12 0个差异表达cDNA片段 .挑选 71个cDNA克隆测序 ,将所测序列经GenBank检索和生物信息学比较 ,发现有 5 1个cDNA片段序列无明显的同源性 ,2 0个片段与报道的基因有较高同源性 .在这 2 0个具同源性的片段中有 3个片段可能是与性别分化密切相关的重要功能基因 ,它们是钙调蛋白基因、活性蛋白激酶C受体基因和一氧化氮合酶蛋白抑制剂基因 .这 3个基因被分别命名为鱼钙调蛋白基因 (GenBankaccession :AY2 8136 3)、鱼活性蛋白激酶C受体基因 (GenBankaccession :AY2 8136 4)和鱼一氧化氮合酶蛋白抑制剂基因 (GenBankaccession :AY2 8136 5 ) .
- 李尚伟文建军庞岚刘世贵
- 关键词:性逆转石斑鱼性腺抑制性差减杂交基因克隆
- 性逆转石斑鱼脑垂体差异表达基因克隆的筛选被引量:3
- 2003年
- 以 1 7 α甲基睾丸酮投喂赤点石斑鱼 (Epinephelusakaara) ,成功地获得了性逆转的有功能的雄鱼。用SMARTcDNA合成和长片段PCR技术构建了性逆转前后脑垂体cDNA文库 ;用抑制消减杂交技术建立了性反转前后抑制性差减文库。对获得的 5 60个雄鱼脑垂体PCR阳性克隆和35 0个雌鱼脑垂体PCR阳性克隆进行斑点杂交 ,共筛选到 1 0 3个差异表达cDNA片段。对其中2 9个克隆进行了测序 ,与GenBank中的已知基因序列进行同源性比较 ,发现有 6个片段为促性腺激素α亚基前体基因 (GenBank注册号 :AY2 0 7430 ) ,与同属不同种的石斑鱼促性腺激素α亚基前体基因有 97%的同源性 ;1个片段为生长激素前体 (GenBank注册号 :AY2 0 7431 ) ,与同属不同种的石斑鱼生长激素前体基因有 99%的同源性 ;其余 2
- 胡国库张义正庞岚文建军
- 关键词:性逆转石斑鱼脑垂体基因克隆抑制消减杂交CDNA合成